盐度渐变对日本囊对虾非特异性免疫酶、ATPase酶和抗氧化酶活力的影响

为研究盐度渐变对日本囊对虾的机体免疫的影响,实验设置了4个盐度梯度分别为26、22、18和14,统计了各盐度下日本囊对虾累计死亡率,检测了日本囊对虾体内血清总蛋白(TP)含量、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)、血清ATP酶(Na^(+)/K^(+)-ATPase和T-ATPase)、超氧化物歧化酶(SOD)和多酚氧化酶(PPO)的动态变化。结果显示,盐度渐变胁迫下各盐度组累计死亡率的大小为14>18>22>26,血清蛋白含量随胁迫强度的增加和胁迫时间的延长呈下降趋势,后随着盐度回升而上升。24~72 h ACP和AKP活力表现为盐度组14<18<22<26,且随时间的延长呈下降趋势,Na^(+)/K^(+)-ATPase和T-ATPase活力显示出盐度梯度差异显著,14盐度组显著高于其它盐度组(P<0.05),SOD活力与PPO活力受盐度胁迫强度和胁迫时间的影响显著,盐度胁迫强度越强,SOD活力与对照组的差异越显著(P<0.05),血清PPO活力的变化趋势越明显。日本囊对虾机体免疫受盐度胁迫显著,研究结果为日本囊对虾的健康养殖提供重要的理论指导及借鉴。

质膜ATP酶作为新型杀真菌剂靶标的发现与应用

质膜H+-三磷酸腺苷酶(plasma membrane H+-ATPase,PMA),简称质膜ATP酶,属于质子泵家族蛋白,广泛存在于植物和真菌的质膜上;它们的主要作用是维持细胞营养摄取所需的跨膜电化学质子梯度和调控pH值。质膜ATP酶是真菌生命活动所必须的,该酶缺失后,突变体的生长出现明显缺陷甚至无法生长,这使其具有作为杀真菌剂靶标的潜力;另外,由于真菌和植物的质膜ATP酶同源性较低,故以质膜ATP酶为靶标开发的杀真菌剂具有生物安全性。最近明确的酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae和粗糙脉孢霉Neurospora crassa质膜ATP酶的冷冻电镜结构揭示了其六聚体的状态,阐明了质膜ATP酶的作用机制,为基于结构的药物设计提供了理论基础。本文主要对真菌中质膜ATP酶的结构和功能进行系统阐述,并对质膜ATP酶作为新型杀真菌剂靶标的研究现状进行综述,旨在为新型杀真菌剂的发现和应用提供理论依据。

低温处理对豇豆幼苗生长和POD、COD、ATPase同工酶的影响

在０～１℃低温处理豇豆幼苗时幼苗生长明显受抑，检查根系和胚轴中的ＰＯＤ、ＣＯＤ、ＡＴＰａｓｅ同工酶，发现谱带减少。低温对豇豆幼苗生长的伤害与幼苗组织内三种酶同工酶的变化呈明显的相关性。上述三种酶同工酶可以作为一种生化指标用于检测植物幼苗的受寒害状况。

补中益气汤不同配伍对脾虚大鼠血清淀粉酶、H^+,K^+-ATPase及糖代谢酶活性的影响

目的:探讨补中益气汤及其配伍组方对脾虚大鼠血清淀粉酶(AMS)、胃黏膜H^+,K^+-ATPase、血清及肝脏中糖代谢酶活性的影响。方法:用"五味偏食+游泳力竭+控制饮食"多因素法建立脾虚证大鼠模型,并随机分为脾虚模型组、补中益气汤组、去"柴-升"组和倍"柴-升"组,检测大鼠血清淀粉酶(AMS)、乳酸脱氢酶(LDH)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、胃黏膜H^+,K^+-ATPase及肝组织葡萄糖激酶(GK)的活性。结果:模型组血清AMS、LDH活性较正常对照组显著降低(P<0.05);给药后,补中益气汤组AMS、LDH活性显著升高(P<0.05)。模型组胃黏膜H^+,K^+-ATPase活性和肝组织GK活性较正常对照组显著升高(P<0.05);给药后,补中益气汤组H^+,K^+-ATPase、GK活性均显著降低(P<0.05);去"柴-升"组和倍"柴-升"组AMS、H^+,K^+-ATPase活性显著升高(P<0.05),而LDH、GK活性差异无统计学意义(P>0.05);各组SDH、IDH活性差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:补中益气汤及其配伍组方对于脾气虚证大鼠血清AMS、H^+,K^+-ATPase及糖代谢酶活性的异常具有改善调节作用,效果原方优于其配伍组方。

