3例ACAN基因突变致矮小症病例家系分析及文献复习

目的:分析3例ACAN基因突异致矮小症患儿的临床特征及遗传改变。方法:收集上海交通大学医学院附属瑞金医院2018年至2020年期间收治的3例ACAN基因突变的矮小患儿的临床资料、实验室检查及基因检测结果,并进行文献复习。结果:3例患儿均有矮小家族史,临床表现均有身材矮小,1例伴有胸腰椎前屈位活动度轻度受限,未见其他系统异常,3例患儿中,年龄最大者5岁1月,骨龄与其实际年龄大致相符或稍提前,2例生长激素(growth hormone,GH)激发峰值小于10μg/L。基因检测显示3例患儿分别存在ACAN基因变异c.G1877A、c.7360_7361del及c.7038_7039insCGGTGT,其中前两者为新发现的突变,在各大数据库尚无报道。应用重组人生长激素后,3例患儿身高均有改善。回顾国内外文献发现,目前共报道120例患儿及216例亲属,其中已在人类基因数据库(The Human Gene Mutation Database,HGMD)中注册与矮小症相关的ACAN基因变异有80种,其中矮小是最主要临床表现,其次是骨骼发育异常,也可表现为仅矮小。结论:ACAN基因突变主要导致患儿身材矮小及骨骼发育异常,其骨骼临床表型多样,也可仅表现为矮小,对于矮小症特别是有矮小家族史的患儿,无论是否伴有骨骼异常,均需警惕该基因突变。

重组人生长激素改善ACAN基因变异致家族性矮小的疗效观察及文献复习

目的观察重组人生长激素(rhGH)改善ACAN基因变异致家族性矮小患者身高的疗效。方法回顾分析2个ACAN基因变异致家族性矮小家系rhGH治疗的临床资料,并检索相关文献进行分析。结果先证者1,男,4岁1个月,身高90.5 cm(-3.6 SD),体质量13.5 kg,无明显骨骼畸形;骨龄示5岁6个月龄;基因检测示ACAN基因c.5026_5027del(p.Ser 1676 Ter)杂合缺失变异;予rhGH,50μg/(kg·d)治疗,第1年身高增加13 cm(103.5 cm,-1.8 SD),至第18个月身高增加17.1 cm(107.6 cm,-1.7 SD)。先证者2,男,3岁,身高82 cm(-3.9 SD),体质量12 kg,无明显骨骼畸形;骨龄示1岁6个月龄;基因检测示ACAN基因c.1504C>T(p.R 502C)杂合错义变异;予rhGH,33μg/(kg·d)治疗,第1年身高增加12 cm(94.0 cm,-2.6 SD),至第22个月身高增加17 cm(99.0 cm,-2.68 SD)。结论ACAN基因c.5026_5027 del杂合缺失变异以及c.1504C>T错义变异可引起家族性矮小;rhGH治疗短期可有效改善ACAN基因致家族性矮小患儿的身高。

AcAn对奥克托今热稳定性的影响研究

1,9-二乙酰氧基-2,4,6,8-四硝基-2,4,6,8-四氮杂壬烷(AcAn)是奥克托今(HMX)制备过程中产生的一种主要杂质,研究AcAn对HMX热稳定性的影响具有重要意义。基于B3LYP/6-311+G**水平全优化了AcAn的几何结构,得到船式和椅式两种稳定结构;在B3P86/6-31G**水平计算了AcAn中N—NO2键的键离解能(BDE),研究发现,AcAn两端与乙酰氧基相邻的硝胺N—NO2键容易断裂。采用差热分析(DTA)技术研究了AcAn的热分解及其含量对HMX热稳定性的影响,结果表明:HMX和AcAn的相容性差,为4级;HMX安定性最好,AcAn安定性差,AcAn含量为50%时,安定性最差;HMX产品中混有AcAn,使得HMX储存热稳定性变差,使用性能也变差;当AcAn含量高于50%时,HMX产品性能变化最大。根据双等双步法推导AcAn和HMX的最概然机理函数,热分解反应机理函数为化学反应RO(n)机理,积分函数形式为g(a)=1-(1-a)1-n1-n,微分形式为f(a)=(1-a)n,n=2.

