视网膜节细胞与视交叉上核AVP样神经元间联系的研究──假狂犬病毒顺行追踪结合免疫荧光双标法

下丘脑视交叉上核（SCN）是哺乳动物昼夜节律的主要超搏器，由视网膜节细胞（RGC）轴突构成的视网膜下丘脑束可投射至SCN。本室既往研究发现RGC轴突终末可紧密附着于SCN精氨酸血管加压素（AVP）样神经元的脑体上。为进一步证实之一，本文选用SD大鼠20只，单侧眼球内注射假狂犬病毒（PRV，4μI，5×108pfu／ml）。动物分别存活48、56、72、96h（每组5只）后灌注固定、取材、恒冷箱冠状切片（片厚40μm）。切片入羊抗PRV（l：200）和兔抗AVP（l：2000）混合血清，室温孵育24h，然后转入合驴抗羊IgG－FITC和驴抗免IgG－TexasRed的溶液中（二抗为Jac－son产品）室温孵育lh，荧光显微镜下观察，结果：（1）SCN神经元被病毒感染的时间始于56h，并随存活时间的延长而增多；（2）呈绿色荧光的病毒感染神经元见于双侧SCN，注射对侧占优，主要位于SCN的腹外侧和嘴侧份，个别散在于H者之外：（3）SCN由个别病毒感染的神经元可同时呈AVP的红色荧光，此类双标神经元系病毒由视网膜节细胞顺行运输并跨突触传给了SCN的AVP神经元所致。表明视网膜节细胞与SCN的AVP神经元间有直接的突触性联系。该结果为AVP神经元对SCN节律的机能调控提供了进一步研究的线索。