ATP生物发光技术快速检测牛乳体细胞数

探索利用ATP生物发光技术快速检测牛乳体细胞数的可行性。利用ATP生物发光技术测定牛乳体细胞中ATP的浓度,根据体细胞中ATP的浓度与体细胞数成正比的原理,推算出牛乳中的体细胞数,并与显微镜计数法对比,分析两种方法之间的相关性。结果表明:ATP生物发光技术的检测结果与显微镜计数法有很好的相关性,是一种快速、简便的检测牛乳体细胞的方法。

ATP生物发光技术在微生物检测中的应用

ATP(三磷酸腺苷)生物发光法作为一种不断完善成熟的微生物快速检测方法,具有简便、快速、高灵敏度等优点。对该方法的历史发展、检测原理、目标物提取方法、应用领域和最新研究成果等做重点介绍,并对ATP生物发光法的应用现状和发展方向进行总结和展望。

ATP生物发光技术在微生物快速检测中的应用

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有简便、灵敏度高、可实时检测等优点。本文就ATP生物发光法的检测原理、在食品微生物检测中的应用进行了综述,并对ATP生物发光法的存在的问题及今后的发展方向进行了展望。

食品工程中ATP生物发光技术的应用分析

以往食品工程中,主要采用PCR技术、酶联免疫法等技术检验食品的安全性,虽然能够获取较为可靠的检验结果,但是检验操作流程复杂繁琐,检验时间过长,且检验结果存在一定的延迟性,这就无法为食品安全评估、管理提供及时全面的科学依据,并严重制约了食品安全检验能力及水平的提升。随着科学技术的蓬勃发展,ATP生物发光技术应运而生,其具备操作简单方便、检验效率高、精准度高、灵敏度高等一系列优点,不仅有效弥补了传统检验技术的不足和缺陷,也充分满足了当前高标准的食品安全检测需求,这也使得其广泛应用于食品工程。但是,目前缺乏系统综述梳理ATP生物发光技术在食品工程中的应用,限制了该技术在食品工程中的推广和应用。基于此,本文系统总结了食品工程中ATP生物发光技术应用重要性、应用流程以及注意事项。本研究为食品检测技术发展提供助力。

利用生物发光分析技术快速检测微生物的方法学研究

阻碍三磷酸腺苷（ＡＴＰ）－虫萤光素酶发光体系用于微生物快速检测的主要因素之一，在于使用了不适当的非微生物ＡＴＰ清除方法和微生物ＡＴＰ提取方法．文章对非微生物ＡＴＰ的清除和微生物ＡＴＰ提取方法进行了实验研究．选择ＴｒｉｔｏｎＸ－１００作为非微生物ＡＴＰ淬取剂．Ａｐｙｒａｓｅ作为非微生物ＡＴＰ清除剂．三氯醋酸作为微生物ＡＴＰ的淬取剂．观察了淬取剂及清除剂浓度对淬取效果及ＡＴＰ分析的影响．最佳工作浓度分别为：ＴｒｉｔｏｎＸ－１０００．１５％、ａｐｙｒａｓｅ０．１％、三氯醋酸１．５％．对超声、加热超声、加热、三氯醋酸、氯仿淬取微生物ＡＴＰ的方法作了对比研究，认为三氯醋酸方法更简便。

利用ATP生物发光法快速检测丽娃河中细菌总数

利用ATP生物发光法对丽娃河中细菌总数进行了快速检测。结果表明,丽娃河中细菌总数维持在0.72×106～1.2×107 CFU/mL,较综合整治前的水质有了明显地改善。研究了游离ATP以及浮游生物等对发光强度的影响,发现对样品采用过滤的方法进行预处理是提高ATP生物发光法精确度的一种重要手段。

ATP生物发光法——一种新的快速微生物检测技术

传统的细菌数检测是通过平板培养计数菌落形成单位来实现的。ATP生物发光法(ATP Bioluminescence)提供了一种新的快速微生物活菌计数方法。由于其全部操作过程在半小时甚至几分钟內完成,而且检测灵敏度高,因此。