香蕉越冬期ATPase和保护酶的活性及膜脂过氧化

在越冬期，随着气温的降低香蕉叶片腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性明显提高，３月份后气温上升，活性开始下降．越冬期间超氧物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性呈下降趋势，膜脂过氧化产物ＭＤＡ含量呈上升趋势，其中台湾蕉ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性下降幅度比柴蕉大．ＡＴＰａｓｅ水解活性和ＭＤＡ含量明显高于柴蕉，经ＰＰ３３３处理的台湾蕉，ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性分别比对照提高６６．７７％、８６．４４％和２３７．７６％，ＡＴＰａｓｅ活性下降２４．１５％，ＭＤＡ含量下降２１．６７％。

丁基苯酞对局部脑缺血再灌注大鼠脑线粒体ATPase,抗氧化酶活性和脂质过氧化的影响

目的研究丁基苯酞对短暂性局部脑缺血大鼠脑线粒体ＡＴＰａｓｅ，抗氧化酶活性和脂质过氧化的影响。方法采用短暂性大脑中动脉阻断术（ｔＭＣＡＯ）模型，应用生物化学方法，测定神经细胞线粒体ＡＴＰａｓｅ活性，超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ），谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ－Ｐｘ），过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）的活性和ＭＤＡ的含量。结果（１）大鼠ｔＭＣＡＯ后线粒体ＡＴＰａｓｅ活性均有不同程度的下降，于ｔＭＣＡＯ前１０ｍｉｎ腹腔注射丁基苯酞（ＮＢＰ）（５～２０ｍｇ ／ｋｇ）能明显升高线粒体Ｎａ＋Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ ２＋ －ＡＴＰａｓｅ活性。（２）在缺血溶剂组，ＳＯＤ活性和线粒体ＧＳＨ－Ｐｘ活性显著下降，而ＭＤＡ的含量则明显升高。于缺血前１０ｍｉｎ，腹腔注射ＮＢＰ（２０ｍｇ ／ｋｇ）能明显增加缺血侧神经细胞线粒体和脑皮层总ＳＯＤ的活性，然而对ＣｕＺｎ－ＳＯＤ活性无明显作用。腹腔注射２０ｍｇ ／ｋｇ ＮＢＰ能显著升高线粒体ＧＳＨ－Ｐｘ的活性，而腹腔注射１０、２０ｍｇ ／ｋｇ ＮＢＰ能明显降低缺血脑线粒体ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０５＝。（?

榨菜胞质雄性不育系及其保持系的ATPase同工酶电泳比较

榨菜胞质雄性不育系及其保持系的ＡＴＰａｓｅ同工酶电泳比较胡美华陈竹君汪炳良（浙江农业大学园艺系，杭州３１００２９）ｔｕｄｙｏｎｔｈｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＡＴＰａｓｅｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓｉｎｔｈｅｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｅｌｉｎ...

不同毒物对猪肝线粒体COX和Ca^(2+)-ATPase同工酶的影响

采用不同毒物联苯胺、六氯苯、甲基苯丙胺对猪肝线粒体进行体外染毒,分析细胞色素氧化酶(COX)和钙ATP酶(Ca2+-ATPase)同工酶。结果表明,这两种线粒体酶同工酶受联苯胺和甲基苯丙胺的影响是同步的;受六氯苯的影响表现为COX反应提前和Ca2+-ATPase反应滞后。不同毒物对线粒体COX和Ca2+-ATPase毒性作用可能为一种混合机制。

橡胶树胶孢炭疽菌P型ATP酶基因CgATPase 01的敲除及表型分析

为了了解橡胶树胶孢炭疽菌的一个钙转运P型ATP酶基因Cg ATPase01的功能,本研究利用Splitmarker技术构建敲除载体,通过PEG介导原生质体转化对橡胶树胶孢炭疽菌菌株HBCg01的Cg ATPase 01基因进行敲除,根据表型变化及致病性检测对其功能进行分析。结果表明:通过Split-marker方法获得了敲除突变体△Cg ATPase01,表型分析发现该突变体与野生菌株间存在明显差异,病菌气生菌丝的颜色发生了改变,生长速率降低,产孢量下降,对橡胶树叶片的致病性减弱,推测该基因可能在橡胶树胶孢炭疽菌的产孢、生长发育和致病性等方面具有重要作用。本研究结果为进一步研究胶孢炭疽菌P型ATP酶基因功能和病原菌的致病机理奠定了基础。

