携带IL-7的新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗对肝癌的免疫治疗效应

目的研究携带IL-7的新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗的抗肝癌作用。方法鸡胚扩增新城疫病毒LX/(IL-7),体外感染Hepa1-6细胞,显微镜下观察LX/(IL-7)的裂解性特征,并采用ELISA的方法检测感染Hepa1-6细胞后IL-7的表达水平;将C57BL/6小鼠分为2组,每组5只,通过皮下接种5×106个Hepa1-6细胞建立小鼠肝癌模型。成瘤1周后,200μg/ml丝裂霉素C处理的2×107/ml Hepa1-6细胞感染LX/(IL-7)病毒制成肿瘤疫苗。对照组小鼠皮下接种丝裂霉素C处理的Hepa1-6细胞,每只接种1×106个细胞,实验组接种瘤苗,每只接种1×106个细胞,每周2次。测量肿瘤体积,通过流式检测小鼠脾脏细胞免疫反应。结果 LX/(IL-7)病毒具有非裂解性特征,可以高效地感染肝癌细胞并分泌IL-7。肝癌皮下模型的结果表明LX/(IL-7)修饰的Hepa1-6瘤苗具有较好的肿瘤免疫治疗效果,流式结果显示其可增强效应T细胞的比例,促进T细胞的免疫应答。结论携带IL-7的新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗具有显著抗肝癌作用。

NDV-ATV治疗对非小细胞肺癌患者外周血T_H极化的影响

目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗 (NDV ATV)对非小细胞肺癌 (NSCLC)患者TH1 TH2 的影响。方法 用ELISA方法于手术前 2d、NDV ATV治疗前 1周及每次接种后 1周检测外周血血清中TH1 类细胞因子 (IL 2、IFN γ)和TH2类细胞因子 (IL 4、IL 10 )浓度。结果 NSCLC患者免疫系统以TH2 占优势 ;经连续 4次 ( 4周 )NDV ATV治疗后 ,以TH1 占优势。结论 NSCLC患者机体免疫系统以TH2 占优势 ,可能与肿瘤“免疫逃逸”有关 ;NDV ATV主动特异性免疫疗法能改变肿瘤患者TH2 占优势的局面 ,使TH2 向TH1 扭转 ,这可能是NDV ATV免疫治疗的机理之一。

胃癌患者术后NDV-ATV治疗对机体免疫功能的影响

目的 探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤疫苗 (NDV -ATV )治疗胃癌术后患者机体免疫功能的影响。方法 采用流式细胞术分析 3 6例胃癌术后 (术后 2、3、4、5周 )NDV -ATV治疗患者外周静脉血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化情况 ,并以15例术后未接受NDV -ATV治疗的胃癌患者作对照。结果 对照组术后CD+3 、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8逐渐升高 ,以术后 3周内升高最为明显。NDV -ATV治疗组 ,术后CD+3 、CD+4、NK细胞所占百分比和CD+4/CD+8上升速度更快 ,持续时间更长。治疗结束后与治疗前比较 ,有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ;且明显高于未接受NDV -ATV治疗的对照组患者 (P <0 .0 5 )。第 1次治疗后和治疗结束后相比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 NDV -ATV可同时视为 1种免疫调节剂 ,能明显改善胃癌患者术后机体的免疫功能 。

NDV-ATV联合化疗对消化道肿瘤患者免疫功能的影响

目的:探讨新城鸡瘟病毒修饰的自体肿瘤细胞疫苗特异性主动免疫(NDV-ATV)联合化疗治疗消化道肿瘤的临床应用价值及对患者免疫功能的影响。方法:消化道肿瘤患者术后36例治疗组给予NDV-ATV及化疗,与单用化疗对照组22例进行比较,对其疗效进行判断评价,检测治疗前后外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值变化及NK细胞的活性I、gAI、gMI、gG免疫球蛋白水平。结果:NDV-ATV联合化疗治疗组,患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞和免疫球蛋白水平均较治疗前显著增高(P<0.05),且明显高于未接受NDV-ATV治疗的对照组(P<0.05),而对照组无明显变化(P>0.05)。近期随诊也表明NDV-ATV联合化疗效果明显优于单纯化疗组(p<0.01)。结论:NDV-ATV可以改善消化道肿瘤患者的免疫功能,联合化疗可提高治疗效果。

