蛋白质残留检测法与ATP生物荧光检测法在机洗后软式内镜清洗质量监测结果不一致原因分析

目的探究蛋白质残留检测法、ATP生物荧光检测法在机洗后软式内镜清洗质量监测结果不一致的原因。方法选取该院内镜中心2023年1—7月处于使用状态的胃镜、肠镜标本15份作为监测对象,经自动清洗消毒机清洗后,分别用蛋白质残留检测法、ATP生物荧光检测法进行清洗消毒质量监测,并比较检测结果。结果蛋白质残留检测法阳性率(14/15)高于ATP生物荧光检测法不合格率(1/15)。结论麦迪威特牌(型号DSD-201)全自动内窥镜清洗消毒机进行内镜清洗消毒程序时,在使用过氧乙酸消毒剂的情况下,蛋白质残留检测结果阳性不代表软式内镜清洗质量不合格,而是过氧乙酸作为氧化性的消毒剂造成的假阳性结果。

应用ATP生物荧光法动态监测腔镜器械清洗环节

随着现代微创手术的开展，内镜器械普遍应用于临床，但内镜精细、结构复杂，清洗难度大。如果内镜清洗不彻底，发生手术部位感染（SSI）的风险就会增加，不仅病人痛苦，还会延长住院日，增加医疗费用。虽然卫生部颁布了《内镜清洗消毒技术操作规范（2004年版）》，统一规范了腔镜器械的清洗流程和操作过程，但对腔镜器械清洗环节的质量如何进行监测和评价尚未提出具体明确的方法。目前国内采用的传统监测方法存在不足：肉眼和放大镜观察法判断不准确；细菌计数法仅能检测细菌残留量，不能检出其他污染物。

软式消化内窥镜改良生物荧光法非常规监测点清洗质量检测研究

目的:研究通过增加消化内窥镜非常规监测点,全面提高消化内窥镜清洗质量检测能力和质量控制水平。方法:选取2022年9-11月复旦大学附属中山医院内镜中心用于临床检查的160根普通软式消化内窥镜,通过随机抽样法分别采用传统三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法检测和改良ATP生物荧光法检测方式进行消化内窥镜清洗质量检测,每种检测方式80根。传统ATP检测方式使用ATP表面测试棒采样内窥镜先端部20 cm处外表面与使用ATP水质测试棒采样从内窥镜先端部收集注入钳子管道内腔的40 ml无菌水进行检测;改良ATP检测方式在传统ATP检测方式的基础上在钳子管道出口内表面增加1个非常规监测点,使用无菌采样拭子对消化内窥镜钳子管道出口5 cm处内表面,由里向外旋转取样进行检测,对比两种检测方式的清洗质量。结果:在传统ATP检测方式检测结果合格的情况下,改良ATP检测方式在非常规监测点发现消化内窥镜清洗质量阳性物。传统ATP检测方式检测不合格检出率为5.00%(4/80),改良ATP检测方式不合格检出率为25.00%(20/80),其差异有统计学意义(x^(2)=12.549,P<0.05)。结论:增加软式消化内窥镜钳子管道出口非常规监测点,能明显地增加消化内窥镜清洗不合格的检出率,有助于提高消化内窥镜清洗质量控制水平。

ATP生物荧光法在监测器械清洗效果中的应用研究

目的探讨ATP生物荧光法在监测器械清洗质量中的作用。方法采用ATP生物荧光法、微生物培养法、肉眼观察法和放大镜观察法进行监测器械清洗质量,比较不同方法合格率;并比较采用ATP生物荧光法监测器械清洗各个环节的清洗质量和监测培训前后器械清洗质量变化。结果采用不同方式检查器械清洗质量合格率分别为,放大镜观察组(92.50%)、肉眼观察组(97.50%)、微生物培养法(82.50%)和ATP生物荧光法(67.50%);ATP生物荧光法动态监测清洗质量显示,各个环节后器械清洗质量的合格(RLU≤2 000)率为:初步冲洗后(10.00%),酶液浸泡刷洗后(45.00%),超声清洁后(57.50%)和干燥后(67.50%);经过培训后,ATP生物荧光法监测显示,器械清洗质量总合格率由培训前的65.71%提升到培训后的86.30%(P<0.05)。结论 ATP生物荧光法可监测并提高器械各个环节清洗质量,是对肉眼观察法的重要补充。

