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题名Abl-PTK酪氨酸激酶区基因的克隆与表达
被引量:4
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作者
金玉霞
曲章义
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机构
哈尔滨医科大学微生物学教研室
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出处
《哈尔滨医科大学学报》
CAS
2002年第3期177-179,共3页
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基金
国家自然科学基金资助项目 (3 9670 817)
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文摘
目的 克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法 从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS PAGE分析。结果 经酶切和诱导表达鉴定 ,重组质粒pGEX4T 2 PTK构建成功 ,并高效表达了 5 8KD的GST PTK融合蛋白。结论 PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中 ,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性 ,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。
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关键词
酪氨酸激酶
abl-ptk
基因克隆
基因表达
ptk活性
ptk酶抑制剂
V-abl癌基因
淋巴瘤
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Keywords
abl ptk
cloning
expression
ptk activity
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分类号
R733
[医药卫生—肿瘤]
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题名PTK重组质粒的构建与表达
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作者
金玉霞
曲章义
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机构
浙江大学附属医院嘉兴市妇幼保健院
哈尔滨医科大学微生物学教研室
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出处
《上海生物医学工程》
CAS
2006年第1期31-34,共4页
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文摘
目的构建并表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS-PAGE分析。结果经酶切和诱导表达鉴定,重组质粒pGEX4T-2-PTK构建成功,并高效表达了58KD的GST-PTK融合蛋白。结论PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。
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关键词
ptk
表达
ptk活性
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Keywords
abl - ptk cloning expression ptk activity
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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