甲基磺酸乙酯(EMS)对黄蜀葵植株表型性状和花黄酮类成分含量的影响及优株筛选

以甲基磺酸乙酯(EMS)为化学诱变剂,对体积分数1.0%(T1)、1.2%(T2)、1.4%(T3)、1.6%(T4)EMS诱变处理后黄蜀葵〔Abelmoschus manihot(Linn.)Medik.〕植株表型性状和花黄酮类成分含量差异进行比较,对单株花产量和花黄酮类成分含量与植株表型性状进行相关性分析,并基于单株花总黄酮产量进行优株筛选。结果表明:与对照组(体积分数0.0%EMS)相比,EMS处理组黄蜀葵株型变为接近丛生或丛生,叶裂片细长,花冠较小。4个EMS处理组黄蜀葵的株高较对照组显著(P<0.05)降低,茎粗与对照组差异不显著;随着EMS体积分数增加,叶片长、叶片宽、叶裂片长、叶裂片宽总体上先降低后升高,其中,体积分数1.4%和1.6%EMS处理组的叶片长、叶片宽、叶裂片长、叶裂片宽均高于或显著高于对照组;4个EMS处理组的花直径和花瓣宽低于或显著低于对照组,花瓣长和始花节数与对照组差异不显著,但体积分数1.4%和1.6%EMS处理组的单株开花数和单株花产量显著高于对照组。与对照组相比,4个EMS处理组花中6个黄酮类成分及总黄酮含量多无显著变化,仅体积分数1.0%和1.4%EMS处理组的棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量以及体积分数1.0%EMS处理组的槲皮素-3′-O-葡萄糖苷含量显著升高。相关性分析结果显示:单株花产量与茎粗、叶片长、叶裂片长、始花节数和蒴果长显著正相关,与单株开花数极显著(P<0.01)正相关,而花中6个黄酮类成分和总黄酮含量与植株表型性状多无显著相关性。优株筛选结果显示:编号T3-3、T4-5、T3-1和T1-3植株的单株花总黄酮产量均在65 g以上,排名前4。总体来看,体积分数1.4%EMS的诱变效果最佳;并且,编号T3-3、T4-5、T3-1和T1-3单株可作为黄蜀葵高花总黄酮产量的优株。

黄蜀葵多糖的分析

采用热水浸提 -乙醇沉淀、鞣酸除蛋白、过氧化氢和活性炭脱色、微晶纤维素柱色谱分离纯化工艺制备黄蜀葵根和茎中的多糖 ;用苯酚 -硫酸比色法测定该多糖的糖含量为93.8% ;薄层色谱法鉴定黄蜀葵多糖是由半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖组成 ;红外光谱法鉴定黄蜀葵多糖的糖键是α_吡喃糖苷键 ,且紫外扫描无核酸和蛋白特征吸收峰 ;比旋光度[α]D25 为 +122.2°～ +123.0°(0.3 ,H2O)。

野芙蓉叶片解剖结构与其抗旱性关系的研究

利用石蜡切片法对野芙蓉[Abelmoschus manihot(Linn.)Medicus]的叶片进行形态解剖学研究。结果表明:野芙蓉叶片的解剖结构与其抗旱性之间有着密切的相关性,与同科的植物苘麻和蜀葵相比较也证实了其抗旱的结构特点。

黄蜀葵花中金丝桃苷及其异构体的分离纯化

应用聚酰胺柱层析法和高效制备液相色谱法研究黄蜀葵花(Abelmoschus manihot(L.)Medicus)中金丝桃苷及其异构体分离制备方法。结果表明:黄蜀葵花粗提物经聚酰胺柱层析分离后,50%乙醇洗脱液中可得到金丝桃苷及其异构体的混合物,将混合物冻干后经高效制备液相色谱分离,高效制备液相柱为Calesil A-120(250 mm×21.2 mm,10μm),流动相为乙腈-0.2%乙酸(15∶85,V/V),上样量20.0 mg,流速25.0 m L/min,柱温30℃,检测波长280 nm,得到纯度分布在99%和97%以上的两种纯物质。经核磁共振及质谱分析,鉴定其分别为金丝桃苷和异槲皮苷,二者互为立体异构体。