ATP生物荧光检测法在软式内镜清洗质量监测中的应用研究

目的探究三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)生物荧光检测技术评价软式内镜清洗质量的可行性。方法随机抽取2019年5—9月皖南医学院第二附属医院内镜中心处于使用状态的胃镜、支气管镜,每种内镜随机分为A组和B组,A组检测方法为ATP生物荧光检测法,采样时间点为预处理后、漂洗后;B组检测方法为菌落计数法,采样时间点为漂洗后;采样部位为每条内镜的外表面、活检孔、管腔。结果按照软式内镜清洗消毒规范进行预处理和清洗后,两种软式内镜的外表面、活检孔、管腔等部位的ATP值显著下降(P<0.05),合格率均由0上升至90.0%~100%;ATP生物荧光检测法与菌落计数法对软式内镜外表面、活检孔、管腔等部位的检测结果之间秩相关系数rs均在0.4以下,且差异均无统计学意义(P>0.05)。结论ATP生物荧光检测法可作为一种快速、定量的评价方法应用于胃镜、支气管镜等不同系统软式内镜的清洗质量现场评价,但无法确切反映软式内镜清洗后的微生物污染情况。

ATP生物荧光法评价医疗器械清洗质量

目的观察ATP生物荧光法用于评价医疗器械清洗质量。方法采用ATP生物荧光法与细菌计数法作平行比较,检测超声波清洗器清洗前、后细菌的残留量。结果随着金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌悬液浓度的降低,RLU值逐渐降低,两种细菌菌悬液检出菌数的对数值与RLU值的对数值之间呈线性关系。将污染有金黄色葡萄球菌的止血钳放于超声波清洗器中经水洗与清洗液清洗后,两种检测法测定结果基本一致,清洗液清洗2 min+水洗1 min组的RLU和细菌菌数与单纯水洗3 min相比较,存在显著性差异。不同清洗条件下残留细菌数的RLU理论值与实验测得的实际值比较,二者无显著性差异,说明ATP生物荧光法检测的RLU值反映实际菌量。结论ATP生物荧光法可快速地测定医疗器械清洗前、后的细菌残留量。

ATP生物荧光检测法提高ICU轮科医生手卫生依从性的效果

目的了解ATP生物荧光检测法在短时间内提高内科重症监护室(ICU)轮科医生手卫生依从性和合格率的效果。方法首先对内科ICU轮科医生手卫生的现状进行基线摸底调查,根据结果制定监测频率和方法。然后采用ATP生物荧光检测法随机对医生的手卫生进行现场检测和结果反馈。对干预后的医生手卫生情况进行调查。结果基线摸底调查阶段共采样120人次,医生手卫生总体合格率为73.33%,手卫生依从率只有14.17%。采用ATP现场检测和反馈的干预方法后,医生手卫生合格率提高至82.24%(χ2=13.68,P=0.008);干预中洗手依从率最高,达到69.44%。结论 ATP生物荧光检测法现场监测医生手卫生情况并及时反馈,可以提高医生手卫生的依从性和合格率。

应用ATP生物荧光法评价部队食堂餐厨具卫生状况

目的比较ATP生物荧光法和大肠菌群纸片法在评价餐厨具卫生状况时是否存在差异。方法采用整群随机抽样的方法,对某部74个餐饮服务单位的餐厨具应用ATP生物荧光法检测,现场读取其相对发光单位(RLU)值,RLU值<100为合格,≥100不合格;同时对同一餐厨具样品依据GB 14934-94《食(饮)具消毒卫生标准》大肠菌群纸片法进行检测和结果判定,采用Kappa统计学方法评价2种方法检测结果的一致性。结果共检测分餐盘74件、碗74件、筷子64件、熟食刀44件、熟食板47件、打菜盒47件,计350件。其用ATP生物荧光检测其合格率分别为75.7%、85.1%、46.9%、47.7%、34.0%和55.3%;用大肠菌群纸片法检测其合格率分别为81.1%、82.4%、64.1%、52.3%、46.8%和55.3%;2种方法对分餐盘、碗、筷子、熟食刀、熟食板、打菜盒6类餐具检测结果的一致性,即Kappa值分别为0.656、0.702、0.539、0.546、0.566、0.602,其中分餐盘、碗和打菜盒3类表面光滑餐具的Kappa值高于筷子、熟食刀和熟食板。结论 2种方法对于评价部队食堂餐具卫生状况的结果尚不具高度一致性,建议探讨建立两者之间可以互相参照的标准。