ACAN基因变异致家族性身材矮小一家系报告

目的分析家族性矮小家系的临床表型及基因变异特征。方法回顾1个采用靶向基因高通量测序结合Sanger测序技术确定致病基因的广西壮族地区家族遗传性矮小家系的临床资料。检索相关文献,总结ACAN基因变异患儿的临床表型与基因型的关系。结果患儿分别为9岁10个月和7岁的两兄弟,身材均矮小;其父母亲身高均为150 cm,非近亲婚配;叔叔和爷爷亦为矮小身材。基因测序证实两兄弟的ACAN基因12号外显子处均存在杂合变异c.6193 del C(p.Gln2065Serfs*27),均遗传自父亲。检索到英文文献11篇,包括本研究在内,在41个家系中发现33个存在ACAN基因致病性变异,包含4个来自中国患儿的变异,但未见中文文献报道。临床表现以特发性矮小最为多见,多为家族性遗传,也可散发。部分患儿还合并有骨关节炎、椎间盘突出或退化等症状。大部分患儿骨龄提前,但亦有部分正常甚至落后。予生长激素联合促性腺激素释放激素类似物推迟青春期治疗可有效改善身高。结论 ACAN基因杂合变异可导致儿童身材矮小,具显著的家系遗传特征,其临床特征与基因型不具备特征性联系。

ACAN基因变异致矮身材基因改变与临床观察

目的:分析ACAN基因变异与矮身材的关系,观察重组人生长激素(rhGH)的疗效与安全性。方法:回顾分析一例ACAN基因变异的矮身材患儿的临床资料,检索相关文献,总结ACAN基因变异与矮身材的关系,观察rhGH的疗效与安全性。结果:患儿为5岁7个月的女孩,矮身材,身高104.7 cm (−2.22 SD),其父亲身高175 cm (+0.42 SD),母亲身高163 cm (+0.47 SD),家族中均无矮身材者;无特殊面容及骨骼畸形,无第二性征发育;骨龄示7岁;基因测序示ACAN基因存在杂合变异c534C 】G (p.N178K),其父母该位点均无变异,其为自发突变。予rhGH 50 ug∙kg−1∙d−1治疗,身高第一年增长7.8 cm (112.5 cm, −1.58 SD),后予rhGH 60 ug∙kg−1∙d−1治疗8个月,身高增长4.9 cm (117.4 cm, −1.28 SD),身高由−2.22SD追至−1.28 SD;骨龄进展2.5岁。结论:骨龄提前的矮身材患儿应考虑存在ACAN基因突变;应用rhGH治疗身高明显改善。

ACAN基因突变致身材矮小和(或)骨骼发育异常患儿临床表现及生长激素治疗效果观察

目的总结ACAN基因突变致身材矮小和(或)骨骼发育异常患儿的临床表现和基因检测结果,观察重组人生长激素(rhGH)治疗的效果。方法对14例确诊ACAN基因突变致身材矮小和(或)骨骼发育异常患儿的临床资料进行回顾性分析。结果14例患儿中,13例表现为身材矮小,1例身高正常。13例身材矮小患儿中,身材比例匀称者11例;8例骨龄提前,3例骨龄与实际年龄一致,1例骨龄落后,1例(6月龄)未测;9例有身材矮小家族史,4例无家族史;7例表型除身材矮小外无其他异常,5例伴骨骼发育异常,1例伴中枢性性早熟。1例身高正常者身材匀称,无身材矮小家族史,表现为宽拇指、小下颌、桶状胸、腰椎前凸、肌张力低下及智力发育迟缓,骨龄与实际年龄一致。14患儿ACAN基因突变类型均不相同,其中13例既往未见报道。未发现基因型—表型相关性。13例身材矮小患儿中,7例接受促性腺激素释放激素类似物治疗,治疗后身高标准差积分较治疗前提高(P<0.05)。治疗过程中患儿骨龄持续进展,治疗前后预测成年身高标准差积分差异无统计学意义(P>0.05)。随访期间,患儿胰岛素样生长因子1、甲状腺功能指标、糖脂代谢指标均在正常范围。结论ACAN基因突变患儿临床表现包括身材矮小、骨骼发育异常,多数有骨龄提前和身材矮小家族史;ACAN基因突变类型多样,未发现基因型—表型相关性;多数身材矮小患儿应用rhGH治疗后身高在短期内明显改善,同时骨龄持续进展,成年身高仍然受损。

ACAN基因变异致矮身材家系临床和遗传学分析

矮小症是指身高处于同年龄、同性别正常健康儿童生长曲线第3百分位(P3)或低于平均数两个标准差,临床上以特发性矮小(idiopathic short stature, ISS)最常见,表现为均匀性身材矮小,智力发育正常,病因以遗传和环境因素占多数。随着基因检测技术的不断提高,越来越多的矮小致病基因被发现,最常见的是SHOX单倍体不足,占ISS病例的2%~3%^([1])。

ACAN基因变异致儿童矮身材的遗传学研究进展

ACAN基因编码的聚集蛋白聚糖(aggrecan)是细胞外软骨基质聚集蛋白中重要的蛋白多糖,对关节的生物力学特性以及骨骼发育至关重要。迄今为止,已有超过90个ACAN基因突变被证实与表型高度可变的综合征或非综合征性矮小相关。本文将从aggrecan结构、功能、突变-表型多样性、流行趋势、治疗等多个方面探讨其在疾病中的作用,为探讨ACAN基因变异所致儿童矮身材相关发病原因,临床诊断以及治疗等提供理论基础?

