基于ATP生物发光法的文物霉变检测与应用研究

为研究判定ATP(adenosine triphosphate,三磷酸腺苷)生物发光法在文物表面霉菌污染检测中应用可行性、科学性及适用性,利用ATP生物发光法对文物表面50种霉菌的生物发光值进行检测;构建了7种常见霉菌及其混合菌的菌落总数值与ATP生物发光值的线性关系函数,并在对应线性关系下分析了预测菌落总数值与实际值的差异;进一步利用ATP生物发光法评价模拟染霉试样在香茅醛熏蒸处理前后的霉菌数量变化。结果显示:50株待测霉菌中90%霉菌均检出了生物发光值(RLU)。在不同培养条件下,青霉、曲霉、木霉、毛壳菌、枝孢菌以及其混合菌的菌落总数对数值(lg^(CFU/mL))与生物发光对数值(lg^(RLU))之间均呈现了良好的线性关系,相关系数R^(2)>0.9817;在相应的线性关系下,预测的菌落总数值与实际平板计数的菌落总数值具有一致性(P<0.05),说明ATP生物发光法可以对文物表面霉菌进行准确相对定量。此外,香茅醛熏蒸处理组和对照组文物表面霉菌的生物发光值和菌落总数呈现了相同的差异变化趋势,说明ATP生物发光法可以直接用于熏蒸剂抑菌效力的评价。因此,ATP生物发光法在文物霉变检测中具有很高的适用性,同时在文物霉变程度分析及霉变文物消杀处理的效果评价等方面具有良好的应用价值,可为文物微生物病害的防控提供有效的技术支持。

ATP生物发光法在微生物检验中的应用

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有简便、灵敏度高、可实时检测等优点。本文就ATP生物发光法的检测原理、检测步骤、特点、检测的影响因素及在食品工业中的应用进行了综述,并提出了目前ATP生物发光法检测中存在的问题。

利用ATP生物发光法测定西湖水体微生物量

介绍了ATP生物发光法的基本原理和测量方法，将该方法应用于西湖水体微生物量的实际测量，得到西湖水体微生物浓度为10^6～10^7个．mL^-1，总体分布为近岸高于湖心，夏季高于春季，旅游、垂钓等人为活动对西湖水体微生物的分布有较大影响，另外，饭店养鱼池附近的微生物浓度较高，但对西湖主体并没有明显的影响，引水工程对西湖水体有一定的稀释作用，有利于净化水质．

ATP生物发光法评价餐饮具的微生物污染研究

目的对ATP生物发光法与平板计数法在评价餐饮具微生物污染的检出限及检出率进行评价,并对2种方法的相关性进行研究。方法应用3家国内公司生产的ATP生物发光检测仪,分别对不同浓度的ATP标准溶液检测并绘制标准曲线;以不同浓度的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌液及人工接种大肠杆菌的餐饮具作为被检品,分别应用ATP生物发光法和平板计数法进行检测,绘制ATP生物发光法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌检测的标准曲线,并对2种检测方法在人工污染餐饮具检测的相关性绘制曲线。结果 3家公司的ATP生物发光检测仪对ATP标准溶液、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的检出限差异较大;但在某一检测范围内,3家公司ATP生物发光检测仪的检测RLU值与ATP标准溶液、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌量均有良好的线性相关性。3家公司ATP生物发光检测仪对人工接种大肠杆菌餐饮具的检测显示,ATP生物发光法与平板计数法有良好的线性相关性。结论3家公司的ATP生物发光法对ATP、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的检出限存在不同检测仪的仪器误差,且差异较大,目前,ATP生物发光法不能替代传统的平板计数法来评价餐饮具的微生物污染状况。

ATP生物发光法快速测定生乳中微生物总数的研究

对ATP生物发光法应用于生乳中微生物检测进行了初步摸索,确定了加体细胞裂解液次数为三次;乳样最佳稀释倍数为20倍;用ATP生物发光法对大批乳样进行检测,同时用国标法进行了平皿菌落培养,结果显示,乳中微生物总数对数与光值对数呈正的直线相关(r=0.9485),相关程度为显著相关(P<0.001),二者回归方程为y=1.0496x+2.4。