黄蜀葵花总黄酮抗氧化及抗抑郁作用研究

对黄蜀葵花总黄酮抗氧化和抗抑郁作用进行研究。采用小鼠强迫游泳实验(FST)、悬尾实验(TST)、旷场实验(OFT)作为行为学实验模型考察黄蜀葵花总黄酮的抗抑郁作用;利用试剂盒检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)的含量考察黄蜀葵花总黄酮体内抗氧化作用;采用高效液相色谱法测定小鼠血清中色氨酸(Trp)、犬尿氨酸(Kyn)的含量及比值。结果表明:与普通组相比,黄蜀葵花总黄酮各组有效缩短了小鼠TST、FST的静止时间;黄蜀葵花总黄酮高剂量组(200 mg/kg)能有效降低小鼠血清中MDA质量含量,改善小鼠血清中SOD活力,提高小鼠血清中Trp/Kyn的比值。黄蜀葵花黄酮具有抗抑郁作用,其作用机制可能与黄酮的抗氧化作用、色氨酸与犬尿氨酸的代谢途径有关。

黄蜀葵花中5种黄酮类化合物对肠道L细胞AGEs/RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的调节作用

目的探讨黄蜀葵花中5种黄酮类化合物对肠道L细胞AGEs/RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路的调节作用。方法200 mg·L^(-1)AGEs作用肠道于L细胞株GLUTag细胞,Western blot检测细胞中RAGE、p22^(Phox)、p47^(Phox)、p53、Bax蛋白的相对表达量,ELISA法检测TNF-α、IL-1、IL-6、caspase-3、caspase-9的含量。实验分为7组:空白对照组(NG)、模型组(AGEs)、槲皮素组(QT)、异槲皮苷组(IQT)、金丝桃苷组(HY)、槲皮素-3'-O-葡萄糖苷组(QG)、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷组(GG)。NG细胞培养于DMEM低糖培养基中;AGEs细胞培养于含200 mg·L^(-1)AGEs的DMEM低糖培养基中;给药组细胞分别培养于含50μmol·L^(-1)各黄酮单体及含200 mg·L^(-1)AGEs的DMEM低糖培养基中。各组细胞经药物干预24 h后,Western blot检测细胞中RAGE、p22^(Phox)、p47^(Phox)、p53、Bax、p-p38MAPK、NF-κB蛋白的相对表达量,ELISA法检测TNF-α、IL-1、IL-6的含量及caspase-3、caspase-9的活性。结果模型组细胞中RAGE、p22^(Phox)、p47^(Phox)、Bax、caspase-3、caspase-9、Phospho-p38MAPK、NF-κB相对表达量及细胞上清液中TNF-α、IL-1、IL-6的分泌量明显上调(P<0.01),p53相对表达量明显下调(P<0.01)。50μmol·L^(-1)槲皮素、异槲皮苷、金丝桃苷、槲皮素-3'-O-葡萄糖苷、棉皮素-8-O-葡萄糖醛酸苷分别给药后,各蛋白的相对表达量及炎症因子的分泌量接近正常组。结论黄属葵花中5种黄酮类化合物能明显抑制肠道L细胞AGEs/RAGE/p38MAPK/NF-κB信号通路。

基于全局非靶向代谢组学对黄蜀葵不同部位成分的差异分析

目的:通过代谢组学分析黄蜀葵叶、茎、根、花中主要化学成分及其相对含量,为提高黄蜀葵的药用和经济价值提供科学基础。方法:使用超高效液相色谱-质谱联用法对黄蜀葵各部位代谢物进行定性分析,通过全局非靶向代谢组学方法分析比较黄蜀葵不同部位主要代谢物的相对含量。结果:黄蜀葵主要功效成分黄酮类物质在叶、茎、根中也有大量分布,其中标志性化合物金丝桃苷在黄蜀葵叶中的相对含量最高。其他类活性成分,如生物碱、香豆素、萜类、氨基酸等在黄蜀葵叶中的相对含量也较高。结论:除了黄蜀葵花,其他部位如叶、茎、根中也含有较多的活性成分,在提取利用其中的活性成分时可以考虑全株提取或有针对性地部位提取,以提高黄蜀葵的药用及经济价值,减少资源浪费。

中药材黄蜀葵的研究现状及存在问题

黄蜀葵是一种传统的药食两用中药材,具有清热、利湿、消炎、止痛等功效。本文综述了黄蜀葵近年来在化学成分、药理作用等方面的研究现状并提出存在的问题和展望黄蜀葵未来的发展前景。