辐照对农产品中细菌ATP生物发光检测的干扰

ATP生物发光技术已广泛应用于样品含菌量的快速检测,但在应用该方法检测农产品的辐照灭菌效果时却出现了发光强度均高于对照的现象。本文分别从γ射线对ATP的影响、发光动力学以及发光强度增高的途径等方面对上述现象进行了研究。结果表明,发光强度的增加并非由ATP所造成引起的,而是由农产品中含有的细菌经辐照后引起的;干扰荧光素—荧光素酶制品中存在的能引起光辐射的物质是形成干扰的另一方面的原因。

化学发光免疫分析技术在微生物检测中的应用

化学发光免疫分析技术凭借其化学发光的高灵敏性和免疫反应的高特异性在微生物快速检测中广泛应用。该文着重叙述了化学发光免疫分析技术核心检测体系在微生物检测中的研究进展,并对其涉及到的样品前处理和检测新方法进行了综述。化学发光免疫分析技术检测微生物用时短、成本低,但特异性识别方法和检测的灵敏度有待提升,新型的发光体系、发光放大方法、可替代抗体的识别分子以及相关的前处理技术是未来研究的重点。

高灵敏适配体电化学发光生物传感器检测血样中的ATP

构建以钌联吡啶衍生物为信号物质的高灵敏和可重复使用适配体电化学发光生物传感器是一个具有挑战性的研究课题。以Au-S键固定钌联吡啶衍生物．适配体电化学发光探针，在工作电位高于0．80V会引起Au-S键的断裂，造成传感器难于重复使用。本研究构建了以适配体为分子识别物质，以钌联吡啶衍生物为信号物质，以ATP为目标分子的电化学发光适配体传感器，建立检测ATP的新方法。

ATP生物荧光技术在卵巢癌体外药敏检测中的应用

目的 评价ATP生物荧光肿瘤药敏检测与临床疗效的相关性,探讨其临床应用价值。方法 对34例卵巢癌新鲜瘤组织和腹水进行肿瘤细胞分离、原代培养,以ATP生物荧光体外药敏检测技术进行检测。结果ATP生物荧光法测定细胞数量具有相关性好(r=0.9981),量程宽(10-100000个细胞),敏感性高(最小检测10个活细胞)的优点,其检测结果与其他方法相比有较高的相关性。32例卵巢癌病人体外药敏结果表明,其整体预测值为90.6％;其中阳性预测值为94.7％,阴性预测值为84.6％,敏感性90％,特异性91.7％。各种药物体外药敏检测结果与临床资料基本相符。结论 ATP生物荧光肿瘤药敏检测结果与临床疗效具有较好的相关性。该药敏检测方法对于筛选及临床应用新药,研究和确定新的化疗方案和治疗原则,评估联合用药方案,实现肿瘤病人的个体化化疗具有指导作用。

辐照对脱水蔬菜细菌ATP生物发光检测的影响

以4种脱水蔬菜为对象,研究ATP生物发光法检测辐照处理脱水蔬菜样品的含菌量时,ATP生物发光强度与细菌含量不一致的原因。结果表明:辐照对样品的本底发光无明显影响,也未改变荧光素酶发光系统的光谱;电离辐射在杀灭样品中细菌的同时降低了细菌体内ATP酶的活性,使死亡细菌中的ATP不能随细菌的死亡而降解,并从死亡细菌体内扩散出来,从而增加了样品中游离ATP的浓度,导致细菌ATP提取液的发光强度与实际含菌量不一致;去除样品中游离ATP后,细菌ATP提取液的发光强度与实际含菌量的动态变化已趋于一致。ATP生物发光技术可很好地应用于辐照产品的细菌检测。

应用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术研究大肠癌药敏的异质性

目的探讨用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)研究大肠癌药敏的异质性和个体化疗的可行性。方法用ATP-TCA检测58例大肠癌标本对16种单药或联合用药的敏感性。结果个体之间的药物敏感性存在着明显的异质性。单药中最有效的药物为长春瑞滨、羟基喜树碱、氟尿嘧啶和紫杉醇。联合用药最有效的是氟尿嘧啶+丝裂霉素+阿糖胞苷,91.6%(11/12)的标本对其敏感,其次是氟尿嘧啶+顺铂+阿霉素,健择+顺铂和5-FU氟尿嘧啶+长春新碱+卡氮芥。结论大肠癌对抗癌药物的敏感程度存在着异质性。ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术可用于为大肠癌选择合适的化疗药物。

ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术在乳腺癌化疗中的应用价值

目的 探讨ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术 (ATP TCA )在乳腺癌化疗中的临床意义及应用价值。方法 选用 10种常用乳腺癌化疗药物 ,应用ATP TCA对 40例乳腺癌改良根治术标本、淋巴结活检和胸腔积液标本进行药敏检测 ,评估肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。结果 ATP TCA对乳腺癌标本的可评价率为 90 .0 % ,化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性 ,10种化疗药物的敏感性分别为 :氟尿嘧啶 ( 5 Fu) 3 3 .3 %、顺铂 (DDP) 3 7.5 %、环磷酰胺 (CTX ) 2 9.2 %、足叶已甙 (VP 16)16.7%、丝裂霉素 (MMC) 2 2 .0 %、表阿霉素 (EPI) 41.7%、诺维本 (NVB) 45 .8%、阿霉素 (ADM ) 41.7%、泰素 (PTX) 5 4.2 %、羟基喜树碱 (HCPT) 2 5 .0 %。初步研究表明ATP TCA体外检测结果与实际临床疗效具有良好的相关性。结论 ATP TCA是准确的、可靠的肿瘤药敏检测技术 ,其检测结果与临床实际疗效具有良好相关性 。

基于裂解酶与ATP生物发光法特异定量检测炭疽杆菌方法的研究

目的:原核表达炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶(PlyG)和萤光素酶(Luc),结合这2种酶建立特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法:PCR扩增得到带有His标签的裂解酶基因和萤光素酶基因,构建重组表达载体pET22b-plyG和pET22b-luc,转化至大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,过镍柱纯化得到目的蛋白;利用裂解酶裂解和ATP生物发光定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1,与平板计数法对比建立线性关系。结果:表达了炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶和萤光素酶,并建立了特异定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1的方法,与平板计数方法具有显著的线性相关。结论:因炭疽杆菌与蜡样芽孢杆菌RSVF1均对PlyG具有较强的敏感性,故本研究所建立的将炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶与萤光素-萤光素酶系统相结合的检测方法对现场或临床定性定量检测炭疽杆菌提供了理论支持,具有良好的应用前景。

利用生物发光技术检测微量焦磷酸

利用生物发光技术建立了一种高灵敏度的检测微量焦磷酸 ( PPi)的新方法。其原理是首先利用 ATP硫酰化酶 ( ATP sulfurylase)将焦磷酸 ( PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶 ( Luciferase)系统发光检测 ATP的量 ,从而确定样品中PPi的含量。本法快速、灵敏 ,线性范围为 1× 1 0 - 9～ 5× 1 0 - 7mol/ L。方法用于 PCR扩增样品中 PPi的检测 。

电致化学发光生物检测技术的新进展

电致化学发光作为一种分析技术 ,不仅可用于化学分析 ,而且正在被越来越多地用于生物检测和传感技术中。随着该分析技术与免疫检测技术生化固定化技术和微细加工技术等的相互融合 ,电致化学发光生物检测技术具有了更高的精度、分辨率和更广的应用范围。

应用生物发光技术定量检测PCR扩增产物

目的 建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法 ,并用于HBV定量PCR检测。方法 首先利用ATP硫酰化酶 (ATPsulfurylase)将焦磷酸 (PPi)定量转化成ATP ,然后利用虫荧光素酶 (luciferase)系统发光检测ATP ,从而确定样品中PPi含量。利用 2次PCR法扩增HBVDNA目的片段 ,并进行回收纯化定量 ,以之作为阳性标准模板制作标准曲线。选择适当的循环次数扩增样品中HBVDNA ,利用化学发光法检测扩增产物中PPi的量 ,进而确定样品中HBVDNA模板的量。结果 当起始模板量为 (10～ 5 )× 10 5拷贝 ,循环次数为 2 5 ,发光值与起始模板浓度呈现良好的相关。检测 32份样品血清 ,其中 2 3例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 1 6× 10 5拷贝 / μl,9例HBsAg(+)、HBeAg(- )、HBcAb(+)标本中HBVDNA平均含量为 5 6× 10 3 拷贝 / μl。结论 本方法是一种操作简便。