脂多糖通过核因子-κB途径下调泡沫细胞ATP结合盒转运体A1的表达

脂多糖(LPS)介导的免疫炎症反应与动脉粥样硬化(As)的发生密切相关,ATP结合盒转运体A1(ABCA1)促进细胞内胆固醇流出,具有抗As作用.观察了LPS对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及胆固醇流出的影响,并探讨TLR4/NF-κB信号途径和LXRs在此过程中的作用.THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度LPS处理或者用LPS作用不同时间,以LPS单独或用NF-κB抑制剂对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基甲酮(TPCK)预处理细胞后再加入LPS处理.RT-PCR检测ABCA1、TLR4和LXRα mRNA的表达,Western blot检测ABCA1、LXRα及核内NF-κBp65蛋白的表达,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量.结果表明,LPS呈浓度和时间依赖性抑制ABCA1的表达,而增加TLR4 mRNA和核内NF-κBp65蛋白的表达,LPS使泡沫细胞内胆固醇流出减少,细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯增加,TPCK预处理后,LPS的这种作用被部分抑制,LXRα的表达不受LPS和TPCK的影响.这一结果提示,TLR4/NF-κB信号途径介导LPS对ABCA1表达及细胞内胆固醇流出的抑制作用,而LPS对ABCA1表达的调控不通过LXRα途径.

Ghrelin对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1和G1表达的调控作用

目的:研究单核/巨噬细胞分化成为泡沫细胞过程中ghrelin对人ATP结合盒转运子A1和G1(ABCA1/ABCG1)表达的调控作用。方法:体外培养人源单核细胞系THP-1,由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者可在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)存在条件下进一步转变为泡沫细胞。巨噬细胞加入不同浓度的Ghrelin预孵2h后再加入ox-LDL作用不同时间,油红O染色法观察细胞内脂滴含量,运用PT-PCR法检测ABCA1和ABCG1mRNA水平,Western blotting法检测ABCA1和ABCG1蛋白表达,采用酶法,通过荧光分光光度计检测细胞内外胆固醇含量并计算胆固醇流出率。结果:Ghrelin干预可明显减少细胞内脂滴的形成,显著增加胆固醇流出率,并能显著增加单核/巨噬细胞泡沫化过程中ABCA1和ABCG1mRNA水平和蛋白表达,且此作用呈浓度依赖性而不呈时间依赖性。结论:Ghrelin可能通过上调ABCA1和ABCG1转录翻译水平延缓动脉粥样硬化的发生。

血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1的影响

目的:以THP-1源性泡沫细胞为研究对象,探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达、细胞内胆固醇含量及胆固醇流出的影响。方法:运用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和W estern b lotting分别检测AngⅡ对ABCA1 mRNA与ABCA1蛋白表达的影响,采用酶法,通过荧光分光光度计检测细胞内胆固醇含量,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果:AngⅡ能引起THP-1源性泡沫细胞胆固醇含量显著升高(P<0.05)、ABCA1表达显著减少(P<0.05),AngⅡ受体拮抗剂厄贝沙坦(Irb)能显著减少细胞内胆固醇含量(P<0.05)、促进细胞内胆固醇流出及减轻AngⅡ对ABCA1的抑制作用(P<0.05)。结论:AngⅡ有通过其受体抑制ABCA1表达,促进泡沫细胞形成,加速动脉粥样硬化的作用。

新转移相关基因ATP结合盒转运子E1在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的观察ATP结合盒转运子E1(ABCE1)的mRNA和蛋白在非小细胞肺癌组织、癌旁肺组织及转移淋巴结中的表达情况,探讨其在肺癌发生、发展中的意义及其与各种临床病理参数的关系。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应、Westernblot和免疫组织化学SP法检测非小细胞肺癌组织、癌旁肺组织和转移淋巴结中ABCE1 mRNA和蛋白的表达情况。结果肺癌组织和转移淋巴结中ABCE1 mRNA和蛋白的表达量均高于癌旁肺组织(P<0.05),且mRNA和蛋白的表达呈正相关(r=3.992,P=0.001)。ABCE1蛋白的表达与患者年龄、性别、组织学分级、有无淋巴结转移及pTNM分期无关(P>0.05),与病理类型有关(P=0.036),在肺腺癌中的表达高于鳞癌;ABCE1 mRNA的表达与肺癌组织学分级有关(P=0.026)。结论 ABCE1的表达可能与非小细胞肺癌的侵袭和转移相关,在肺癌的发生发展过程中起到了重要作用,并可能成为潜在的肿瘤标记物及预后指标。