新城疫病毒疫苗及白细胞介素-15对卵巢癌细胞株体外作用的实验研究

目的研究新城疫病毒疫苗(ATV-NDV)和白细胞介素-15(IL-15)对人卵巢癌细胞株体外生长的作用。方法将正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO体外培养;分离正常人外周血淋巴细胞;制备人卵巢癌细胞株3AOATV-NDV,(1-2)×107细胞/0.5ml;将ATV-NDV、IL-15、ATV-NDV+IL-15分别与正常人外周血淋巴细胞共培养24、48、72、96小时;用正常人外周血淋巴细胞作对照,用MTT比色法测定不同浓度ATV-NDV、IL-15作用不同时间对淋巴细胞增殖程度的影响,将ATV-NDV(50μl)、rhIL-15(50ng/ml)及ATV-NDV(50μl)+IL-15(50ng/ml)与人外周血淋巴细胞共培养48小时,按效靶比分别为50∶1、25∶1、10∶1加入正常人卵巢上皮细胞和人卵巢癌细胞株3AO,继续培养24、48、72、96小时,MTT法测定细胞生长抑制率;HE染色法观察效靶比为50∶1、继续培养24-96小时后细胞形态学变化。结果1.淋巴细胞增殖改变:ATV-NDV、IL-15具有对淋巴细胞的增殖活性,随浓度的增加和时间的延长而增强(P<0.05),与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。IL-15与ATV-NDV具有协同作用,并且这种协同作用与IL-15、ATV-NDV的单独作用相比差异有显著性(P<0.01);IL-15、ATV-NDV对正常人外周血淋巴细胞增殖作用的影响与对照组相比差异有显著性(P<0.01);IL-15与ATV-NDV作用相比差异无显著性(P=0.35)。2.ATV-NDV、IL-15对肿瘤细胞生长抑制作用:活化的淋巴细胞与靶细胞共培养可杀死肿瘤细胞,并具有时效性(P<0.05)。3.细胞形态学变化:活化的淋巴细胞作用48小时后肿瘤细胞即已出现凋亡形态,作用96小时时即有坏死细胞形态出现。结论ATV-NDV和IL-15对正常人外周血淋巴细胞增殖有影响,经ATV-NDV、IL-15及ATV-NDV+IL-15共培养的正常人外周血淋巴细胞可有效地抑制细胞株3AO生长,具有时间、浓度依赖性。

新城疫病毒疫苗和IL-15治疗3AO裸鼠移植瘤实验研究

目的探讨新城疫病毒疫苗(ATV-NDV)和白细胞介素-15(IL-15)对3AO裸鼠皮下移植瘤的治疗作用及其机制。方法建立3AO裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,每组10只。I组注射ATV-NDV 0.2ml;II组注射IL-15100μg/kg;III组注射IL-15 100μg/kg加ATV-NDV0.2ml;IV组为对照组,腹腔注射生理盐水(ATV-NDV右侧下肢皮下注射,IL-15腹腔注射,按每只裸鼠0.2ml配制);观察各组裸鼠成瘤率、生存期和生存延长率及肿瘤生长曲线。流式细胞术(FCM)观察裸鼠移植瘤细胞凋亡率及细胞周期,双标记NK细胞群计数;测定裸鼠脾脏重量;移植瘤瘤体及各组裸鼠肝、脾、肾行常规病理学检查。结果实验组与对照组之间,联合治疗组与单独治疗组之间相比:荷瘤裸鼠生存延长率,移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数,裸鼠脾脏重量具有明显差异。病理学检查各治疗组中均可见肿瘤坏死,凋亡细胞,肿瘤细胞周围及肿瘤内有明显的淋巴细胞浸润。ATV-NDV治疗组脾脏有增生,肥大。IL-15治疗组脾脏有充血增生,肝脏有肝细胞水肿,嗜酸性变性,周围有浊肿。对照组裸鼠肝、脾、肾未见明显病理改变。结论ATV-NDV、IL-15对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤具有明显抑制作用,IL-15对ATV-NDV有协同作用。其机制与ATV-NDV直接、特异地对肿瘤细胞产生细胞毒作用,提高了肿瘤抗原的免疫原性;IL-15增强NK细胞的细胞毒活性,诱导NK细胞及细胞因子产生有关。

纽卡斯尔病毒疫苗和白细胞介素-12对荷人卵巢癌裸鼠模型作用的实验研究

目的:探讨纽卡斯尔病毒疫苗(ATV-NDV)和白细胞介素-12(IL-12)对3AO裸鼠皮下移植瘤的影响及其作用机制。方法:建立3AO裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,每组10只。Ⅰ组注射ATV-NDV(0.2mL);Ⅱ组注射IL-12(100ng/kg);Ⅲ组注射IL-12(100ng/kg)加ATV-NDV(0.2mL);Ⅳ组为对照组,腹腔注射生理盐水0.2mL;观察各组裸鼠成瘤率、生存期和生存延长率及肿瘤生长曲线。流式细胞术(FCM)观察裸鼠移植瘤细胞凋亡率及细胞周期,双标记计数NK细胞比例;称取裸鼠脾脏质量;移植瘤瘤体及各组裸鼠肝、脾、肾行组织病理学变化检查。结果:治疗组在荷瘤裸鼠生长延长率,裸鼠移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数,裸鼠脾脏重量方面明显高于对照组,Ⅲ组高于Ⅰ组和Ⅱ组。组织病理学检查各治疗组中均可见有肿瘤坏死,肿瘤内及周围有明显的淋巴细胞浸润。结论:ATV-NDV和IL-12对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用。IL-12可增强ATV-NDV对卵巢癌的抑制作用。