ATP结合盒式蛋白转运蛋白在结直肠腺癌中表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因(MDR)1、多药耐药相关蛋白(MRP)1及乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)在结直肠腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用增强型二步法免疫组织化学方法检测MDR1、MRP1及ABCG2三个基因在116例结直肠腺癌组织中的表达,并分析其可能的临床预后价值。结果 MDR1、MRP1及ABCG2在结直肠腺癌的阳性表达率显著高于切端正常组织(P<0.05)。MDR1、MRP1及ABCG2的表达与病理学分级、淋巴结转移及Duke分期密切相关(P<0.05),而与年龄、性别及肿瘤发生部位无关(P>0.05)。在结直肠腺癌中MDR1、MRP1及ABCG2的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论结直肠腺癌中存在原发性耐药现象,MDR1、MRP1及ABCG2可能在结直肠癌侵袭转移中存在协同作用。联合检测MDR1、MRP1及ABCG2在结直肠腺癌组织中的表达对化疗药物的选择、化疗方案优化及估计患者预后具有重要指导意义。

ATP结合盒式蛋白在难治性癫（痫）耐药性机制的研究进展

难治性癫（痫）因其耐药机制的复杂性,迄今尚未清楚,目前探究其对抗癫（痫）药物的多重耐药性的一大热点是外流性药物转运蛋白.ATP结合盒式蛋白是外流性药物转运蛋白的代表,其中包括P糖蛋白、多药耐药蛋白、穹窿体主蛋白、乳腺癌耐药蛋白等,它们可以决定抗癫（痫）药物能否有效地作用于癫（痫）部位,而难治性癫（痫）患者对这些蛋白的高表达普遍存在,但是否与疾病耐药性相关仍需进一步探讨.该文从癫（痫）患者的ATP结合盒式蛋白高表达原因和蛋白对药物转运的作用机制方面对患者耐药性影响方面作一综述.

电针对抑郁大鼠大脑皮层ATP结合盒式蛋白表达的影响

目的:观察电针处理对不同状态大鼠大脑皮层ATP结合盒式蛋白和基因表达的影响,探索其对正常和病理状态下血脑屏障相关功能蛋白的影响。方法:SD大鼠分为空白组、空白电针组、抑郁组和抑郁电针组。采用慢性应激刺激法复制抑郁大鼠模型。空白电针组及抑郁电针组电针"百会""哑门",连续波,频率2Hz,强度1mA,每次20min,每日1次,连续电针14d。通过蛋白印迹法和逆转录多聚酶链反应技术对大脑皮层多药耐药基因(Mdr)1a、Mdr 1b,多药耐药相关蛋白(Mrp)1、Mrp 4、Mrp 5、乳腺癌耐药蛋白(Bcrp)和基因表达进行检测。结果:与空白组比较,抑郁组未见这些蛋白和基因表达的显著改变(P>0.05)。电针处理能显著减少正常和抑郁大鼠大脑皮层Mdr 1a的蛋白和基因表达(P<0.05,P<0.01),但电针对其它蛋白和基因的表达未见显著影响(P>0.05)。结论:无论正常状态还是抑郁状态大鼠,电针"百会""哑门"均可显著抑制其皮层P-糖蛋白的表达,这可能是电针开放血脑屏障的重要途径。

安氏隐孢子虫ATP结合盒式转运蛋白1基因的克隆与离子转运

目的研究安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)ATP结合盒式转运(ATP-binding cassette,ABC)蛋白1基因对细胞内液和细胞外液中K^+、Ca^(2+)、Na^+和Mg^(2+)的转运作用。方法设计特异性引物,从安氏隐孢子虫基因组中PCR扩增CaABC1。构建真核表达质粒pEGFP-C1-CaABC1,采用脂质体转染法将重组质粒转染至小鼠肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)中表达,设空白组(未转染质粒组)、对照组(转染空质粒pEGFP-C1组)和转染组(转染重组质粒pEGFP-C1-CaABC1组)。用溶液离子浓度检测试剂盒检测IEC细胞内液和细胞外液中的K^+、Ca^(2+)、Na^+和Mg^(2+)的浓度。结果扩增出544 bp的CaABC1基因,构建了真核表达质粒载体pEGFP-C1-CaABC1。转染小鼠IEC后,空白组未观察到绿色荧光,对照组和转染组均观察到绿色荧光。在细胞内液中,空白组K^+、Ca^(2+)、Na^+和Mg^(2+)的浓度分别为(5.51±0.51)、(1.98±0.06)、(108.33±1.33)和(0.93±0.03)mmol/L,对照组分别为(6.25±0.70)、(1.90±0.13)、(107.73±1.79)和(0.87±0.05)mmol/L,转染组分别为(14.84±0.90)、(3.40±0.14)、(127.64±1.49)和(1.72±0.20)mmol/L。在细胞外液中,空白组K^+、Ca^(2+)、Na^+和Mg^(2+)的浓度分别为(12.72±0.83)、(3.72±0.03)、(116.83±1.04)和(2.02±0.18)mmol/L,对照组分别为(10.11±0.90)、(3.58±0.06)、(115.89±1.86)和(1.71±0.41)mmol/L,转染组分别为(5.77±0.21)、(1.29±0.18)、(96.21±1.19)和(0.64±0.02)mmol/L。转染组K^+、Ca^(2+)和Mg^(2+)与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CaABC1蛋白具有协助转运K^+、Ca^(2+)和Mg^(2+)离子的作用。