马协和红莲型细胞质雄性不育水稻苗期ATPase同工酶分析

马协和红莲型细胞质雄性不育水稻亲本之间、亲本和F1之间的ATPase同工酶比较结果表明：①马协不育系和红莲型粤泰不育系分别属于两种不同的细胞质雄性不育类型；②依据ATPase同工酶4、5、7、9分别在马协63、明恢63、马协保持系和马协不育系中的特异表达，可在苗期对其进行纯度鉴定。

红光对绿豆下胚轴线粒体Ca^(2+)积累、ATPase及NAD激酶活性的影响

绿豆下胚轴切段经红光处理后10min,其线粒体的Ca^(2+)积累下降15％,Ca^(2+)-ATPase 及 Mg^(2+)-ATPase活性也分别下降29％和10％,切段CaM含量增加近1倍。Ca^(2+)存在时,红光能促进线粒体NAD 激酶活性。说明Ca^(2+)-ATPase及一部分Mg^(2+)-ATPase可作为钙泵控制Ca^(2+)进入线粒体。

钙离子转运ATP酶B2杂合突变导致小鼠渐进性前庭功能障碍

目的·研究不同月龄钙离子转运ATP酶B2(ATPase plasma membrane Ca^(2+)transporting 2,ATP2B2)Oblivion杂合突变小鼠前庭毛细胞结构和前庭功能的变化。方法·选取2月龄及8月龄Atp2b2 Oblivion杂合突变雄性小鼠各10只,以同龄C57BL/6J野生型雄性小鼠作为对照。通过免疫荧光实验观察不同月龄2组小鼠前庭毛细胞ATP2B2表达情况,并对微纹区及纹外区毛细胞数量进行统计;通过扫描电子显微镜(电镜)观察小鼠前庭毛细胞纤毛形态;通过透射电镜观察小鼠前庭毛细胞带状突触和线粒体;采用前庭诱发电位(vestibular evoked potential,VsEP)、前庭肌源性诱发电位(vestibular evoked myogenic potential,VEMP),及转棒、平衡木实验检测小鼠的前庭功能。结果·2组小鼠ATP2B2均主要表达于前庭毛细胞纤毛,2月龄及8月龄Atp2b2 Oblivion杂合突变小鼠微纹区及纹外区毛细胞数量与野生型小鼠均无明显差异。扫描电镜下,2月龄及8月龄杂合突变小鼠椭圆囊毛细胞纤毛无明显结构异常。透射电镜下,2月龄杂合突变小鼠前庭毛细胞表皮板与神经连接部位附近的线粒体结构无异常,突触结构无异常;8月龄杂合突变小鼠前庭毛细胞表皮板附近线粒体出现空泡样变性,神经连接部位附近的线粒体及突触结构无异常。2月龄及8月龄杂合突变小鼠VsEP及VEMP阈值均较野生型小鼠显著上升,VsEP波形分析显示杂合突变小鼠P1潜伏期延长,P1N1波幅降低(均P<0.05)。2月龄杂合突变小鼠转棒、平衡木实验结果未见明显改变,但8月龄杂合突变小鼠完成转棒、平衡木能力较野生型小鼠显著下降(均P<0.05)。结论·Atp2b2 Oblivion杂合突变小鼠2月龄时前庭电生理功能下降,8月龄时出现前庭相关行为学异常,Atp2b2 Oblivion杂合突变小鼠呈渐进性前庭功能障碍。

超极化停搏对体外循环中心肌组织磷酯酶A2及ATPase活性的影响

目的观察超极化停搏(超极化停搏)对体外循环中缺血再灌注心肌组织磷酯酶A2(PLA2)和ATPase活性的影响,评价其对心肌的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法在猫体外循环模型的基础上,比较超极化停搏组和去极化停搏组体外循环中心肌组织PLA2及Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase和Ca2+-ATPase活性。结果超极化停搏处理组可明显减轻体外循环中缺血再灌注导致的PLA2活性升高和ATPase活性下降。结论超极化停搏可能通过减轻缺血再灌注期间的Ca2+超载及抑制细胞膜磷脂水解而发挥其心肌保护作用。