金花葵根部化学成分研究

目的研究金花葵根部的化学成分。方法采用反复硅胶、ODS、Sephadex LH-20等柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和核磁共振等波谱技术对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。结果从金花葵根的醇提物中分离得到8个单体化合物,分别鉴定为臭矢菜素C(cleomiscosin C,1)、东莨菪亭(scopoletin,2)、香豆酸(coumaric acid,3)、对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde,4)、N-cis-阿魏酸酪酰胺(N-cis-feruloyltyramine,5)、N-trans-阿魏酸酪酰胺(N-trans-feruloyltyramine,6)、尿嘧啶(uracil,7)、腺嘌呤核苷(adenosine,8)。结论化合物3、5为该属植物中首次分离得到;化合物1、2、4、6、7、8为该种植物中首次分离得到。

黄蜀葵查尔酮合成酶基因AmCHS克隆及序列分析

从黄蜀葵(Abelmoschus manihot)花瓣中通过简并引物克隆得到查尔酮合成酶基因cDNA核心序列,根据核心序列设计特异引物,再应用5′RACE和3′RACE技术分别扩增该序列的5′末端和3′末端序列,最后通过序列拼接获得黄蜀葵查尔酮合成酶基因(AmCHS)cDNA全序列.序列分析结果表明AmCHS cDNA编码区长1170 bp,编码389个氨基酸.其氨基酸序列与其它已知高等植物CHS基因具有很高的同源性,并且包含了CHS具有的活性位点和催化位点等保守性位点.

黄蜀葵花中4种黄酮类成分体内整合药动学研究

目的建立黄蜀葵花提取物中4种黄酮类成分在大鼠血浆中的HPLC测定方法，考察4种成分在大鼠体内各自的和整合的药动学特性，并分别计算绝对生物利用度。方法大鼠ig和iv给予黄蜀葵花提取物浸膏后，采用HPLC法，测定其中4种黄酮类成分金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-葡萄糖醛酸、槲皮素-3＇-葡萄糖苷不同时间间隔的血药浓度，运用DAS2．0药动学程序计算各成分的药动学参数，利用各成分曲线下面积（AUC0-∞）百分率作为自定义权重系数，计算黄蜀葵花提取物大鼠体内综合血药浓度，并建立整合药动学研究模型，进一步估算整合药动学参数。根据药时曲线的AUC面积计算绝对生物利用度。结果4种黄酮类成分的线性范围为0．1～8μg／mL（r〉O．99），定量限为0．1μ／mL，回收率在70％以上，日内、日间RSD均低于15％。适或iv给药后4种成分的药动学参数差异很大，4种成分及整合后绝对生物利用度分别是：12．9％、10．8％、2．2％、10．2％、5．9％。结论该法简便、灵敏、准确，为黄蜀葵花的生物利用度研究以及建立临床合理的给药方案奠定了基础。黄蜀葵花中4种黄酮类成分在大鼠体内能快速分布并消除，两种给药途径的体内药动学过程不同，基于4种成分的AUC0-∞自定义权重系数的整合药动学研究模型符合经典药动学模型特征，所获参数能够最大程度上表征中药的整体处置规律，为建立符合中医药特点的中药多组分整合药动学新方法作一尝试。

黄蜀葵花化学成分研究

目的研究黄蜀葵Abelmoschus manihot花的化学成分。方法采用色谱方法分离纯化,并经过波谱方法和理化性质鉴定化合物结构。结果从黄蜀葵花的90%甲醇提取物中分离得到17个化合物,鉴定出黄酮及黄酮苷类化合物11个:槲皮素(1)、金丝桃苷(2)、杨梅素-3′-O-β-D-葡萄糖苷(3)、槲皮素-3′-葡萄糖苷(4)、8-(2″-pyrrolidinone-5-yl)-quercetin(5)、杨梅素(6)、floramanoside F(7)、isomyricitrin(8)、dihydromyricetin(9)、芦丁(10)、3-O-kaempferol-3-O-acetyl-6-O-(p-coumaroyl)-α-D-glucopyranoside(11);核苷类化合物4个:腺嘌呤核苷(12)、5′-deoxy-5′-methylsulphinyl adenosine(13)、尿嘧啶(14)、烟酰胺(15);及有机酸类2个(E)-9-octadecenoic acid(16)、没食子酸(17)。结论化合物5、9、11~14为首次从锦葵科植物中分离得到,化合物15、16首次从黄蜀葵中分离得到。