血管紧张素(1-7)和血管紧张素Ⅱ对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运子A1表达及胆固醇外流的影响

目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达及胆固醇外流的影响。方法将诱导分化的巨噬细胞随机分为对照组、AngⅡ组、Ang(1-7)组、AngⅡ+不同浓度Ang(1-7)组、AngⅡ+Ang(1-7)+A-779组,分别运用RT-PCR及Western blot方法检测AB-CA1 mRNA及蛋白的表达,液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果与对照组相比,AngⅡ可抑制ABCA1mRNA(0.471±0.036比0.857±0.053,P<0.05)及蛋白(0.473±0.029比0.652±0.031,P<0.05)的表达,减少胆固醇外流(8.937±0.353比13.942±0.478,P<0.05);而Ang(1-7)促进ABCA1 mRNA(0.949±0.087比0.857±0.053,P<0.05)及蛋白(0.722±0.045比0.652±0.031,P<0.05)的表达,增加了胆固醇外流(15.477±0.882比13.942±0.478,P<0.05),且呈剂量依赖性地减弱AngⅡ的抑制作用(P<0.05);ABCA1 mRNA及蛋白的表达和胆固醇外流A-779组与AngⅡ组比较差异无统计学意义(0.472±0.063比0.471±0.036、0.515±0.048比0.473±0.029及9.309±0.333比8.937±0.353,P>0.05)。结论 AngⅡ可抑制巨噬细胞ABCA1的表达、减少胆固醇外流;Ang(1-7)通过其特异性受体MAS受体介导拮抗AngⅡ抑制巨噬细胞ABCA1的表达,促进胆固醇流出,进而对动脉粥样硬化的发生发展起保护作用。

ATP结合盒转运子A1R219K基因多态性与2型糖尿病合并冠心病的相关性研究

目的探讨ATP结合盒转运子A1(ABCA1)R219K基因多态性与2型糖尿病(T2DM)合并冠心病(CHD)的关系。方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性法检测83例健康对照者(NC组)、72例单纯T2DM患者(CHD-组)、71例T2DM合并CHD患者(CHD+组)ABCA1219位点的多态基因型。结果在NC组、CHD-组、CHD+组中,KK基因型分布为19.3%、16.7%、4.2%;CHD+组与NC组、CHD-组KK基因型频率差异有统计学意义(P<0.05)。K等位基因频率分别为42.2%、38.9%、31.7%,三组间差异无统计学意义。在糖尿病患者中,KK基因型携带者的血浆HDL-C水平显著高于RR型,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论ABCA1R219K基因多态性可能相关于T2DM并发的CHD。

罗格列酮对冠心病患者外周血单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1表达的影响

目的以冠心病患者外周血单核细胞为研究对象,观察不同浓度的罗格列酮对体外培养的单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1表达的影响,以探讨罗格列酮对动脉粥样硬化发生发展的影响。方法密度梯度离心法分离冠心病患者外周血单核细胞,再分别与0、0.1、1.0及10.0μmol/L罗格列酮作用24 h,提取各组细胞总RNA,逆转录聚合酶链反应分别检测三磷酸腺苷结合盒转运子A1、过氧化体增殖物激活型受体γ及肝X受体αmRNA的表达,Western blot检测三磷酸腺苷结合盒转运子A1蛋白的表达。结果罗格列酮引起冠心病患者外周血单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA与蛋白表达明显增加(P<0.05),过氧化体增殖物激活型受体γ和肝X受体αmRNA表达亦上调(P<0.05)。结论罗格列酮可能通过过氧化体增殖物激活型受体γ-肝X受体α-三磷酸腺苷结合盒转运子A1途径影响外周血单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运子A1的表达,从而在动脉粥样硬化的防治过程中发挥重要作用。