运动减肥对肥胖儿童少年红细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻及ATPase酶活性的影响

目的:探讨肥胖儿童少年红细胞膜PS外翻水平和ATP酶活性及运动减肥干预对其的影响。方法:对64名肥胖儿童少年(按体脂百分比分为轻、中和重度肥胖组共3组)进行4周有氧运动减肥,采用流式细胞术测定红细胞膜PS外翻,干预前后进行血脂、PS外翻及Na+K+-ATPase和Ca2+Mg2+-ATPase酶活性的测定。结果:运动干预前轻度肥胖组PS外翻与其他2组肥胖者之间存在显著性差异(P≤0.05),HDL仅在轻度组和重度组之间存在显著性差异;运动干预后Na+K+-ATPase活性显著增加(P≤0.05),Ca2+Mg2+-ATPase活性虽有增加,但未呈显著性水平;运动干预后PS外翻虽然有所下降,但无显著性差异。结论:脂代谢紊乱的初期,膜PS外翻可能比血脂指标更能体现肥胖的发展。有氧运动减肥能显著增加红细胞膜Na+K+-ATPase活性,改善红细胞膜PS外翻水平,但后者对运动干预的效应滞后于血脂变化。

脑缺血后N-乙基马来酰亚胺敏感因子ATP酶失活致神经元自噬流障碍的病理机制

缺血性脑卒中是由脑血管梗塞引起的急性脑血管病,具有较高的发病率、致残率和致死率。研究发现,过度自噬或自噬不足均可导致细胞损伤。自噬包括自噬体的形成和成熟、自噬体与溶酶体融合、自噬底物在自噬溶酶体内的降解和清除,这些过程呈连续状态则称为自噬流。研究发现,脑缺血可导致自噬体与溶酶体间发生融合障碍,从而引发自噬流损伤。细胞内膜融合由3种核心组分介导,即N-乙基马来酰亚胺敏感因子(N-ethylmaleimide sensitive factor,NSF)ATP酶、可溶性NSF黏附蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAP)及可溶性NSF黏附蛋白受体(soluble NSF attachment protein receptors,SNAREs)。当SNAREs介导自噬体与溶酶体融合后以非活性的复合体形式存留于自噬溶酶体膜,须被NSF再激活为单体后方可发挥新一轮的膜融合介导作用,而NSF是唯一可再激活SNAREs的ATP酶。新近研究表明,脑缺血可显著抑制NSF ATP酶活性,导致其对SNAREs再激活减少,这可能是自噬体与溶酶体间发生融合障碍并导致神经元自噬流损伤的病理机制。本文就NSF ATP酶失活导致SNAREs互作失调、自噬体与溶酶体融合障碍,以及蛋白水解酶向溶酶体的转运不足引发神经元自噬流障碍的病理机制进行阐述,并针对NSF ATP酶失活改善神经元自噬流的方法进行探讨,为提高脑卒中治疗提供参考并指明深入研究方向。

Obg样ATP酶1促进人B细胞淋巴瘤Romas细胞生长的机制研究

目的:探讨Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1,OLA1)基因在人B细胞淋巴瘤Romas细胞发生发展过程中的作用机制。方法:利用基因表达谱数据交互分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库,对弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)组织中OLA1基因的差异表达进行分析,并考察GSE181063数据库中OLA1的表达对患者生存期的影响。采用感染逆转录病毒的方法,在Romas细胞中构建OLA1基因稳定敲减(OLA1-sh)和阴性对照细胞系。为判定敲减OLA1对Romas细胞生长机制的影响,采用细胞计数法、CCK-8法、小鼠皮下成瘤实验以及Ki67免疫组化染色检测细胞活力和增殖,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,TUNEL荧光染色检测细胞凋亡。通过TCGA数据库中48例DLBCL患者的差异基因,分析OLA1基因与细胞周期和凋亡相关基因的关联。RT-qPCR法检测细胞周期及凋亡相关基因,Western blot检测细胞周期及凋亡相关蛋白。结果:OLA1基因在DLBCL中呈高表达(P<0.05),敲减OLA1能显著抑制Romas细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导其凋亡(P<0.05或P<0.01)。此外,敲减OLA1还能促进Bax的mRNA及蛋白表达,抑制细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶6(cyclin-dependent kinase 6,CDK6)、细胞周期蛋白E1(cyclin E1)和BCL2的mRNA及蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:敲减OLA1基因能够显著抑制人B细胞淋巴瘤Romas细胞的生长,其作用机制可能涉及细胞周期的阻滞及细胞凋亡的诱导。

