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Abl-PTK酪氨酸激酶区基因的克隆与表达 被引量:4
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作者 金玉霞 曲章义 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2002年第3期177-179,共3页
目的 克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法 从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经I... 目的 克隆、表达出PTK重组蛋白 ,以鉴定酪氨酸激酶 (PTK)的活性 ,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法 从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl PTK使其连接到表达载体pGEX4T 2上 ,转化大肠杆菌DH5a ,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS PAGE分析。结果 经酶切和诱导表达鉴定 ,重组质粒pGEX4T 2 PTK构建成功 ,并高效表达了 5 8KD的GST PTK融合蛋白。结论 PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中 ,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性 ,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 酪氨酸激酶 abl-ptk 基因克隆 基因表达 ptk活性 ptk酶抑制剂 V-abl癌基因 淋巴瘤
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PTK重组质粒的构建与表达
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作者 金玉霞 曲章义 《上海生物医学工程》 CAS 2006年第1期31-34,共4页
目的构建并表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱... 目的构建并表达出PTK重组蛋白,以鉴定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,筛选酪氨酸激酶的抑制剂。方法从PTK重组克隆载体上切下目的基因片段Abl-PTK使其连接到表达载体pGEX4T-2上,转化大肠杆菌DH5a,筛选鉴定出正确的转化子。转化菌株经IPTG诱导后进行表达并进行SDS-PAGE分析。结果经酶切和诱导表达鉴定,重组质粒pGEX4T-2-PTK构建成功,并高效表达了58KD的GST-PTK融合蛋白。结论PTK基因被成功地重组至融合蛋白表达载体中,并在大肠杆菌中获得高效表达。该研究为进一步纯化、鉴定PTK的活性,筛选PTK的抑制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 ptk 表达 ptk活性
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