采用ATP生物发光法分析6株常见细菌ATP含量差异

以ATP生物发光法为基础,辅以国标平板计数法,分析和测定了大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、乳酸链球菌、乳酸片球菌等6株常见细菌中ATP含量的差异。结果显示:当单位体积菌悬液的ATP荧光值相同时,6株细菌菌落总数无明显差异;当菌悬液的菌落总数相同时,6株细菌的单位体积菌悬液ATP含量无明显差异。研究结果同时说明ATP生物发光法能够定量测定常见区域中的细菌总数。

ATP生物发光法快速测定物体表面的菌落总数

以大肠埃希氏菌作为指示菌考量了ATP生物发光法测定物体表面卫生状况的准确性,并在实验室内模拟食品企业卫生管控,采用ATP生物发光法对具有代表性的台面进行细菌总数测定,与国家标准微生物检测方法进行了比对分析。结果显示:大肠埃希氏菌的ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2为0.982 6;以实验室内指定台面作为盲样进行对比测定,其ATP荧光值与菌落总数的线性相关性良好,相关系数R2达到0.915 9,说明ATP生物发光法能够准确评估和测定物体表面的卫生状况。

ATP生物发光法快速测定生乳中微生物总数的研究

本试验对ATP生物发光法应用于生乳中微生物检测进行了初步摸索,确定了加体细胞裂解液次数为3次;乳样最佳稀释倍数为20倍;用ATP生物发光法对大批乳样进行检测,同时用国标法进行了平皿菌落培养。结果表明,乳中微生物总数对数与光值对数呈正的直线相关(r=0.9485),相关程度为显著相关(P<0.001)。

优化的ATP生物发光法快速检测面粉中细菌总数

[目的]建立一种快速检测面粉中细菌总数的方法。[方法]采用优化的ATP生物发光法检测面粉中的细菌总数,考察D-荧光素(Ln)浓度、萤火虫荧光素酶(FL)浓度、Mg2+浓度对生物发光反应的影响。[结果]Ln浓度为70 mg/L,FL浓度为50 mg/L,Mg2+浓度为0.250 0 mmol/L时,ATP生物发光法的测定结果较理想。该法最低检测细菌总数为1.0×103cfu/ml,与传统的平板计数法具有良好的相关性(P>0.05),RSD为4.0%。[结论]优化的ATP生物发光法成本低、操作简便、反应迅速、准确可靠,能快速检测出食品中的细菌总数。

ATP生物发光原理及应用研究

ATP生物发光是一种快速的微生物检测方法,具有灵敏、快速、简便、稳定等优点,本文就其原理、特点及在食品卫生、医药中的应用进行了综述。

ATP生物发光法检测布拉氏酵母菌总数的研究

利用ATP生物发光法建立了布拉氏酵母菌与相对发光值的定量线性模型,对比研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和苯扎溴铵(BAB)两种提取剂在不同的浓度、提取时间下对酵母菌相对发光值的影响。结果表明,浓度为0.015%CTAB作用时间4min的提取效果最好。同时,对检出的RLU值的对数值与菌落总数的对数值作统计学线性相关分析发现,R^2=0.9919,具有统计学意义。ATP生物发光法对布拉氏酵母菌的最低检测限是10~3cfu/mL。

肉品新鲜度的ATP生物发光法检测研究

目的:研究ATP生物发光法用于肉品新鲜度检测和肉品质量评价的可行性。方法:以新鲜现宰泥鳅作为评估对象,用体细胞ATP提取剂ST提取肉类细胞ATP,通过生物发光法检测肌肉的发光脉冲值随时间变化的关系,通过该发光试剂的回归方程推算出ATP含量随时间变化的关系。结果:随着死亡时间的延长,肌肉中的ATP含量缓慢下降达到最低值后再开始回升。肌肉中ATP含量变化与死亡时间、保存温度及肌肉所处状态有关。结论:通过生物发光法可检测肉品的ATP含量随时间变化的关系,结合感官检查,可以评价肉品新鲜度、质量。具有简单、快速、可靠的优点。

ATP生物发光法在微生物检验上的应用

微生物检验是食品制造及流通过程中的卫生学检验和质量管理的重要项目。食品的细菌学检验通常采用琼脂平板菌数计数法，一般需要２～３天，检验结果往往滞后。许多食品在生产当天就必须出售，因此急需有即时性的细菌学检验方法。近年来，国外普遍实行ＨＡＣＣＰ（食品制造...