多种功能的蛋白超家族——ABC家族

ATP结合盒式蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC)家族是存在于所有生物中的一组ATP结合转运蛋白,主要从事胞内外的物质转运。早期认为该家族主要与肿瘤细胞的多药耐药有关,近年来发现其在各个器官表现出多种其他重要病理和生理功能。笔者就ABC家族对机体的生理和病理功能的研究进展进行综述。

ABC转运蛋白超家族与膀胱癌多药耐药

膀胱癌是常见的泌尿系统肿瘤,具有易复发和产生多药耐药的生物学特性。肿瘤细胞的药物耐受是影响化疗效果的最重要因素。多药转运蛋白最突出的作用是它可以从癌细胞中向外转运抗癌药物,使机体产生耐药。而大量研究表明,它们在肿瘤生物学中的基本作用要比对药物的转运更为重要。明确这些转运蛋白在肿瘤发生及治疗反应中的具体作用对膀胱癌的靶向治疗至关重要。

ABCA2蛋白在周围神经组织施万细胞中的表达

目的探讨周围神经组织中ATP结合盒式转运蛋白A2(ABCA2)表达阳性而施万细胞标志抗体S100β表达阴性细胞的细胞类型。方法应用多重免疫荧光方法检测鼠及人类周围神经组织中ABCA2和特异施万细胞标志抗体的表达。结果在成髓鞘施万细胞特异抗体-锌指端转录因子Krox20和S100β阳性的细胞中,可以检测到ABCA2蛋白的表达。另外,在Krox20表达阴性但ABCA2表达阳性的细胞,胶原细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)和细胞黏附分子L1表达阳性。结论ABCA2不仅在髓鞘化的施万细胞中表达,而且在非髓鞘化的细胞中也有表达,提示ABCA2很可能通过参与跨膜物质转运而调控施万细胞成熟分化的复杂进程,其功能要比预估的调控髓鞘初始化进程更加复杂。

ABC转运蛋白与类风湿关节炎甲氨蝶呤治疗耐药关系的研究进展

类风湿关节炎(RA)是以滑膜炎为主要表现的自身免疫性疾病,临床无法治愈,是造成青壮年人群劳动力丧失的主要疾病之一。甲氨蝶呤(MTX)因疗效良好及价格低廉,成为治疗RA的首选锚定药物,但仍有约50%的RA患者对MTX治疗反应不佳,或复发后再次治疗的疗效下降。ATP结合盒式(ABC)转运蛋白家族介导药物的外排和摄取,对体内药物的吸收、分布、代谢和排泄发挥重要作用。RA患者中MTX无反应和MTX应答者之间存在转运蛋白异常表达的情况,提示ABC转运蛋白与MTX治疗RA患者产生耐药性有关。本文就ABC转运蛋白家族在MTX耐药中的作用和功能表达作一综述,为解析MTX耐药机制、促进个性化治疗在MTX耐药患者中的发展及提高RA治疗效果提供参考。

医学研究中的新工具——ABC家族

目的介绍目前ATP结合盒式蛋白(ATP-binding cassette,ABC)家族在医学研究中新的应用进展。方法采用文献回顾的方法对ABC家族在科学研究中的应用进展进行综述。结果ABC家族主要从事细胞内、外的物质转运,在多种疾病的诊断、治疗等多方面具有重要意义。结论ABC家族是医学研究中很有前途的新工具。

肿瘤多药耐药性机制研究进展

多药耐药性是导致肿瘤在化疗治疗过程中失败的主要因素之一。本文从以下两个方向阐述产生多药耐药性的原因:(1)细胞因素如ATP结合盒式蛋白、凋亡调控基因、DNA修复机制及异常的信号通路。(2)细胞所处环境生理因素如肿瘤组织间隙液压及缺氧和细胞外低PH。

外排转运蛋白介导的抗真菌药物耐药研究进展

近年来,随着广谱抗生素,免疫抑制剂,抗肿瘤化疗药物的广泛应用,器官移植的普遍开展以及AIDS患者的逐年增加,各系统侵袭性真菌感染日益增多。抗真菌药物的大量应用使得真菌耐药现象日渐严重。大量研究表明,耐药真菌细胞膜上外排转运蛋白的过量表达对抗真菌药物耐药形成起到重要作用。ATP结合盒式蛋白(ABC转运体)和易化扩散载体超家族蛋白(MFS转运体)便是其中最重要的两种。本文从ABC及MFS转运体的结构和功能出发,分析其在抗真菌药物耐药形成中的作用,并对相关研究进展进行综述。