F1Fo ATP合酶作为抗真菌药物靶点的研究进展

近年来,随着肿瘤化疗、免疫抑制剂及广谱抗菌药物的广泛使用,侵袭性真菌感染的发病率和死亡率在全球呈明显上升趋势,真菌感染已成为严重威胁公共卫生健康的病原体之一。2022年世界卫生组织(WHO)公布的真菌重点病原体清单,也进一步强调了真菌对人类的危害已经达到了危机点,必须引起全球范围内的高度重视。目前临床抗真菌药物种类有限、随之耐药性的产生,因此,寻找新的抗真菌药物靶点尤为重要。F1Fo ATP合酶,作为药物理想分子靶标,一直以来都是研究的热点。随着F1Fo ATP合酶亚基作用机制明了,表明F1Fo ATP合酶作为抗真菌药物靶点的巨大潜力。在此,我们收集整理近年来关于F1Fo ATP合酶的研究成果,从ATP合酶的各亚基展开,进而阐述各亚基的结构功能以及机制,综述各亚基作为靶点的潜在可能性,为抗真菌药物靶点的研究提供参考。

菠萝叶片绿色组织与贮水组织液泡膜ATPase和焦磷酸酶特性(英文)

研究了景天酸代谢 (CAM)植物菠萝叶片绿色组织与贮水组织液泡膜ATPase和焦磷酸酶 (PPase)特性。绿色组织有较高的ATPase和PPase活力。贮水组织 (绿色组织 )ATPase和PPase活力的最佳温度分别为 43和 49℃ (3 7和 46℃ )。当温度小于最佳温度时 ,ATPase和PPase活力随着温度的上升而上升 ;而当温度大于最佳温度时 ,ATPase和PPase活力随着温度的上升而下降。在 (1 0～ 46℃ ) 1 0～3 7℃的温度范围 ,绿色组织 (PPase)ATPase活力随着温度的上升而上升的速度大于贮水组织中(PPase)ATPase活力上升的速度 ,绿色组织有 (相对 )较高的ATPase和PPase活力 ;但在 (49～ 6 1℃ )43～ 5 5℃的温度范围 ,贮水组织中 (PPase)ATPase活力随着温度的上升而下降的速度小于绿色组织中(PPase)ATPase活力下降的速度 ,贮水组织有相对较高的ATPase和PPase活力。此外 ,贮水组织中这两种酶活力的热稳定性强于绿色组织中这两种酶活力的热稳定性。对这两种酶活力的最佳

低氧、耐力训练对大鼠代谢酶及肌球蛋白Ca-ATPase的影响

目的:了解低氧及耐力练习对骨骼肌氧化酶、糖酵解酶和肌球蛋白Ca- ATPase的影响,从而间接判断低氧及耐力训练条件下肌肉收缩速度及耐力等特性的改变。方法:4 0只雄性SD鼠随意分成常氧安静组、常氧运动组、低氧安静组、低氧运动组;运动形式为跑台练习,跑台坡度12°,跑速2 2 m/ min,持续时间6 0 min/天;2 8天后测定琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶和肌球蛋白Ca- ATPase活性。结果:低氧两个组肌球蛋白Ca- ATPase活性均高于常氧安静组;低氧安静组比常氧安静组乳酸脱氢酶的活性增加;常氧耐力组、低氧安静组及低氧耐力组琥珀酸脱氢酶的活性均增加。结论:低氧可增加肌纤维收缩速度,同时增加氧化酶和糖酵解酶的活性;常氧和低氧耐力练习均增加氧化酶的活性。

生姜对缺血性脑损伤时过氧化氢酶、Ca^(2+)—ATPase活性及乳酸含量的影响

为了解生姜对缺血性脑损伤时过氧化氢酶、Ca^(2+)—ATPase活性及乳酸含量的影响,本实验采用Pussinell′s四血管结扎法和Lamson＇s失血性休克法制造家兔脑急性完全性缺血再灌注模型。观察生姜对大脑皮层过氧化氢酶、Ca^(2+)—ATPase和乳酸含量改变.结果表明:生姜能有效地保护过氧化氢酶和Ca^(2+)—ATPase的活性,能明显降低乳酸的含量,亦可使过氧化氢酶和Ca^(2+)—ATPase与乳酸比值呈显著性升高。提示生姜能保护缺血再灌注大脑。