连续饲喂转Cry1Ab/1Ac基因糙米对2个世代鹌鹑生长发育的影响

本试验旨在研究连续饲喂转Cry1 Ab/1 Ac基因糙米对2个世代鹌鹑生长发育的影响。选取健康的1日龄日本鹌鹑（Coturnix japonica）402羽随机分成2组,每组3个重复,每个重复67羽,雌雄混养。2组分别为转基因组和非转基因组,分别饲喂含转Cry1 Ab/1 Ac基因或非转基因糙米的饲粮,35日龄时从各组中分别挑选健康的体重相近的鹌鹑72羽,平均分成6个重复,每个重复3羽雄性9羽雌性,分别继续饲喂2种饲粮,饲养至91日龄。2个组85-91日龄所产的蛋分别孵化,孵化出的子代鹌鹑分别继续饲喂2种饲粮,分组及饲养管理与亲代相同。结果表明：转基因糙米中的粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维等营养成分的含量与非转基因糙米没有显著差异（P〉0.05）;与非转基因组相比,转基因组亲代和子代鹌鹑的平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著差异（P〉0.05）;2代鹌鹑的肝脏、心脏、睾丸和卵巢等器官指数也与非转基因组无显著差异（P〉0.05）。结果表明,连续2个世代采食含转Cry1 Ab/1 Ac基因糙米的饲粮对日本鹌鹑的生长发育没有显著影响。

Cry1Ab/1Ac基因在转基因玉米中的表达研究

本研究通过人工合成获得了密码子的优化Bt杀虫蛋白基因Cry1Ab/1Ac,并以草甘膦抗性基因epsps为标记基因,构建了高效表达载体pBAC174,并用基因枪法将表达载体pBAC174导入受体材料幼胚愈伤组织。对轰击后的愈伤组织进行筛选、分化和植株再生,获得40个草甘膦抗性的玉米再生植株。经PCR和Southern杂交检测表明,外源Cry1Ab/1Ac基因已经整合到玉米的基因组中。转基因植株叶片蛋白粗提物用BT-Cry1Ab/1Ac金标免疫检测试纸条检测,结果表明Bt基因在部分转基因植株后代获得了表达。本研究为进一步利用Cry1Ab/1Ac基因进行玉米抗虫育种奠定了基础。

血清自身免疫性抗体联合检测在1型糖尿病诊断中的价值研究

目的研究血清谷氨酸脱羧酶抗体(Glutamate Decarboxylase Antibodies,GAD-Ab)、胰岛素自身抗体(Insulin Autoantibodies,IAA)、胰岛细胞抗体(Islet cell antibodies,ICA)联合检测在1型糖尿病(Type 1 Diabetes Mellitus,T1DM)诊断中的价值。方法回顾性选取2022年1月—2023年6月烟台市莱阳中心医院诊疗的40例T1DM患者及40名同期来医院体检的健康人群的临床资料,分别设为T1DM组和正常对照组,两组均进行血清GAD-Ab、IAA、ICA检查,研究血清GAD-Ab、IAA、ICA三项联合检测在1型糖尿病诊断中的价值。结果T1DM组血清GAD-Ab、IAA、ICA水平与正常对照组比较明显增高,差异有统计学意义(P均<0.05);三项抗体联合检测诊断T1DM的敏感性(95.00%)、准确性(93.75%)及阴性预测值(94.87)较单项检测明显提高,差异有统计学意义(χ^(2)=24.126,13.628,12.543,P均<0.05)。结论血清GAD-Ab、IAA、ICA三项联合检测明显提高1型糖尿病诊断价值。

转Bt-cry1 Ab玉米花粉对异色瓢虫生长发育及体内三种代谢酶活性的影响

用转Bt-cry1 Ab基因玉米花粉饲喂异色瓢虫,初步研究了转基因玉米花粉对瓢虫的影响。结果显示,异色瓢虫取食混有适量蚜虫的转Bt-cry1 Ab基因玉米花粉时与取食混有适量蚜虫的非转基因亲本玉米花粉时相比,各虫态发育历期没有显著差异;取食转Bt-cry1 Ab基因玉米花粉对异色瓢虫的体重增加无明显影响。多数龄期内取食转基因玉米花粉的异色瓢虫体内的α-乙酸萘酯酶活性、乙酰胆碱酯酶活性以及谷光甘肽-S-转移酶活性与对照组相比没有显著差异。用酶联免疫(ELISA)方法在取食转Bt-cry1Ab基因玉米花粉的瓢虫体内未检测到Bt杀虫蛋白。转Bt-cry1Ab玉米花粉对异色瓢虫生长发育没有显著负面影响,初步证明Bt玉米MON810花粉对异色瓢虫是安全的。