ABCA2蛋白在大鼠面神经组织内雪旺细胞成熟过程中的表达

目的本研究通过检测面神经发育过程中ATP结合盒式转运蛋A2(ABCA2)的表达方式,探讨ABCA2蛋白在周围神经系统髓鞘形成过程中的作用。方法应用多重免疫荧光方法检测发育过程中面神经组织内ABCA2和特异雪旺细胞标志抗体的表达。结果 ABCA2蛋白由出生后第8d在成髓鞘雪旺细胞特异抗体-锌指端转录因子Krox20和S100阳性的细胞中开始少量表达;在出生后第14d,近50%髓鞘化的该类细胞中可检测到ABCA2蛋白;在成熟期,所有该类细胞中都可检测到ABCA2蛋白。结论 ABCA2在生后雪旺细胞的表达随髓鞘化的发育成熟而增加。

安氏隐孢子虫ABC2基因的克隆表达与营养物质转运

为探究安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)ATP结合盒转运蛋白基因(CaABC2)对营养物质的转运功能,以安氏隐孢子虫基因组作为模板,设计合成CaABC2基因特异性引物,进行PCR扩增,获得CaABC2基因。将克隆的重组质粒CaABC2基因与真核表达质粒pEGFP-C1双酶切后再连接,构建重组真核质粒载体pEGFP-C1-CaABC2;再采用脂质体转染法将重组质粒pEGFP-C1-CaABC2转入小鼠肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC),检测不同组IEC细胞对总胆固醇、还原型谷胱甘肽、葡萄糖和碱性磷酸酶的转运效果。结果表明:扩增出778bp的CaABC2基因,测序分析与预期片段大小一致;重组真核质粒载体pEGFP-C1-CaABC2转染小鼠IEC细胞后,观察到转染后的对照组和转染组IEC有绿色荧光;检测到在细胞内液中,转染组、对照组和空白组的总胆固醇浓度分别为15.99±0.12、11.80±0.35和12.43±0.16 mmol/L;还原型谷胱甘肽浓度分别为15.24±0.44、10.48±0.35和11.04±0.75mmol/L;在细胞外液中,转染组、对照组和空白组的总胆固醇浓度分别10.67±0.17、14.82±0.06和15.84±0.17 mmol/L;还原型谷胱甘肽浓度分别为10.20±0.79、14.60±0.45和15.60±2.50mmol/L。转染组总胆固醇、还原型谷胱甘肽浓度均显著大于空白组和对照组(P<0.05),而在细胞外液中,转染组总胆固醇、还原型谷胱甘肽的浓度均显著小于空白组和对照组(P<0.05)。在细胞内液和外液中,空白组与对照组总胆固醇、还原型谷胱甘肽的浓度之间均未见显著性差异(P>0.05);转染组、对照组和空白组之间的葡萄糖和碱性磷酸酶浓度均没有统计学差异(P>0.05)。CaABC2基因具有协助转运总胆固醇、还原型谷胱甘肽、葡萄糖和碱性磷酸酶的作用,其中转运总胆固醇效果最为明显。

ABCA8通过激活ERK信号通路促进人胰腺癌细胞的迁移和侵袭

目的:探究ATP结合盒转运蛋白家族A亚家族成员8(ATP-binding cassette transporter subfamily A member 8,ABCA8)对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,以及可能的作用机制。方法:用携带有ABGA8基因的慢病毒GV358或空载体慢病毒(对照组)感染人胰腺癌CFPAC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ABCA8 mRNA和蛋白的表达水平;细胞划痕愈合实验、Transwell小室迁移和侵袭实验分别检测ABCA8过表达对CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的影响;蛋白质印迹法检测ABCA8过表达对细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化蛋白表达水平的影响。应用ERK抑制剂SCH772984阻断ERK信号通路,再行Transwell小室迁移和侵袭实验以检测ABCA8介导的促CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的变化;采用实时荧光定量PCR法检测ABCA8过表达对CFPAC-1细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)、MMP7、MMP9和金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase1,TIMP1)mRNA表达水平的影响,以及SCH772984阻断ERK信号通路后对MMP7和TIMP1 mRNA表达水平的影响。结果:成功构建获得ABCA8稳定过表达的CFPAC-1细胞。ABCA8过表达能够明显促进CFPAC-1细胞的迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)。在ABCA8过表达CFPAC-1细胞中,ERK磷酸化蛋白的表达水平明显升高(P<0.01);ERK抑制剂SCH772984可以消除ABCA8对CFPAC-1细胞迁移和侵袭能力的影响(P值均>0.05)。同时,ABCA8过表达可以显著上调CFPAC-1细胞中MMP7 mRNA的表达水平(P<0.001),并下调TIMP1 mRNA的表达水平(P<0.01);ERK抑制剂可消除ABCA8介导的MMP7和TIMP1 mRNA的表达差异(P值均>0.05)。结论:ABCA8能够通过ERK信号通路增强人胰腺癌细胞的迁移和侵袭能力,ABCA8介导的迁移和侵袭能力增强可能与上调MMP7和下调TIMP1的表达有关。