黄精调控ATR/Chk1通路干预自然衰老大鼠血管老化的作用研究

目的基于ATM与Rad3相关蛋白激酶(ATR)/细胞周期检测点激酶1(Chk1)信号通路探讨黄精干预自然衰老大鼠血管老化的作用机制。方法将10只2月龄大鼠作为青年组,将40只18月龄的自然衰老大鼠按体质量随机分为老年组及黄精低、中、高剂量组(1、2、4 g·kg^(-1)),每组10只。灌胃给药,灌胃体积为10 mL·kg^(-1),每天给药1次,持续给药12周。采用苏木精-伊红(HE)和Masson染色法观察主动脉组织病理形态学变化,并测量平滑肌细胞(SMC)和胶原纤维(CF)的绝对面积,计算相对含量;采用微量法检测主动脉中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;采用Western Blot法检测主动脉ATR、Chk1、p53、p21蛋白表达水平。结果与青年组比较,老年组大鼠主动脉内膜出现损伤且不光滑,中膜明显增厚且SMC排列紊乱,弹力膜扭曲、断裂;主动脉胶原染色区域明显增多,SMC、CF相对含量显著升高(P<0.01),T-AOC、GSH-Px活性显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01),ATR、Chk1、p53、p21蛋白表达显著上调(P<0.01)。与老年组比较,黄精各剂量组大鼠主动脉内膜受损减轻,中膜增厚不明显,弹力膜结构较为完整,主动脉胶原染色区域减少,SMC、CF相对含量明显降低(P<0.05,P<0.01);黄精中、高剂量组大鼠主动脉中T-AOC、GSH-Px活性显著升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.05,P<0.01),ATR、Chk1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),黄精高剂量组大鼠主动脉中p53蛋白表达显著降低(P<0.01),黄精低、中、高剂量组大鼠主动脉中p21蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄精可延缓自然衰老大鼠的血管老化,可能与其增强抗氧化应激能力,抑制ATR/Chk1通路的活化有关。

基于ATR/Chk1/P53信号通路探讨三七总皂苷对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤的保护作用

目的基于ATR/Chk1/P53信号通路探讨三七总皂苷(PNS)对自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤的保护作用。方法将SPF级SD大鼠随机分为青年对照组(3月龄),衰老模型组(18月龄),PNS低、中、高剂量(10、30、60 mg/kg)组(18月龄),每组10只。PNS低、中、高剂量组大鼠分别ig给予PNS 10、30、60 mg/kg,每周6 d,给药6个月。结束时称体质量后处死大鼠,迅速取出睾丸组织,称取睾丸质量,计算睾丸指数。HE染色法观察睾丸组织形态学变化,免疫组化法检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、ATR的表达和定位,Western blotting检测睾丸组织中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、Chk1、p-P53、P21的表达水平。结果与青年对照组比较,衰老模型组大鼠睾丸质量、睾丸指数显著降低,PNS能不同程度地升高睾丸质量、睾丸指数;HE结果表明,PNS能显著改善自然衰老所致的睾丸组织形态学变化;与青年对照组相比,衰老模型组大鼠睾丸组织DNA损伤标志蛋白γ-H2AX表达水平和阳性灶点数明显升高,ATR的阳性灶点数及其下游Chk1、p-P53、P21的蛋白表达明显升高,而PNS干预后可降低上述DNA损伤相关反应蛋白的表达。结论 PNS能够减轻自然衰老大鼠睾丸组织DNA损伤,其机制可能与调控ATR/Chk1/P53信号通路有关。

人脑胶质瘤中ATM、ATR、Chk1和Chk2基因表达研究

目的研究ATM、ATR、Chk1和Chk2在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤发生的关系。方法采用SYBR^TMGreen实时定量PCR技术检测35例人原发脑胶质瘤组织和10例正常脑组织中的ATM、ATR、Chk1和Chk2的表达水平。结果ART、Chk1和Chk2基因在各级脑胶质瘤中表达较正常脑组织升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。其中，ATR和Chk2基因表达在Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤组织之间差异均无统计学意义（P〉0．05），而Chk1在Ⅳ级胶质瘤中的表达较Ⅱ级、Ⅲ级胶质瘤明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）。ATM基因表达量在正常脑组织和各级脑胶质瘤中差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ATR、Chk1和Chk2在人脑胶质瘤中表达上调，说明这些基因可能与人脑胶质瘤的发生有关。其中，Chk1表达与肿瘤恶性程度有关，可作为判别胶质瘤病理级别的辅助指标。

靶向细胞周期G2调控点在恶性血液病治疗作用的研究进展

细胞周期与恶性肿瘤的发生发展密切相关。肿瘤患者接受反复化疗后，体内有一部分肿瘤细胞通过细胞周期阻滞及自我防御修复机制持续存活，造成化疗耐药、肿瘤复发难治。以细胞周期调控尤其以G2期调控蛋白为靶向的化疗增敏研究成为当今热点。近年研究表明，G2期靶点抑制剂不仅在实体瘤的体内外治疗中起到重要作用，而且在多种恶性血液病中也显示出重要意义。笔者综述了G2期调控中一些重要靶点蛋白在实体瘤及恶性血液病的研究进展，以期为新治疗策略的提出提供思路。

人类乳突病毒利用DNA损伤修复机制完成其生命周期（英文）

本文总结目前学术界对人类乳突病毒如何利用DNA损伤修复来完成其复制的认识。DNA损伤修复对人类乳突病毒复制有不可或缺的作用。乳突病毒通过对许多DNA损伤因子的调控来控制病毒本身的复制。值得注意的是,病毒通过磷酸化STAT-5转录因子激活ATM和ATR DNA损伤修复通路,这意味着在乳突病毒复制的过程中,病毒利用对免疫反应的调节来激活DNA损伤修复机制,从而达到其复制的目的。