涉及ACAN基因的15q25.3q26.1缺失致家族性矮小一个家系的遗传学分析

目的探讨1个矮小家系的遗传学病因,为临床诊断及制定治疗策略提供参考。方法选取2020年7月在宁波市妇女儿童医院确诊为家族性矮小(FSS)的1例患儿及其父母、祖父母以及外祖父母为研究对象。收集先证者及其上述家系成员的临床资料,采集外周血样,提取基因组DNA,对先证者进行全外显子组测序(WES),对先证者及其父母、祖父母进行染色体微阵列分析(CMA),采用重组人生长激素(rhGH)对先证者进行治疗并评估效果。结果先证者身高为87.7 cm(-3 s),其父亲身高为152 cm(-3.39 s),母亲及祖父母身高无明显异常。WES提示先证者染色体15q25.3-q26.1区存在4.35 Mb缺失,CMA提示先证者及其父亲15号染色体长臂均存在4.342 Mb的杂合缺失[arr[hg19]15q25.3-q26.1(86828614_91170208)×1],该缺失片段涉及与矮小表型密切相关的ACAN基因。母亲及祖父母CMA检测均未见异常。上述缺失在人群数据库及相关文献中均未见报道,根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南,评估为致病性拷贝数变异。用rhGH治疗14个月后,先证者身高增加至98.5 cm(-2.07 s),疗效显著。结论涉及ACAN基因的染色体15q25.3-q26.1微缺失可能导致FSS,短期rhGH治疗可有效改善这类患儿的身高。

山羊原代软骨细胞的分离培养与鉴定研究

为探究山羊原代软骨细胞的体外分离培养和鉴定方法,本实验采用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶相结合的消化方法分离山羊原代软骨细胞。使用倒置显微镜观察并拍摄1、3、5、7 d共4个时期的细胞形态;利用血球计数板对细胞计数并绘制生长曲线;RT-qPCR法检测山羊软骨细胞标志性基因;通过甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫荧光染色法对软骨细胞进行鉴定。结果显示:细胞形态由透亮的圆点逐渐变为三角形、短梭形等形态,最终转变为体积较大,形态圆润的多边形;细胞计数结果显示,1~7 d细胞数量逐渐增加,7 d达到峰值,7~11d细胞数量逐渐减少。Acan和Col Ⅱ基因mRNA相对表达量随细胞培养时间的延长而降低,MMP13基因mRNA相对表达量逐渐升高。甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色结果均为阳性。由以上结果可知,本实验成功获得大量活力良好的山羊软骨细胞,并建立山羊软骨细胞体外分离及培养的方法,为进一步研究山羊软骨相关体外试验提供参考。

ACAN基因突变致家族性矮身材7例临床特点及基因分析

目的研究聚集蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)基因突变致家族性矮身材的临床特点及遗传学特征,并进行文献复习,以提高对该病的认识及诊断的准确性。方法回顾性分析2017年3月至2020年12月湖南省人民医院﹑中南大学湘雅二医院及柳州市妇幼保健院诊断的ACAN基因突变致家族性矮身材7例患儿的临床资料及基因检测结果。结果所有患儿均进行了全外显子测序(WES)检测,结果显示他们都具有ACAN基因的杂合突变。7例患儿分别来自4个家系,其中男性5例,女性2例,患儿均因身高增长缓慢就诊且有身材矮小家族史,病史中均无关节疼痛、关节活动受限及肿大等骨关节炎表现。其中2例有特殊面容,表现为眼距宽、鼻梁低、鼻脊塌陷、前额突出及面中部发育不良;3例有特殊体征,表现为短颈、脚趾宽大;2例有明显的骨龄提前;行脊柱全长片检查除1例有骶椎隐裂外均无异常。结论ACAN基因杂合变异可导致儿童身材矮小,且具显著的家系遗传特征,由于变异的差异部分患儿可能会伴有骨龄提前的情况及特殊的外貌和体征。