ATP生物荧光法用于医务人员手卫生检测的效果观察

医务人员的手卫生是预防医院感染最简单、经济、有效的方法.目前国内大部分医院采用细菌培养法进行手卫生检测,但存在耗时长、结果延迟、操作繁琐等不足.ATP生物荧光法利用高灵敏度光度计对ATP、虫荧光素和荧光素酶反应所产生的光进行检测,具有速度快、结果可信度高等优点,在国外已广泛应用于环境卫生、手卫生、水质及医疗器械等检测.本研究应用ATP生物荧光法检测技术对医务人员手卫生进行抽样调查,与医院同期细菌培养法检测结果进行比较,探讨ATP生物荧光法检测技术在医院手卫生检测中的应用效果,现报道如下.

ATP生物荧光法快速评价灭菌外科缝合包的质量分析

目的探讨ATP生物荧光法快速评价外科缝合包的灭菌质量效果。方法采用分层随机抽样法,对2015年8月至2016年4月我院外科使用的160个外科缝合包进行灭菌质量分析,每个样品高压蒸汽灭菌取样后分为2份,分别采用ATP生物荧光法与菌落计数检测评价灭菌效果。结果 160个外科缝合包经过消毒后,菌落计数法检测合格159个,合格率为99.4%,ATP生物荧光法检测合格158个,合格率为98.8%,两两对比差异无统计学意义(P>0.05)。菌落计数法的菌落计数范围为0~34cfu,平均为(1.89±0.34)cfu,ATP生物荧光法的ATP值为3~223RUL,平均为(15.30±4.29)RUL。直线相关性分析显示菌落数的对数值与ATP值的对数值之间呈直线关系(P<0.05),直线相关方程为y=1.0576x-6.6518,R2=0.9982。菌落计数法对外科缝合包的消毒检测平均时间为(32.14±4.20)h,而ATP生物荧光法检测时间为(4.20±1.45)h,两两对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ATP生物荧光法能快速评价外科缝合包的灭菌质量,也能有效反映缝合包的菌落数,从而为医院的消毒效果提供有效、快速的检测指标。

ATP生物荧光法评价两种外科洗手方法的消毒效果

目的应用ATP生物荧光法对两种外科洗手方法的消毒效果进行评价,以提高外科手卫生效率。方法 191名待洗手手术人员随机分为研究组106名和对照组85名。研究组采用揉搓法进行洗手,对照组采用传统刷手法进行洗手,2组均采用ATP生物荧光法实施监测,比较揉搓法和刷洗法洗手后的手卫生合格率。结果研究组手卫生合格率84.9%(90/106),高于对照组的84.7%(72/85),但2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论揉搓法和刷洗法均是有效的外科术前洗手方式,且揉搓法简便、省时,可操作性强,易于掌握运用。

ATP生物荧光法评价内镜清洗效果的对比研究

目的研究ATP生物荧光法用于内镜清洗效果评价。方法采用ATP生物荧光法与目测法、细菌培养计数法比较，检测初步清洗后内镜的清洁度。结果随着大肠埃希茵茵悬液浓度的降低，相对荧光强度（RLU）值逐渐降低，茵悬液检出茵数的对数值与RLU值的对数值之间呈线性关系，相关系数r一0．9873，P％0．001。将经过初步清洗后的内镜进行培养计数和RLU检测，两者结果不呈明显的线性关系，相关系数r=0．1677，P〉0．05。结论ATP生物荧光法可快速评价内镜的清洗效果。

