魔芋热处理响应基因AaHSP70启动子的克隆和功能分析

以白魔芋(Amorphophallus albus)为试材,利用同源克隆法获得热处理响应基因AaHSP70.qRT-PCR结果表明:AaHSP70基因对热胁迫较敏感,41℃处理能够诱导AaHSP70在白魔芋不同器官中表达,并在1 h时表达丰度最高;利用FPNI-PCR法通过3轮步移扩增得到1062 bp的AaHSP70启动子序列.生物信息学分析表明:AaHSP70含有热胁迫响应元件HSE及多种与植物逆境应答相关的顺式作用元件.酵母单杂交试验结果和双荧光素酶系统均显示:AaHSP70启动子可与AaHSFA1,AaHSFA2c相互作用.为进一步分析AaHSP70启动子的功能,构建该启动子与GUS基因融合的植物表达载体,利用农杆菌介导法转入拟南芥,热处理后对转基因拟南芥进行GUS组织化学染色鉴定,结果显示其在根、茎、叶中均可表达,因此推测AaHSP70可能在白魔芋抗外界逆境特别是热胁迫中起着重要的作用.