中国汉族人群ATP结合盒转运子A1基因R219K多态性与冠心病关联研究的荟瘁分析

目的综合评价ATP结合盒转运子A1(ABCA1)基因R219K多态性在中国汉族人群冠心病发病中的作用。方法通过文献检索收集2012年5月以前完成或发表的中国汉族人群ABCAl基因R219K多态性与冠心病相关性的病例对照研究,剔除不符合要求的文献,Egger’s检验定量评价入选文献的偏倚,并根据各入选文献结果的同质性检验结果进行数据合并,计算总OR值,Meta分析采用Stata11.0统计软件。结果共12篇文献符合条件纳入研究,包括2257例患者和2356例对照人群,入选文献无明显偏倚。Meta分析结果显示ABCA1基因R219K位点(KK+RK)/RR基因型频率的合并OR值为0.66(95%CI为0.55～0.80,P<0.0001);KK/(RK+RR)基因型频率的合并OR值为0.63(95%CI为0.53～0.75,P<0.0001)。结论 ABCAl基因R219K多态性与中国汉族人群冠心病易感性相关,K等位基因减低了冠心病发病风险。

新疆维吾尔族ATP结合盒转运子A1基因R219K多态性与冠心病的关系

目的:探讨ATP结合盒转运子A1基因(ATP binding cassette transporter 1,ABCA1)R219K多态性在新疆维吾尔族人群中的分布及其与冠心病(CHD)的关系。方法:采用病例对照研究。用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定ABCA1基因多态性。结果:新疆维吾尔族ABCA1基因的多态性位点存在RR、RK、KK型三种基因型。冠心病组KK型基因频率、K等位基因频率低于对照组(P<0.05～<0.01)。K等位基因与冠心病的患病风险呈负相关,OR值为0.640(95%CI 0.459～0.893),该等位基因可能为冠心病的保护因素。K等位基因携带者的高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平高于RR基因型(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,性别、血清总胆固醇、吸烟、高血压、糖尿病为研究对象发生冠心病的独立危险因素。结论:研究显示K等位基因可能通过作用于血脂间接影响新疆维吾尔族冠心病的患病风险,但不是其免于发生冠心病的独立保护因素。

ox-LDL刺激对冠心病患者单核细胞ATP结合盒转运体A1反应性的影响

目的研究在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激下冠心病患者单核细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达水平及ABCA1在动脉粥样硬化(AS)中的作用机制。方法分别取冠心病患者(42例)及正常对照者(40例)新鲜血液中的单核细胞,利用密度(1.077)梯度离心法分离,PE荧光标记ABCA1,采用流式细胞仪检测其在单核细胞中的表达量。ox-LDL(30mg/L)刺激单核细胞24h后,观察两组ABCA1表达量的变化情况,分析ABCA1表达量与血脂的相关性。结果冠心病组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)表达量分别为1.15±1.40,1.19±0.17,与正常对照组(分别为1.36±0.40,1.34±0.22)相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。ox-LDL刺激后两组ABCA1表达量均增加,冠心病组单核细胞ABCA1表达量与刺激后表达量增加幅度(ΔABCA1)(分别为9.80±4.62,4.36±2.34)均较正常对照组(分别为29.35±5.17,7.43±1.51)低,差异有统计学意义(P<0.05)。ABCA1表达量与血脂无明显相关性(P>0.05)。结论冠心病患者体内高浓度ox-LDL对ABCA1表达有抑制作用,ABCA1的损伤和异常血脂谱均使患者逆胆固醇转运(RCT)降低,在AS及冠心病的发生、发展中起着重要作用。

ATP结合盒转运子A1基因R219K的多态性与心房颤动相关性研究

目的探讨ATP结合盒转运子A1基因(ABCA1)R219K的多态性与心房颤动(房颤)相关性。方法选择250例房颤患者(房颤组)和250例非房颤者(对照组)为研究对象。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性测定ABCA1基因的多态性,并检测所有研究对象的C反应蛋白(CRP)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)血清浓度;比较两组不同基因型、不同等位基因的分布及CRP、HDL-C的血清浓度。结果房颤组与对照组ABCA1R219KRR型、RK型、KK型基因型频率分别为42.0%、42.8%、15.2%和34.0%、43.2%、22.8%,房颤组KK型明显低于对照组(P=0.03);房颤组与对照组R等位基因、K等位基因分布频率为63.4%、36.6%和55.6%、44.4%,K等位基因分布频率在房颤组中较对照组明显降低(P=0.012);房颤组CRP浓度明显高于对照组(P=0.004),HDL-C浓度无明显差异;在不同基因型之间CRP、HDL-C浓度比较中发现,RR基因型CRP浓度显著高于KK型(P=0.013);而HDL-C浓度RR基因型低于RK型和KK型(P分别为0.009、0.027)。结论房颤的炎性指标CRP显著升高;ABCA1R219K位点K等位基因可能是房颤发生的一种保护因素。