ABS树脂抗氧剂YHK-1复配条件的选择

抗氧剂YHK - 1主要由酚类和亚磷酸酯类抗氧剂组成 ,能有效抑制聚合物氧化 ,被广泛用于ABS树脂中。由于它是复合型抗氧剂 ,复配条件的选择很重要。通过一系列的实验 ,总结出最佳复配条件为温度 90～ 10 0℃ ,时间 1 5～ 2 5h ,搅拌速度

联合检测GAD-Ab、ICA对1型糖尿病的诊断和预测价值

研究了儿童1型糖尿病(T1DM)(n=18),LADA(n=23),疑似LADA(n=46),T1DM患者的1级亲属(n=34)和正常对照(n=30),结果显示:联合分析ELISA检测的GAD-Ab和免疫组化检测的IC-Ab,有助于T1DM和LADA的诊断和筛查。

抗氧剂YHK-1在ABS树脂中的性能评价

抗氧剂YHK-1由酚类抗氧剂、亚磷酸酯类抗氧剂及特殊添加剂组成。将自制抗氧剂YHK-1与进口同类产品进行比较,发现YHK-1抗氧剂能够更有效地抑制聚合物氧化,完全可替代进口产品而应用于ABS树脂中。

单克隆抗体TNT-1的纯化、F(ab)_2片段化及其免疫活性的测定

TNT-1是-种鼠IgG_2a单抗,已用于肿瘤病人的临床试验。本文将介绍从腹水中进一步纯化TNT-1的方法及制备其F(ah′)_2片段的条件。经Protein A亲和柱层析从小鼠腹水中提取出的lgG,再通过阳离子交换树脂柱Mono S,用缓冲液A(20 mmol/L MES,pH6.3)和缓冲液B(lmol/L NaCI),在快速蛋白液相色层(FPLC)系统上进行梯度洗脱分离,可制得纯净的TNT-1抗体,其免疫活性可达80％～85％;经纯化的TNT-1,用胃蛋白酶消化,制备F(ah′)~2片段,其消化条件是:酶的用量为抗体的1/250,pH3.8,温度37℃,时间4～5 /小时。消化后的混合物,用protein A亲和结合法除去完整的IgG,其余的F(ab′)_2和Fab、Fc等片段,在Mono S柱上,按前述的条件分离。产物TNT-1或F(ah′)_2的免疫活性,用标记抗体和过量抗原结合的方法测定;分高纯化过程中的洗脱峰,用间接免疫荧光技术监测其活性。结果戾明,TNR-1的F(ab′)_2片段的制备是成功的,色层分离纯化的方法简便而有效,并已成功地应用于批量生产。

线性星际分子XC_(2n+1)N(X=CN,H,F,Cl,Li;n=0～5)的结构和振动频率的ab initio研究

应用量子化学从头计算方法，在ＨＦ／６－３１Ｇ＊水平上，优化ＸＣ２ｎ＋１Ｎ（Ｘ＝ＣＮ，Ｈ，Ｆ，Ｃｌ，Ｌｉ；ｎ＝０～５）分子的几何构型，得出了它们的分子总能量，所有键长以及各原子上的电荷分布及振动频率等．计算结果表明，ＸＣ２ｎ＋１Ｎ类分子的总能量呈现同系线性规律，分子内的键长及各原子上的电荷分布都呈现出一定规律性．从频率数据判断：对于ＸＣ２ｎ＋１Ｎ类分子，当Ｘ＝ＣＮ，Ｈ，Ｆ，Ｃｌ时分子稳定，当Ｘ＝Ｌｉ时。