ATP生物发光法在快速检测物体表面清洁度中的应用

[目的]建立一种快速、准确检测物体表面清洁度的方法。[方法]以ATP生物发光微生物检测技术为指导,提取重组的萤火虫荧光素酶并配制成荧光反应试剂,测定其与ATP发光反应值的线性关系;根据ATP含量与细菌数量成正比例关系原理,测定物体表面ATP发光强度值,同时用国标平皿计数法测定其菌落总数,两者对比分析。[结果]ATP生物发光法检测的相对荧光值与物体表面的菌落总数存在良好的线性相关性,利用ATP发光法实时检测细菌总数可以很好地弥补国标法的不足。[结论]ATP生物发光法与传统的细菌总数国标平板计数法相比较具有操作简便、快速灵敏、成本低廉、绿色环保等优点,可以快速、准确地检测物体表面清洁程度。

基于裂解酶与ATP生物发光法特异定量检测炭疽杆菌方法的研究

目的:原核表达炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶(PlyG)和萤光素酶(Luc),结合这2种酶建立特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法:PCR扩增得到带有His标签的裂解酶基因和萤光素酶基因,构建重组表达载体pET22b-plyG和pET22b-luc,转化至大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,过镍柱纯化得到目的蛋白;利用裂解酶裂解和ATP生物发光定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1,与平板计数法对比建立线性关系。结果:表达了炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶和萤光素酶,并建立了特异定量检测蜡样芽孢杆菌RSVF1的方法,与平板计数方法具有显著的线性相关。结论:因炭疽杆菌与蜡样芽孢杆菌RSVF1均对PlyG具有较强的敏感性,故本研究所建立的将炭疽杆菌噬菌体γ裂解酶与萤光素-萤光素酶系统相结合的检测方法对现场或临床定性定量检测炭疽杆菌提供了理论支持,具有良好的应用前景。

人参毛状根及愈伤组织中ATP动态变化的生物发光法测定

ATP content of cultured callus and hairy root introducted by Ri plasmid of \%Panax ginseng \%C. A. Mey was detected by bioluminescence. The result showed that ATP content in hairy root is obviously higher than that in callus within a growth cycle. The highest ATP content in hairy root is 26.6×10\+\{-12\}mmol/g (fresh weight), while ATP in callus is 2.68×10\+\{-12\}mmol/g (fresh weight). Total saponin content in hairy root reaches 2.486% (dry weight), while the saponin in callus is 1.105% (dry weight). The hairy root inducted by Ri plasmid has vigorous ability in secondary metabolism for ginseng saponin synthesis.

生物发光法测定玉米籽粒中ATP的含量

本文采用生物发光法测定玉米籽粒中ATP含量,ATP在0 0 1～0 5 μg/mL的浓度范围内,最大发光强度与浓度的对数成线性关系,线性回归方程Y =0 9973+ 3 6 6 5 1,相关系数为0 9991;RSD值为1 72 7% ;检出限为7 80×10 - 5μg/mL ;平均回收率94 5 % ,灵敏度、精密度高,结果准确。

ATP生物发光法检测拭子的研究进展

ATP(三磷酸腺苷)生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有简便、灵敏度高、可实时检测等优点。就ATP生物发光法的发展概况、检测原理、拭子的操作方法、优势与劣势进行了综述,并提出了ATP生物发光检测拭子的相关研究思路。

ATP生物发光法在饮料微生物检验中的应用分析

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有准确、简便、可实时检测等优点。ATP生物发光法与涂抹法结合能够实现饮料行业在原辅料、机械设备表面、人员及其装备、包装材料、生产环境等关键控制点的卫生状况现场监测与跟踪测定,测定结果与国标法相吻合,该方法能够帮助饮料企业提高日常的卫生管理工作水平,指导对工厂设施、设备、环境等实施清扫、洗涤和杀菌作业,及时发现卫生不良事故并提出解决方案。与滤膜法结合,可增加取样量,快速测定含菌量低的液体样品,又能消除样品中抑菌物质的干扰,能够对CIP系统清洗效果进行评估和指导。