龙眼种质资源的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对51份龙眼种质资源进行遗传多样性和聚类分析.从100条内部简单重复序列(ISSR)引物中筛选出12条多态性好的引物,共扩增出110个可重复多态性位点,多态性条带比例为64.1%.聚类结果将51份样品分为中国龙眼和泰国龙眼两大品种群,其中的中国龙眼品种群分为7组.结果表明,龙眼种质资源具有遗传多样性.

授粉方式与疏果时期对焦核龙眼的影响

通过去雄花套袋、自花授粉、自然异花授粉,不同时期疏果,以及花粉萌发力的测定,研究了闽焦64-1、闽焦64-2的座果和焦核率情况。结果表明:焦核品种的花粉大部分败育,花粉萌芽率均低于大核品种;焦核龙眼无单性结实特性,异花授粉是其座果所必需的;在并粒期与关公刀粒期疏大果有利于提高焦核率。

焦核与大核龙眼雌配子体发育、授粉受精及早期胚胎发育的比较研究

利用人工授粉,采用压片法对大核龙眼‘九月乌’和焦核龙眼‘闽焦64-1’、‘闽焦64-2’、‘白核’等的自交与杂交后花粉管的生长特性进行研究,同时应用常规石蜡切片技术对大核与焦核龙眼的雌配子体以及合子胚早期发育进行观察。结果表明,龙眼胚珠在单核胚囊形成前就开始败育,且焦核品种(系)的败育率显著高于大核品种。不同亲本组合的授粉率存在差异,所有授粉组合在授粉36～48 h后均能观察到1个花粉管生长并进入胚囊受精。焦核品种(系)的胚胎在谢花后10 d开始败育,且败育率明显高于大核品种。受精是龙眼子房发育的首要条件,胚珠败育的雌蕊在谢花后10 d不膨大,不能发育形成焦核果实。谢花后10～30 d的早期胚胎败育是形成焦核龙眼的主要原因。焦核品种‘白核’胚乳具有成胚能力。约有24%的‘闽焦64-1’胚珠在胚胎发育过程中,其助细胞、合点端细胞及胚乳发生异常,这可能与早期胚胎败育有关。

植物生长调节剂诱导龙眼果实无核化效应

对在福建主栽的大核龙眼品种‘乌龙岭’进行了植物生长调节剂赤霉素(GA3)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、2,4,5-三氯苯氧丙酸(2,4,5-TP)、多效唑(PP333)和青鲜素(MH)等诱导果实无核化的试验。结果表明:5种植物生长调节剂均在不同程度上诱导龙眼果实形成焦核和小核果;6-BA和MH是效果较好的龙眼果实无核化诱导剂;效果最好的两个处理分别为6-BA(100 mg/L)+CPPU(30 mg/L)和MH(800 mg/L)+CPPU(30 mg/L),其果实核重分别比对照减少38.5%和38.0%,单果重分别为9.77 g和8.42 g,可溶性固形物分别为18.57%和18.23%,小核率分别达62.2%和83.3%。

焦核与大核龙眼花粉活力和柱头可授性研究

以焦核龙眼‘闽焦64-2’、‘白核’、大核龙眼‘九月乌’为材料，采用离体萌发法，研究了萌发时间、光照、蔗糖和硼酸浓度对花粉活力的影响，并采用联苯胺-过氧化氢测定法研究柱头可授性。结果表明：3个龙眼品种花粉萌发率随时间延长变化不同，‘闽焦64-2’和‘白核’的花粉活力低于‘九月乌’；光照能显著提高‘闽焦64-2’的花粉萌发率，而对另外2个品种无显著影响；3个品种适宜的蔗糖浓度均为5％～10％，适宜的硼酸浓度不同，分别为50～100、50～200和100～200 mg ？ L -1；3个品种开花当天柱头都具有可授性，可授期均为6 d 。

不同类型龙眼种子发育过程中内源激素含量变化

以焦核龙眼品种白核、闽焦64-1、闽焦64-2和大核品种九月乌为试材,研究了龙眼种子早期发育过程中内源激素含量的变化。结果表明,龙眼种子发育前期大量的GA3被合成与积累,GA3含量随着种子发育逐渐下降。九月乌的IAA含量在花后40 d达到最高,且高于3个焦核龙眼品种。九月乌(IAA+GA3)/ABA比值在花后30～40 d基本不变,而3个焦核品种呈现出急剧下降的趋势,花后40～60 d九月乌的(IAA+GA3)/ABA比值先降低后上升,而3个焦核品种均在上升。由此可推测焦核龙眼落果主要受到IAA和ABA的影响,焦核龙眼早期果实发育IAA含量升高将减少焦核果的落果,有利于焦核率的提升。

焦核龙眼种子败育的cDNA-AFLP分析

采用cDNA-AFLP技术对龙眼(Dimocarpus longan Lour.)正常和败育的种子进行了差异表达分析,并对差异明显的片段进行回收、克隆、测序,以及利用NCBI中的BLAST数据库已知序列进行同源性比对。结果表明:在11条重复性较好的差异片段中有3个Transcript-derived fragments(TDFs)分别与Ca2+-ATP酶、纤维素酶、质体ATP/ADP转运蛋白具有较高的相似性,其中TDF2和TDF7下调表达,TDF5上调表达,这可能影响了龙眼种子发育过程中的许多重要代谢途径,从而引起龙眼种子败育;有4个TDFs与一些hypothetical蛋白的序列相似;另有4个TDFs在蛋白数据库中未找到匹配的序列,核酸数据库中比对的结果也显示较高的E-值,说明为非同源基因。

龙眼出现严重小果现象的原因探讨

为探讨龙眼发生严重小果现象的原因，对百色市绿银果场不同坡位、坡向及不同类型发生小果现象的石硖龙眼果树进行调查研究，结果表明，在谢花期间和谢花后8d内如遇上34．1～38．1℃的高温，可能会造成已正常授粉受精的胚胎发育中断，果实严重败育，形成小果；小果现象与树体营养供需矛盾无关。生产上在开花期、谢花期以及谢花后约10d内应密切注意天气预报，如出现34℃以上的高温，应及时采取降温措施，可有效克服败育现象，减少损失。

‘白核’龙眼种子败育不同时期差异蛋白分析

以‘白核’龙眼种子为试验材料,比较两种蛋白质的提取方法,确定了酚抽法提取龙眼种子蛋白。应用蛋白质组学研究技术,分析了龙眼种子败育4个不同时期的蛋白质组变化,共发现21个差异蛋白,其中9个上调表达,12个下调表达。通过MALDI/TOF/TOF-MS/MS质谱分析和蛋白质数据库检索,共鉴定出12个差异蛋白,分别为胞质苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、磷酸甘油酸变位酶、RuBisCO大亚基结合蛋白α、β亚基、17kDHSP、抗坏血酸过氧化物酶、胞质抗坏血酸过氧化物酶、半胱氨酸蛋白酶、Des-sication-relatedprotein以及两个未知蛋白。这些鉴定出的差异蛋白质与能量和物质代谢、分子伴侣功能、自由基清除和抗氧化作用、细胞凋亡等生理过程密切相关,可能参与了龙眼种子败育过程。