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PMCA1-4及其A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织中的表达
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作者 罗蜜 褚汉启 +5 位作者 陶雁玲 周良强 陈金 刘云 杜智会 陈请国 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期202-206,共5页
目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总... 目的研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca^(2+)-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总RNA。通过免疫荧光方法检测PMCA1-4在成年大鼠内耳前庭组织的表达部位,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA1-4的A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织的表达类型。结果球囊和椭圆囊荧光染色切片中,于毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA1表达,毛细胞纤毛中可见PMCA2强表达,毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA3弱表达,PMCA4几乎不表达。4种PMCA亚型在球囊表达的剪接体分别为PMCA1x/b、PMCA2w/b、PMCA3z/(a,b)和PMCA4x/b,它们在椭圆囊的表达类型与球囊相同。结论PMCA1-4在成年大鼠前庭器官的表达部位存在差异,这4种PMCA亚型的剪接体类型也各不相同。这种差异性可能是为了满足前庭组织和亚细胞结构域对Ca2+调节的特殊需求。 展开更多
关键词 质膜钙atp酶异构体1-4 球囊 椭圆囊 前庭毛细胞 剪接变异体
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Intramolecular stacking interaction in mixed-ligand complexes containing ATP4-and aromatic N-heterocyclic ligands
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作者 乐学义 毋福海 +2 位作者 贺小凤 宋粉云 计亮年 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期356-362,共7页
The stability constants of the binary ML2+ and ternary M(ATP)L2? complexes, where L=Iq (isoquinoline) or BIm (benzimidazole) and M=Zn2+ or Cd2+, have been determined by potentiometric pH titration in aqueous solution ... The stability constants of the binary ML2+ and ternary M(ATP)L2? complexes, where L=Iq (isoquinoline) or BIm (benzimidazole) and M=Zn2+ or Cd2+, have been determined by potentiometric pH titration in aqueous solution at I=0.1 mol/L (NaClO4), T=25°C. The stability of the ternary complexes characterized by ΔlogKM=logKM(ATP)LM(ATP)L- logKMML corresponding to the equilibrium M(ATP)2? + ML2+ = M(ATP)L2? + M2+ in higher than what would be expected on statistical grounds. The increase may be related to the stacking interaction between the aromatic ring of the ligands L and the purine moiety of ATP4–. 1H NMR studies of Zn2+/ATP4?/L confirm the presence of stacking in the ternary complexes. It is concluded that the strength of the intramolecular stacking interaction ia dependent on the structure of the aromatic ring of the ligand L and the formation of a metal ion bridge. Possible implications an discussed briefly. 展开更多
关键词 Stacking interaction mixed-ligand complexes aromatic N-heterocyclic ligands atp4- stability constants
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粟酒裂殖酵母蛋白Atp4定位和功能的研究 被引量:1
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作者 李琴 张琳琳 黄鹰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期59-63,共5页
研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中Atp4的定位和参与线粒体功能的机制。借助于基因敲除、荧光显微镜观察、线粒体提取、生化试剂处理和Western blotting等技术开展研究。在甘油培养基上,Δatp4突变菌株表现出生长缺陷,是... 研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中Atp4的定位和参与线粒体功能的机制。借助于基因敲除、荧光显微镜观察、线粒体提取、生化试剂处理和Western blotting等技术开展研究。在甘油培养基上,Δatp4突变菌株表现出生长缺陷,是线粒体呼吸缺陷菌;Fluorescence microscope观察到用GFP标记的Atp4和线粒体是共定位的;采用生化试剂TritonX-100和蛋白酶K处理以及碳酸钠处理Atp4-Flag和yHL6381线粒体,结果表明Atp4定位在线粒体内膜;Western blotting实验结果表明Atp4缺失导致Cob1、Cox1、Cox2和Atp6表达量剧烈下降,Cox3和Cox4蛋白表达量也有略微下降。综上所述,Atp4在线粒体内膜发挥功能,对于维持线粒体编码蛋白的正常表达至关重要,是线粒体呼吸链功能的发挥所必需的。 展开更多
关键词 线粒体 atp4 粟酒裂殖酵母 呼吸链
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丹参质膜H+-ATP4酶基因(SmPHA4)在酿酒酵母中表达及其抗逆功能分析
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作者 刘娜娜 杨晓冰 +1 位作者 李晔 李秀红 《生物技术》 CAS 2022年第3期269-275,324,共8页
[目的]将丹参质膜H^(+)-ATP4酶基因(SmPHA4)克隆并导入到真核生物模型INVSc1酿酒酵母中,测试SmPHA4基因的酵母转化子在非生物胁迫下的耐受性,以分析该基因(SmPHA4)的功能。[方法]将SmPHA4基因全长通过无缝克隆的方式连入pYES2载体中获... [目的]将丹参质膜H^(+)-ATP4酶基因(SmPHA4)克隆并导入到真核生物模型INVSc1酿酒酵母中,测试SmPHA4基因的酵母转化子在非生物胁迫下的耐受性,以分析该基因(SmPHA4)的功能。[方法]将SmPHA4基因全长通过无缝克隆的方式连入pYES2载体中获得重组质粒pYES2-SmPHA4,并把该重组质粒导入到真核生物INVSc1酿酒酵母中,对SmPHA4基因的酵母转化子在不同温度、盐碱度、氧化剂等条件胁迫下的菌株存活率进行了分析统计。[结果]SmPHA4基因的酵母转化子对极端温度的耐受性有所增强(47℃和-20℃)(P<0.05或P<0.01)。但是在其余几种非生物胁迫下如3 mol/L NaCl、3 mol/L KCl、100 mmol/L H_(2)O_(2)和20%PEG 6000等胁迫条件下均显示出降低的耐受性(P<0.05或P<0.01)。[结论]SmPHA4基因可以增强酵母转化子对特定极端温度的耐受性,但降低了其在试验条件中盐胁迫、氧化胁迫、干旱胁迫因子的耐受性,显示SmPHA4基因与丹参的抗非生物胁迫功能有关。 展开更多
关键词 丹参 质膜H+-atp4 酿酒酵母 基因表达 功能分析
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