ATP结合盒转运子A1基因R219K多态性在不同饮食结构人群中的分布特征及其与血脂水平的关系

目的探讨腺苷三磷酸(ATP)结合盒转运子A1基因(ATP binding cassette transporter 1,ABCA1)R219K多态性在不同饮食结构人群中的分布及其与血脂的关系。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法测定ABCA1基因多态性。分析不同基因的频率在不同饮食结构人群的分布特点及其与血脂的关系。结果不同饮食结构的人群的ABCA1基因R219K的多态性位点存在RR、RK、KK型3种基因型,基因频率在不同饮食结构人群中的分布无差异性。K等位基因携带者的高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein,HDL-C)水平高于RR基因型(P<0.05),KK型总胆固醇(Total Cholesterol,TC)水平低于RR型(P<0.05)。结论K等位基因可能产生有益的临床血脂谱。

ATP结合体转运子基因单核苷酸多态性与脑梗死的相关性

目的探讨高密度脂蛋白代谢相关基因ATP结合体转运子(ABCA1)单核苷酸多态性与脑梗死发病的关系。方法调查经CT确诊的脑梗死患者96例,男76例,女20例,平均年龄(59±10)岁;健康对照组90例,男48例,女42例,平均年龄(55±11)岁。提取外周血白细胞全基因组DNA。以聚合酶链式反应(PCR)、限制性片段长度多态性(RFLP)结合测序的方法检测ABCA1 596G→A单核苷酸多态性(SNP)。结果脑梗死及对照组ABCA1-A与G等位基因频率分别为66.1%、33.9%及51.7%和48.3%,两组间等位基因频率分布存在显著性差异(2χ=8.99,P<0.05)。AA基因型与脑梗死发病率增高有关(RR=2.68,95%CI1.5-3.6,P<0.05)。血脂分析提示等位基因A携带者血浆HDL胆固醇水平明显低于等位基因G携带者(1.1±0.3vs.1.3±0.4,P=0.009),而甘油三酯明显升高(2.1±1.2vs.1.8±1.2,P=0.027)。结论ABCA1基因596G→A变异明显会增加脑梗死发病的危险性,其致病机制可能与G→A变异导致HDL降低及TG升高有关。

阿托伐他汀抑制THP-1经PMA诱导后变成巨噬细胞ATP结合盒转运子A1mRNA和蛋白的表达

目的探讨阿托伐他汀对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)mRNA和蛋白及LXRαmRNA表达的影响。方法体外培养的人THP-1单核细胞,经氟波酯(PMA)诱导48 h,使形成巨噬细胞,将分化良好的巨噬细胞分别加入含不同浓度或不含阿托伐他汀的无血清RPMI 1640培养基,培养24 h或48 h,收集细胞。用多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测THP-1巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白及LXRαmRNA的表达。结果含阿托伐他汀(10μmol/L)的培养基体外培养人THP-1巨噬细胞24 h,ABCA1(相对表达量IA值1.21,对照组1.48)和LXRαmRNA(A值0.87,对照组1.12)表达比对照组明显减少(P<0.05),延长培养时间,ABCA1和LXRαmRNA表达有进一步减少趋势。结论阿托伐他汀抑制体外培养的人THP-1巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白及LXRαmRNA的表达。

肿瘤坏死因子-α对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运蛋白A1表达的影响

目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)表达的影响,同时探讨核因子-κB(NF-κB)在TNF-α调控ABC A1表达中的作用。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞随机分为4组:对照组、TNF-α组、甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲酮(TPCK,NF-κB的抑制剂)组、TPCK+TNF-α组。运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和W estern b lot检测各组不同的时间点(0、6、12、24和48 h)ABCA1 mRNA和ABCA1蛋白的表达。结果:对照组和TPCK组ABCA1mRNA和蛋白表达均无明显变化;TNF-α组ABCA1mRNA和蛋白表达呈时间依赖性降低(P<0.05);TPCK+TNF-α组ABCA1mRNA和蛋白表达也呈时间依赖性降低,但同TNF-α组比较,其下降程度有明显减轻(P<0.05)。结论:TNF-α可以通过活化NF-κB抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达。

