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拟南芥抵抗丁香假单胞杆菌过程中AZI1基因功能研究 被引量:3
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作者 高航 杜改亮 +1 位作者 麻力 徐子勤 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期429-436,共8页
AZI1属于脂转移蛋白家族,它在拟南芥抵抗病原菌侵染过程中可能起着传递信号物质的作用。该实验以过表达和T-DNA插入突变体及野生型拟南芥植株为材料,通过RNA印迹、蛋白质免疫印迹和原位免疫组织化学方法,研究了拟南芥壬二酸诱导基因AZI... AZI1属于脂转移蛋白家族,它在拟南芥抵抗病原菌侵染过程中可能起着传递信号物质的作用。该实验以过表达和T-DNA插入突变体及野生型拟南芥植株为材料,通过RNA印迹、蛋白质免疫印迹和原位免疫组织化学方法,研究了拟南芥壬二酸诱导基因AZI1对丁香假单胞杆菌的抗性功能。结果表明:(1)AZI1基因可以被丁香假单胞杆菌、H2O2和乙烯利诱导,它可能参与水杨酸和乙烯介导的抗菌途径。(2)蛋白质免疫印迹实验结果显示,丁香假单胞杆菌侵染叶片的叶柄渗出液中存在AZI1蛋白及其同源物EARLI1,并能够与其他蛋白质形成复合体,说明AZI1有可能通过维管组织移动到个体的其他部位,与信号分子的转移有关。(3)AZI1及其同源物EARLI1主要在花序茎的木质化部位表达,过表达AZI1基因能够促进木质素的合成,提高拟南芥对丁香假单胞杆菌的抗性。 展开更多
关键词 拟南芥 azi1 DAB 丁香假单胞杆菌 台盼蓝
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拟南芥HyPRP蛋白AZI1在大肠杆菌中的表达及其抗真菌活性分析 被引量:1
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作者 王晓燕 杜改亮 +4 位作者 韩瑶瑶 刘梦欣 马燕勤 冯欢 徐子勤 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期63-72,共10页
AZI1(AZELAIC ACID INDUCED 1)基因位于拟南芥4号染色体上,编码产物是脂质转移蛋白(lipid transfer protein,LTP)家族的一个成员。该基因在系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中具有重要功能,名称来自它可以被壬二酸(azela... AZI1(AZELAIC ACID INDUCED 1)基因位于拟南芥4号染色体上,编码产物是脂质转移蛋白(lipid transfer protein,LTP)家族的一个成员。该基因在系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中具有重要功能,名称来自它可以被壬二酸(azelaic acid,Az A)诱导。已有的研究结果显示,在拟南芥中由Az A和甘油-3-磷酸(glycerol-3-phosphate,G3P)诱导的SAR反应需要AZI1和DIR1,这两个脂质转移蛋白有助于G3P的积累。为了确定AZI1蛋白是否具有抗真菌活性,本工作构建了原核表达载体p ET28a-AZI1,利用大肠杆菌BL21(DE3)受体细胞制备了没有信号肽的AZI1重组蛋白。Western免疫印迹分析发现通过半乳糖苷类似物IPTG诱导表达的AZI1重组蛋白主要以包涵体的形式存在。体外抑菌实验以及激光共聚焦显微观察结果表明,用镍离子亲和层析树脂纯化的AZI1重组蛋白对灰霉菌、赤霉菌、棉花枯萎病菌和酿酒酵母细胞的生长/分裂均具有抑制作用。 展开更多
关键词 拟南芥 azi1 蛋白纯化 系统获得抗性 Western印迹分析 抑真菌作用
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拟南芥AZI1基因对酿酒酵母细胞生长和蒜薹灰霉菌侵染的抑制作用 被引量:5
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作者 张欣 徐之艳 +1 位作者 Michael Schlappi 徐子勤 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期57-62,共6页
本工作采用酿酒酵母细胞表达载体pESC和植物细胞表达载体pPZP211分析了拟南芥AZI1基因对真菌的抗性功能。半乳糖诱导产生的AZI1蛋白可以使酵母细胞的生长能力明显降低。DAB和台酚蓝染色结果显示用蒜薹灰霉菌孢子处理Col-0野生型植株叶... 本工作采用酿酒酵母细胞表达载体pESC和植物细胞表达载体pPZP211分析了拟南芥AZI1基因对真菌的抗性功能。半乳糖诱导产生的AZI1蛋白可以使酵母细胞的生长能力明显降低。DAB和台酚蓝染色结果显示用蒜薹灰霉菌孢子处理Col-0野生型植株叶片后被侵染部位只能产生少量H2O2,病原体可以扩散,而AZI1基因过表达植株叶片在侵染部位有大量H2O2产生,着色较深,表明转化体能够以局部细胞的死亡来阻止病原体侵染周围的细胞。在Col-0野生型植株中,AZI1基因的表达受外源水杨酸诱导,24h后达到峰值。以上结果说明AZI1基因在拟南芥对生物胁迫因素的应答过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 azi1基因 过表达 酿酒酵母 蒜薹灰霉菌 水杨酸 H2O2
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拟南芥HyPRP蛋白AZI1在转基因烟草中的亚细胞定位及其对灰葡萄孢的抗性 被引量:2
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作者 杜改亮 高航 徐子勤 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期795-803,共9页