ATP生物荧光增幅法在化妆品微生物检测中的验证研究

选取清洁类、护理类、美容修饰类6种化妆品和7株代表菌株,开展了ATP生物荧光增幅法与《化妆品安全技术规范》(2015年版)中菌落总数、霉菌和酵母菌检验方法的部分等效性研究。将代表菌株按照目标浓度10,5,1和0.1 CFU/g分别接种于6种化妆品,每个浓度重复检测5次,经Fisher exact test统计分析发现ATP生物荧光增幅法的检测限显著优于标准方法(p=0.0001)。7株代表菌株在MTAT培养基中生长良好,ATP生物荧光增幅法检测人工污染样品结果均为阳性,表明该方法的专属性良好。选取3家不同的实验室,采用两种方法对相同产品进行比对检测,检测结果无统计学差异(p>0.05),表明该方法的重现性良好。选取不同品牌TAT肉汤配制的富集培养基MTAT进行增菌,ATP检测结果均为阳性,表明该方法的耐用性良好。因此,ATP生物荧光增幅法与标准方法具有部分等效性。

ATP生物荧光增幅法在控制菌检测中的验证研究——应用于化妆品领域

参照《中国药典》(2020版)药品微生物检验替代方法验证指导原则中定性检验方法的验证要求,选取了清洁类、护理类、美容修饰类等6种化妆品,从专属性、检测限、重现性和耐用性4个方面开展了ATP生物荧光增幅法与《化妆品安全技术规范》(2015版)中耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌检验标准方法的部分等效性研究。结果显示,ATP生物荧光增幅法的专属性和耐用性良好;采用该方法检测3种控制菌代表菌株的LOD 50分别为0.20、0.35和0.14 CFU/g,经Fisher exact test统计分析,ATP生物荧光增幅法检测限均显著优于相应标准方法(P<0.05);3家不同实验室使用2种方法对相同人工污染样品的检测结果无统计学差异(P>0.05),说明ATP生物荧光增幅法重现性良好。研究结果表明,ATP生物荧光增幅法与《化妆品安全技术规范》(2015版)中耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌检验的标准方法具有部分等效性,可实现化妆品中各类微生物在48 h的同步检测。

ATP生物荧光增幅法在微生物检测中的可行性研究——应用于化妆品领域

为探究ATP生物荧光增幅法在化妆品微生物检测中应用的可行性,开展了富集培养基促生长能力测试和产品适用性试验。收集了与化妆品原料及其生产环境相关的47株代表性菌株,在富集培养基MTAT中生长良好,ATP生物荧光增幅检测结果均为阳性。分别选取了清洁类、护理类、美容修饰类中6种化妆品,接种6株《中国药典》(2020版)参考菌株,进行了产品适用性试验。样品影响测试结果表明:培养基空白的信号值在167~285 RLU,6种产品的本底信号值在87~199 RLU,远低于3倍培养基空白信号值的要求;ATP回收率在73.8%~106.8%,均高于25%的推荐值,符合检测方法的要求。接菌试验结果表明,供试样品的检测结果均为阳性,化妆品的抑菌作用可被有效消除。因此,ATP生物荧光增幅法具有在化妆品及相关领域开展微生物快速筛选与检测的良好应用前景。

ATP生物荧光增幅法在化妆品微生物检测中的适用性研究

收集了不同功能宣称、作用部位、产品剂型、使用人群的普通化妆品和特殊化妆品,共计17个品牌34种市售产品,开展了ATP生物荧光增幅法的方法适用性研究。通过样品影响测试选择本底荧光信号值符合方法要求的产品进行接菌试验,将大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、白色念珠菌(Canidia albicans)和黑曲霉(Aspergillus niger)按照目标浓度10~100 CFU/g接种于供试化妆品中,根据接菌试验结果评价ATP生物荧光增幅法的适用性。结果表明,31种化妆品本底荧光信号值在45~526 RLU之间,均小于3倍空白培养基信号值,符合检测方法要求;3种产品部分批次的荧光信号值高于3倍空白培养基信号值,未通过样品影响测试。27种供试产品接菌试验全部阳性检出,可使用ATP生物荧光增幅法进行微生物检测;4种供试产品均存在部分菌株未能检出的现象,需采用稀释法、中和法或膜过滤等方法开展进一步研究。综上,ATP生物荧光增幅法用于化妆品微生物检测有效可行,可推广应用于化妆品中微生物污染样品的快速筛查。

