四妙丸上调高尿酸血症大鼠小肠ABCG2表达促进肠道尿酸排泄的作用

目的:研究四妙丸对高尿酸血症大鼠小肠三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)表达和肠道尿酸排泄的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆组(4.7 mg·kg^(-1))和四妙丸高、中、低剂量组(2260.6、1130.3、565.2 mg·kg^(-1)),每组8只。以氧嗪酸钾和次黄嘌呤制备高尿酸血症模型,连续21 d。第8天予相应药物干预,1次/d,持续14 d。第21天处死大鼠,检测血尿酸、肠道尿酸、血肌酐、血尿素氮等指标,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠小肠ABCG2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小肠ABCG2 mRNA表达,免疫组化法检测小肠ABCG2蛋白表达和定位。结果:与正常组比较,模型组血尿酸、血肌酐、血尿素氮显著升高(P<0.01);与模型组比较,四妙丸各剂量组和苯溴马隆组大鼠血尿酸水平均显著降低(P<0.01),四妙丸中、低剂量组肠道尿酸明显升高(P<0.05,P<0.01),苯溴马隆组血肌酐显著升高(P<0.01),低剂量组血尿素氮明显降低(P<0.05),四妙丸低剂量组与苯溴马隆组血尿酸比较差异无统计学意义。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组ABCG2蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,四妙丸中、低剂量组ABCG2蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),四妙丸高剂量组及苯溴马隆组升高但差异无统计学意义。Real-time PCR分析显示,与正常组比较,模型组ABCG2 mRNA表达差异无统计学意义;与模型组比较,四妙丸中、低剂量组ABCG2 mRNA表达明显升高(P<0.05)。免疫组化显示,ABCG2蛋白主要分布于肠绒毛,与正常组比较,模型组ABCG2蛋白表达差异无统计学意义;与模型组比较,四妙丸各剂量组ABCG2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:四妙丸可显著降低高尿酸血症大鼠血尿酸,其中低剂量四妙丸具有与苯溴马隆等效的降尿酸作用,同时可保护肾功能,其机制可能与上调肠道ABCG2表达促进肠道尿酸排泄有关。

基于肠道尿酸转运体ABCG2的芒果苷降尿酸作用机制分析

目的：探讨芒果苷对尿酸诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸、肠道尿酸转运体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2 [ATP-binding cassette superfamily G（White）member2，ABCG2]mRNA及蛋白表达的影响，初步探讨芒果苷降尿酸的作用机制。方法：昆明种小鼠60只，随机分为6组，每组10只，分为正常组，模型组组，芒果苷（1．5，3．0，6．0mg·kg^-1）组和阳性药苯溴马隆（25．0mg·kg^-1）组，除正常组外，以腹腔注射的方式给予小鼠尿酸，诱导形成高尿酸血症模型，同时灌胃给予芒果苷及苯溴马隆，2周后磷钨酸法检测小鼠血尿酸，逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）及蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测小鼠空肠、回肠部ABCG2mRNA和蛋白的表达，并采用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠回肠病理学变化。结果：与正常组比较，模型组小鼠血尿酸显著升高，小鼠的空部、回肠部ABCG2mRNA明显降低，小鼠的空部、回肠部ABCG2蛋白明显升高（P〈0．05，P〈0．01），病理变化不明显；灌胃给药2周后，与模型组比较，芒果苷（3．0，6．0mg·kg。）组小鼠血尿酸明显下降（P〈0．05，P〈0．01），芒果苷（1．5，3．0，6．0mg·kg。）组小鼠的空部、回肠部ABCG2mRNA表达均明显的上调，芒果苷（6．0mg·kg。）组小鼠空肠部ABCG2蛋白明显下调，而在小鼠回肠部，芒果苷（3．0，6．0mg·kg。）组的ABCG2蛋白表达明显下调（P〈0．05）。结论：芒果苷可明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平，并能使小鼠肠道ABCG2mRNA和蛋白表达改变恢复至正常水平。