低温胁迫诱导灰木相思组培苗细胞凋亡

利用显微观察和DNA凝胶电泳等技术,研究在低温胁迫诱导下灰木相思组培苗细胞的凋亡和对低温环境的耐受性.显微结构观察表明,随着温度降低,细胞核出现明显的凋亡特征,证实低温胁迫可诱导灰木相思组培苗细胞凋亡,同时灰木相思组培苗对低温的耐受性是有限的,超过某一强度时,细胞会死亡.

灰木相思离体培养体系的构建

灰木相思Acacia implexa是南方优良的多用途造林树种,但种子繁殖性状分离严重,试图通过组织培养找到新的繁育途径。通过对灰木相思成年优树幼嫩的带腋芽茎段的离体培养试验,探讨了灰木相思茎段不定芽分化、继代增殖和壮苗生根的最佳培养条件。采用正交试验对防止培养过程中出现玻璃化苗的方法进行了探讨。结果表明:适宜灰木相思不定芽诱导的培养基配方为MS(Murashige and Skoog)+1.0 mg.L-16-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.2 mg.L-1萘乙酸(NAA)+1.0 mg.L-1玉米素(ZT),适宜继代培养的培养基为改良1/2 MS(NH4+∶NO3-=1∶2)+1.0 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1NAA,适宜进行壮苗生根的培养基配方为改良1/2MS+0.1 mg.L-1NAA,移栽后成活率可达70%。

灰木相思茎段腋芽的组织培养及植株再生

用灰木相思茎段腋芽为外植体,采用在木本植物茎叶组培材料上经常采用的3种消毒方法及前人已在相思类植物营养器官组培上取得成功的3种萌芽培养基、芽增殖培养基和根诱导培养基进行对比试验,结果表明,以1/800灭菌净10min+75%酒精50s+0.1%HgCl25min的消毒效果最好,以改良MS+6-BA1.0+NAA0.2的萌芽效果最好,以MS+6-BA2.0+IBA0.2的增殖效果最好,以改良MS+IBA1.5+NAA0.4生根效果最好。

优化灰木相思组培苗蛋白质组的提取与分离技术

针对木本植物灰木相思(Acacia implexa Benth.)蛋白质分离过程中含有大量色素和酚等干扰物质的现象,本实验优化了各步实验条件。结果表明,在蛋白提取液中加入10%PVP,同时提高离心力、延长离心时间能提高可溶性蛋白得率,第一向等电聚焦24cm长的固相pH梯度胶条的最适蛋白上样量为1000μg,第二向SDS聚丙烯酰胺凝胶最适浓度为12.5%。优化后的实验配置体系提高了灰木相思组培苗总蛋白双向电泳的分辨率和重复性,建立一套适用于灰木相思组培苗蛋白质组提取与分离的方法。

寒胁迫诱导灰木相思无性系差异蛋白的表达

本实验提取寒胁迫前后的灰木相思组培苗的水溶性蛋白进行双向电泳和质谱鉴定,分析在寒胁迫条件下蛋白质组的变化。利用ImageMaster 5.0软件分析比较,经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱测定差异蛋白点的肽质量指纹图谱,通过Mascot软件查询Swiss-Prot等数据库,鉴定得到4个显著差异蛋白点,R7、R15、R20表现为上调表达,R17表现为下调表达。结果表明:在寒胁迫条件下灰木相思组培苗存在明显的蛋白质表达差异。

灰木相思组培苗移栽基质试验

文章研究了不同移栽基质对灰木相思组培苗移栽成活率的影响,结果表明:灰木相思组培苗移栽的最佳基质是红心土+泥炭土(3∶1),移栽成活率可达91%以上。

3个相思树种在福建的引种区划

以福建气象局统计的福建省各个县(市)30 a(1951—1980年)的月平均极端最低温度为参考数据,并以寒冷指数作为引种区划指标,对灰木相思、黑木相思、卷荚相思3种相思树种在福建省的引种栽培范围进行区划。结果表明,3个相思树种均适宜的引种区域为云霄县、诏安县、东山县;厦门市、龙海市、漳浦县、平和县大部分地区、漳州市、南靖市靠近县城部分地区、长泰县、安溪县东南大部分地区、南安县、晋江市、泉州市、石狮市、惠安县、平潭县为3个相思树种的一般引种区域。其它县区均不适宜引种卷荚相思,但可种植温度要求较一般的灰木相思和黑木相思树种,往北可以到闽侯县、连江县、罗源县、宁德市靠南部分地区,甚至可以尝试在福鼎、福安、霞浦、武平、连城及三明的部分地区进行引种栽培。