三磷酸腺苷生物荧光法和细菌培养法监测中度危险医疗用品安全性研究

目的:采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法和细菌培养法监测中度危险医疗用品,评估存放中的中度危险医疗用品的安全性,并进行效果分析。方法:采用ATP生物荧光法和细菌培养法对清洗消毒后的中度危险医疗用品进行采样和监测,将清洗消毒后的中度危险医疗用品分别采用医用塑料自封袋、棉布双层布袋和聚乙烯塑料袋3种包装,存放0 d、7 d、14 d、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月后进行8个时间段的采样和监测,对比分析两种方法的监测效果。结果:细菌培养法的8个时间段检测中,医用塑料自封袋和聚乙烯塑料袋均未检出有害细菌;棉布双层布袋在存放3个月时检出干燥棒状杆菌1个,存放6个月时检出四联球菌2个;3种包装微生物监测合格率比较无差异。ATP检测医用塑料自封袋中的高效消毒物品ATP值1年内均为正常值;棉布双层布袋存放1个月时ATP值超出正常值;聚乙烯塑料袋0 d至1年的8个时间段ATP值均不合格,棉布双层布袋与聚乙烯塑料袋比较无差异;7 d,14 d、1个月、3个月、6个月、9个月和12个月医用塑料自封袋与棉布双层布袋和聚乙烯塑料袋比较,差异有统计学意义(F=3.142,F=3.900,F=9.556,F=7.705,F=10.596,F=10.282,F=14.204;P<0.05)。结论:ATP检测法结果检出及时,细菌培养法结果检出则需2 d;ATP检测值为升高或下降,细菌培养检测可检出具体细菌;ATP检测快速且有效,但无法检出具体致病菌。

ATP生物荧光增幅法在食品微生物污染检测中的应用

由于食品表面非目标源的干扰,食品微生物污染检测的结果存在一定偏差,为此,本文提出一种基于ATP生物荧光增幅法的食品微生物污染检测方法,利用微生物的繁殖特性,将营养物质进行荧光标记,通过统计显微环境下荧光ATP的增幅,判定检测食品中是否存在微生物,避免直接统计受到的干扰,以此实现对食品微生物污染的有效检测。

三磷酸腺苷生物荧光法快速监测在不同结构医疗器械清洗中的应用

目的:分析采用三磷酸腺苷(ATP)生物荧光法(以下简称ATP法)快速监测消毒供应中心(CSSD)不同结构医疗器械器械清洗质量的达标情况,为CSSD各环节中器械清洗质量的监控提供参考。方法:抽取2017年8月—2019年12月期间经清洗消毒后的器械(每2月监测1次)180件记录资料,比较和分析目测和用手持式ATP生物荧光法快速检测仪监测管腔类器械(吸引头、腹腔镜钳子管腔)、表面光洁平整无凹器械(拉钩、骨膜剥离子)、有齿轮凹槽器械(镊子、血管钳齿轮)等不同结构医疗器械的清洗质量的差异。结果:对于管腔类器械与齿轮凹凸不平器械清洗质量目测法优于ATP法(P<0.05);而对于表面光洁平整无凹器械,两种方法间无统计学意义(P>0.05)。结论:ATP生物荧光法快速监测对于管腔类器械、齿轮凹凸不平器械清洗质量效果的评价,具有一定的应用价值。

ATP生物发光法在微生物检验中的应用

ATP生物发光法是一种快速的微生物检测方法,具有简便、灵敏度高、可实时检测等优点。本文就ATP生物发光法的检测原理、检测步骤、特点、检测的影响因素及在食品工业中的应用进行了综述,并提出了目前ATP生物发光法检测中存在的问题。