通过农杆菌转化法得到了整合有拟南芥AZI1基因的烟草植株,进一步利用转基因烟草分析了AZI1蛋白的亚细胞定位及其对真菌病原体的抗性特征。在上下游引物5'端分别引入NcoI和SpeI酶切位点,采用高保真耐热DNA聚合酶Pfu从拟南芥Col-0生... 通过农杆菌转化法得到了整合有拟南芥AZI1基因的烟草植株,进一步利用转基因烟草分析了AZI1蛋白的亚细胞定位及其对真菌病原体的抗性特征。在上下游引物5'端分别引入NcoI和SpeI酶切位点,采用高保真耐热DNA聚合酶Pfu从拟南芥Col-0生态型基因组DNA扩增AZI1基因的编码序列,用NcoI和SpeI对扩增片段和pCAMBIA1302质粒载体进行双酶切,通过T4DNA连接酶构建产生AZI1-GFP融合表达载体。用包含融合表达载体的农杆菌细胞转化烟草叶片,经潮霉素选择获得了完整的再生植株,并收取了T0代种子。激光共聚焦显微观察发现,AZI1蛋白主要定位于细胞表面。病原体侵染结果显示,AZI1基因能够明显提高烟草对灰葡萄孢的抗性。说明AZI1蛋白通过分泌途径被定位到细胞表面后,能够抑制真菌病原体对植物组织的侵染过程。 展开更多
关键词 azi1基因 '秦烟95' 亚细胞定位 灰葡萄孢 DAB染色 台盼蓝染色
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Salt Stress in Arabidopsis: Lipid Transfer Protein AZI1 and Its Control by Mitogen-Activated Protein Kinase MPK3 被引量:13
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作者 Andrea Pitzschke Sneha Datta Helene Persak 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期722-738,共17页
A plant's capability to cope with environmental challenges largely relies on signal transmission through mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades. In Arabidopsis thaliana, MPK3 is particularly strongly asso... A plant's capability to cope with environmental challenges largely relies on signal transmission through mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades. In Arabidopsis thaliana, MPK3 is particularly strongly associated with numerous abiotic and biotic stress responses. Identification of MPK3 substrates is a milestone towards improving stress resistance in plants. Here, we characterize AZI1, a lipid transfer protein (LTP)-related hybrid proline-rich protein (HyPRP), as a novel target of MPK3. AZI1 is phosphorylated by MPK3 in vitro. As documented by co-immunoprecipitation and bimolecular fluorescence complementation experiments, AZI1 interacts with MPK3 to form protein complexes in planta. Furthermore, null mutants of azil are hypersensitive to salt stress, while AZIl-overexpressing lines are markedly more tolerant. AZI1 overexpression in the mpk3 genetic background partially alleviates the salt-hypersensitive phenotype of this mutant, but functional MPK3 appears to be required for the full extent of AZIl-conferred robustness. Notably, this robustness does not come at the expense of normal development. Immunoblot and RT-PCR data point to a role of MPK3 as positive regulator of AZI1 abundance. 展开更多
关键词 salt stress ARABIDOPSIS MAPK MPK3 lipid transfer protein azi1 PHOSPHORYLATION in vivo interaction.
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拟南芥EARLI1亚家族基因的研究进展 被引量:1
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作者 冯欢 左佳琦 +2 位作者 谢佳恒 赵杨阳 黄萱 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1161-1168,共8页
HyPRP家族EARLI1亚家族基因能够应答生物和非生物胁迫因素,是拟南芥防御体系的重要组成部分,它们在个体生长发育过程中也具有调控作用。文中分别介绍了有关AZI1、EARLI1、A T4G12490和AT4G12500等EARLI1亚家族基因功能的研究进展,阐述... HyPRP家族EARLI1亚家族基因能够应答生物和非生物胁迫因素,是拟南芥防御体系的重要组成部分,它们在个体生长发育过程中也具有调控作用。文中分别介绍了有关AZI1、EARLI1、A T4G12490和AT4G12500等EARLI1亚家族基因功能的研究进展,阐述了它们在低温、盐、外源ABA和真菌病原体等环境和生物胁迫条件下的抗性特征。最后根据EARLI1亚家族基因的研究现状讨论和分析了它们在作物改良中的应用前景。 展开更多
关键词 azi1 EARLI1 AT4G12490 AT4G12500
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