3-AB对脓毒症大鼠心肌细胞PARP-1、Bcl-2表达的影响

目的探讨PARP-1抑制剂3-AB对脓毒症大鼠心肌细胞PARP-1、Bcl-2表达的影响。方法成年健康SD大鼠30只，随机分为3组：假手术对照组、模型组和3-AB治疗组。采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症大鼠模型，存活至48h取材。用免疫组织化学sP法和图像分析技术检测心肌PARP-1、Bcl-2的表达，ELISA法检测血清中PARP-1、Bcl-2的含量。结果模型组心肌PARP-1阳性细胞灰度值、血清中的OD值（opticaldensity）均较假手术组升高，而治疗组较模型组下降，差异有统计学意义，P〈0．05；而Bcl-2的变化趋势正好相反，模型组心肌Bcl-2阳性细胞灰度值、血清中的OD值均较假手术组降低，3-AB治疗后其水平较模型组升高，P〈0．05。结论PARP-1抑制剂3-AB可上调脓毒症大鼠大心肌Bcl-2的表达，对凋亡有-定的抑制作用。

植物乳杆菌AB-1降解亚硝酸钠的条件优化

以植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AB-1为目标菌株,考查了培养基中亚硝酸钠(Na NO2)含量、初始p H、培养温度、接种量及培养时间对其降解Na NO2的影响。在此基础上,利用响应面试验分析了培养温度、接种量和培养时间的交互作用对该菌株降解Na NO2的影响。结果表明,培养温度、接种量及培养时间对菌株AB-1降解Na NO2具有明显影响,建立的响应面方程可以实现对该菌株降解Na NO2条件的优化。验证试验结果显示,当MRS培养基中Na NO2含量为150 mg/L、初始p H值为6.5、培养温度为32℃、接种量为2.7%,培养时间为28 h时,植物乳杆菌AB-1对Na NO2的降解率为97.94%,与预测值(98.19%)几乎一致。

化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响

目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。

转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育及其捕食功能的影响

【目的】为探究转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育及其捕食功能的影响。【方法】以转Cry1Ac/1Ab基因棉与其亲本常规棉为实验材料,利用取食不同棉花品种叶片的棉铃虫饲喂异色瓢虫幼虫。【结果】与常规亲本棉相比,取食饲喂转基因棉花叶片的初孵棉铃虫幼虫的异色瓢虫幼虫从1龄发育至化蛹期时间延长0.77 d,但差异不显著;除1龄幼虫体重增加(0.0773 mg)外,其余各龄期幼虫体重均有所下降,但差异均不显著;异色瓢虫1、2、3、4龄幼虫对初孵棉铃虫捕食量均随棉铃虫密度的增加而增加,捕食功能反应均符合HollingⅡ圆盘方程。【结论】转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育无显著影响,饲喂取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花的棉铃虫对异色瓢虫捕食功能无显著差异。

IRAK-1表达水平与COPD大鼠PASMCs分泌PDGF-AB和IL-6的相关性研究

目的:探讨白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK-1)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺动脉平滑肌细胞(α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),PASMCs)分泌血小板源性生长因子AB(PDGF-AB)和白细胞介素6(IL-6)的相关性。方法:构建COPD大鼠模型,HE染色观察肺组织病理学变化,图像分析法测定远端肺动脉管壁厚度占动脉外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)。消化、分离和纯化COPD大鼠远端PASMCs,并采用特异性抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体进行细胞免疫荧光鉴定大鼠PASMCs。将COPD大鼠PASMCs随机分为对照组(不进行干预)、脂多糖(LPS)组(终浓度为1 mg/L)、IRAK-1/4抑制剂组(终浓度为10μmol/L)和LPS+IRAK-1/4抑制剂组(IRAK-1/4抑制剂终浓度为10μmol/L,预处理30 min后加入LPS,终浓度为1 mg/L),采用Western blot检测各组PASMCs中p-IRAK-1和IRAK-1的蛋白水平;ELISA方法检测各组PASMCs上清液中PDGF-AB和IL-6的浓度。结果:COPD模型组WT%和WA%较空白对照组升高(P<0.01)。光学显微镜下COPD大鼠PASMCs呈梭形,荧光镜下可见胞质α-SMA蛋白染成红色。与对照组相比,LPS组p-IRAK-1蛋白表达水平及PDGF-AB和IL-6的含量升高(P<0.05);与LPS组相比,LPS+IRAK-1/4抑制剂组p-IRAK-1的蛋白水平及PDGF-AB和IL-6的含量明显降低(P<0.05)。IRAK-1磷酸化水平与细胞上清液中PDGF-AB和IL-6的浓度呈正相关。结论:IRAK-1参与COPD大鼠PASMCs分泌PDGF-AB和IL-6的调控。这为COPD的早期干预提供了新依据。

SiO分子的基态(X^1Σ^+)势能函数的研究

运用Gaussian03程序,使用从头算方法计算了S iO分子基态(X1Σ+)的平衡结构和离解能,利用单点能计算的结果,采用正规方程组拟合Murrell-Sorb ie函数,得出S iO分子的基态分析势能函数,并且计算出S iO分子的光谱常数ωe、ωeeχ、Be和αe的值,计算结果与实验值符合得较好.