蒙古族ATP结合盒转运子A1基因R219K多态性与冠心病的相关性

目的探讨ATP结合盒转运子A1基因（ATP binding cassette transporter 1,ABCA1）R219K多态性在内蒙古地区蒙古族人群中的分布及其与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制片段长度多态性方法检测115名蒙古族冠心病患者和对照组ABCA1基因相应片段的多态性。结果两组基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡。内蒙古地区蒙古族人群中ABCA1基因R219K多态性位点存在RR、RK、KK三种基因型,对照组的KK基因型的频率显著高于CHD组（32.7% vs 16.7%,P〈0.05）。KK基因型的OR值为0.411（95% CI0.17~0.99）。结论 ABCA1基因R219K多态性与内蒙古地区蒙古族人群冠心病的遗传易感性相关,其中基因型KK可能是冠心病的保护因子。

槲皮素对非酒精性脂肪肝细胞ATP结合框转运子A1 mRNA表达的影响

目的:探讨植物化学物质槲皮素(quercetin)对非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver,NAFL)细胞三磷腺苷结合框转运子A1(ABCA1)表达的影响。方法:建立人肝L-02细胞脂肪变性模型,以不同浓度的槲皮素处理细胞后,用RT-PCR检测ABCA1 mRNA的表达。结果:槲皮素可以增加NAFL细胞ABCA1 mRNA的表达,且呈剂量依赖性。结论:槲皮素能上调胆固醇转运中的重要蛋白ABCA1的表达。

ATP结合盒转运子A1对巨噬细胞载脂蛋白E分泌的调节作用

目的 :研究ABC转运子 (ABC)A1对巨噬细胞载脂蛋白E(apoE)的分泌是否具有调节作用。方法 :利用佛波酯刺激人单核细胞系THP - 1细胞分化 ;分别将ABCA1表达的激动剂 8-Br -cAMP、抑制剂格列苯脲和针对ABCA1mRNA的特异性反义寡核苷酸与分化后的THP - 1巨噬细胞或巨噬细胞泡沫细胞一起孵育 ,通过酶联免疫吸附试验和Northernblot检测其对细胞apoE的产生、分泌以及apoE基因表达的影响。结果 :在孵育 8h时 ,8-Br-cAMP可使THP - 1巨噬细胞apoE分泌增加 (P <0 0 5 ) ,而格列苯脲和针对ABCA1mRNA的反义寡核苷酸则明显减少THP - 1巨噬细胞和巨噬细胞泡沫细胞的apoE分泌 (P <0 0 1)。同时这些调节剂均不改变THP1巨噬细胞内apoE含量和apoEmRNA表达水平。结论 :ABCA1促进巨噬细胞和巨噬细胞泡沫细胞apoE的分泌 。

ATP结合盒转运子A1与动脉粥样硬化(1)

ATP结合盒转运子A1(ABCA1)蛋白是一个由2 261个氨基酸组成的蛋白,含有2个核酸结合区,2个细胞外攀和含有6个螺旋的跨膜区。其功能是直接或间接介导胆固醇和磷脂通过细胞膜,再由载脂蛋白运走。人体50种组织中存在ABCA1 mR-NA,其转录受细胞多余胆固醇的调节,这种调节又受肝脏核受体(LXR)和视黄素受体(RXR)的调节。ABCA1不同部位的基因突变对其功能影响不同。在普通人群中ABCA1常见基因变异可能与高密度脂蛋白胆固醇水平,动脉粥样硬化发生有关。

ATP结合盒转运蛋白B1与羧酸酯酶1基因多态性对达比加群酯药物谷浓度的影响

目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多态性位点以及基因型,采用抗Ⅱa因子显色法测定患者服用达比加群酯后药物的谷浓度,分析ABCB1及CES1基因多态性与谷浓度的相关性,进一步研究相关位点对谷浓度达标的影响。结果本研究共发现11个单核苷酸多态性位点,且ABCB1 rs2235013与ABCB1 rs2235033处于连锁不平衡状态(D’=0.96,r2=0.82)。但ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度无显著影响(P>0.05)。CES1 rs2302719突变型(TG,GG)患者的达比加群谷浓度高于野生型(TT)(51.98±8.06 vs 42.44±3.88,57.71±9.06 vs 42.44±3.88),并且CES1 rs2302719突变型(TG,GG)是患者谷浓度达标的保护因素,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度的影响还需进一步探索。CES1 rs2302719次要等位基因(G)可增加达比加群谷浓度,并且不良反应的发生率可能更低。