5-硝基-1-氢-四唑衍生物热分解机理的从头算分子动力学模拟及密度泛函理论研究

应用从头算分子动力学模拟方法以及密度泛函理论对 5 硝基 1 氢 四唑衍生物的热解机理进行了研究 .报道了三条相关的反应途径 ,包括直接开环途径和质子转移途径 .其中N1-N2 键断裂直接开环的机理与文献报道一致 .而涉及质子转移的反应途径则是一个新的发现 .另一条关于C5-N4 键断裂直接开环的途径由于能垒较高 。

1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体的量子化学研究

采用量子化学的从头算(abinitio)和密度泛函(DFT)方法,在6311++G计算水平上研究了离子液体1乙基3甲基咪唑四氟硼酸盐在气相模型下的离子对结构.经振动分析得到了离子对的红外谱,并利用自然键轨道(NBO)分析了阴阳离子与离子对的电荷布居差异.计算结果表明,离子对中存在氢键等弱相互作用.运用Counterpoise方法消除基组重叠误差,得到阴阳离子间的相互作用能为346.78kJ/mol.

B、Al、La同晶取代EU-1分子筛酸性的密度泛函理论计算

采用量子力学的密度泛函理论(DFT)方法,研究了B、Al、La同晶取代EU-1分子筛骨架的Si后可能的存在位置,确定了与平衡电荷质子结合的骨架O位置,考察了杂原子B、La进入骨架后对EU-1分子筛Brnsted酸(B酸)强度的影响。计算所采用的26T簇模型均在DFT的BLYP方法和DNP基组下完成。对合成的分子筛进行了NH3-TPD表征。能量分析表明,Al和B取代EU-1分子筛骨架最可能的位置为T(1)、T(2)、T(3)、T(6)、T(7)和T(8)位,La取代最可能的位置为T(1)、T(2)和T(8)位。B酸落位点分别为Al(1)-O(12)H-Si(2)和Al(1)-O(13)H-Si(6)位,B(8)-O(29)H-Si(10)位,La(1)-O(12)H-Si(2)、La(1)-O(13)H-Si(6)、La(2)-O(12)H-Si(1)位。与硅铝EU-1分子筛相比,B和La进入骨架会导致EU-1分子筛的B酸强度有所减弱,Al-EU-1、La-EU-1、B-EU-1三者中,Al-EU-1的B酸强度最强,B-EU-1的最弱。B和La进入EU-1分子筛骨架后,酸性减弱,弱酸量增加,理论计算与实验结果一致。

[Li…X]e^(-[1])(X=FH，OH_2，NH_3)的光电性质从头算

在MP2理论水平上采用6-311G基组系列计算了一价阴离子van der Waals复合物[Li…X]e^(-[1])(X=FH,OH_2,NH_3)的偶极矩(μ)、平均极化率(α)以及平均一阶超极化率(β),讨论了基组效应和电子相关效应对计算结果的影响,比较了价电子对复合物一阶超极化率的贡献.在MP4(SDQ)/6-311++G(2df,2pd)水平上计算得到[Li…FH]e^(-[1])的μ=2.5633 a.u.,α=1.0476×10~3 a.u.,β=1.0948×10~5 a.u.;[Li…OH_2]e^(-[1])的μ=2.3204 a.u.,α=1.2201×10~3 a.u.,β= 2.1410×10~5 a.u.;[Li…NH_3]e^(-[1])的μ=2.4687 a.u.,α=1.4817×10~3 a.u.,β=3.4040×10~5 a.u.,计算结果表明,三种一价阴离子复合物分子均具有非常大的一阶超极化率,而一个价电子对复合物的一阶超极化率的贡献超过1.0×10~5 a.u..

4-甲醛-1-甲基-1-苯基环己硅烷的从头算研究

运用从头计算法，在HF／6－31G水平上，求得4-甲醛-1-甲基-1-苯基环己硅烷的全优化几何构型和电子结构。将从头算结果与经典电子理论以及AM1和PM3半经验计算结果进行了比较和评估。