五个ACAN基因变异致身材矮小家系的临床及遗传学分析

目的分析5个ACAN基因变异致身材矮小家系的临床特征及遗传学特点。方法回顾性分析5例ACAN基因变异致身材矮小患儿的临床特征及基因检测结果,并查阅万方、中国知网(CNKI)、PubMed等数据库,结合相关文献进行总结。结果5个家系中患儿的共同临床特征为身材矮小,均为家系遗传,共检测到5种基因变异:c.6122dupT(p.Val2042Argfs*6),c.4790-4792TGG(p.Val1597del),c.630-1G>A,c.23delT及c.2026+1G>A。结论ACAN基因杂合变异患儿除了身材矮小未见其他系统受累,部分患儿短期生长激素治疗有效。

高效液相色谱-四通道紫外可见检测法测定五加皮中原儿茶酸含量

[目的]建立五加皮中原儿茶酸的含量测定方法。[方法]采用高效液相色谱-四通道紫外可见检测法,以ODSC18（柱长250 mm,内径4.6 mm,涂布厚度5μm）为色谱柱,流动相为甲醇∶磷酸二氢钠缓冲溶液（浓度0.1 mol/L）=15∶85,pH=2.5,测定五加皮中原儿茶酸的含量。四通道紫外检测的定性检测波长分别为245、260、275、290 nm;定量检测波长为260 nm。[结果]原儿茶酸在0.5~6.0 mg/L范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为99.87%,RSD为2.11%。[结论]该方法测定结果可靠,稳定易行,重复性好,可用于五加皮中原儿茶酸的含量测定。

X-5大孔树脂纯化新乌头碱和乌头总碱

目的:对影响X-5树脂分离纯化乌头总生物碱和新乌头碱的各种因素进行系统的研究,使分离工艺达到最优化。方法:以川乌总碱和新乌头碱的含量为指标,考察X-5型大孔树脂分离纯化乌头总生物碱和新乌头碱的最佳吸附及洗脱条件。结果:X-5树脂纯化乌头总生物碱和新乌头碱的最佳工艺为上样液浓度含生药1g.mL-1,药液pH 12,吸附时间为6h,7BV pH8的95%乙醇洗脱效果好。X-5树脂可重复使用5次。经X-5树脂处理乌头总碱提取率可达80%以上,终产品总生物碱纯度可达30%以上。结论:该方法能明显提高新乌头碱和乌头总碱的纯度。

现代超细粉碎技术在刺五加生产中的应用

阐述了现代超细粉碎技术基本原理及特点及其在刺五加生产中的应用,论述了在相同压力不同转速下和压缩空气压力以及破碎次数对粒度分布特性的影响。通过实验数据分析得出以下结论:破碎粒度随着压力的增大而减小,但当压力增大到一定值时,破碎粒度反而增大;随着转速的增大,破碎粒度变小;随着破碎次数的增加,粒度分布范围变窄,随后又变宽。

猪附红细胞体的形态学观察

应用光学显微镜和电子显微镜对猪附红细胞体显微结构和超微结构进行观察。结果显示,附红细胞体属典型的原核生物,多数为大小不等的球形、卵圆形、杆状等多形态生物体,直径为0.2μm^2.5μm,常在红细胞表面或血浆中单个或成团寄生。该病原无细胞壁,由单层界膜包裹着,无明显细胞器和细胞核。附红细胞体通过一些细丝连接到红细胞膜上,使红细胞膜表面出现皱褶、突起、凹陷,导致红细胞结构和功能改变。

倒卵叶五加总皂甙的抗氧化作用

目的探讨倒卵叶五加总皂甙 (SAOH)的体内外抗氧化作用。方法在体实验采用结扎左冠状动脉前降支 30min、再灌注 4 0min复制大鼠心肌缺血再灌注损伤 (IRI)的模型 ,结扎前 1 0min分别舌下静脉注射SAOH5 0mg/kg、1 0 0mg/kg ,观察SAOH对再灌注产生氧自由基 (OFR)的作用 ;体外实验采用抗坏血酸体系产生羟自由基 (·OH- )的原理 ,观察SAOH清除·OH的作用。结果SAOH能提高心肌IRI后血浆超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,减少组织丙二醛 (MDA)的生成量 ;减轻IRI后心肌细胞琥珀酸脱氢酶 (SDH)及细胞色素氧化酶 (CCO)的损伤性反应。SAOH浓度在 0 .2～ 1 .4g/L时体外·OH- 清除率为38.5 %～ 1 0 0 % ,且呈量效关系 (r=0 .91 )。结论SAOH具有抗氧化作用 ,其机制与清除·OH- 有关。

高聚物的STEM象观察

将分析电子显微镜的扫描透射电子象模式(STEM)应用于两种高分子物的研究。以 ABS/PVC高分子合金和角蛋白纤维为试验材料,叙述了样品制备过程和电镜观察的结果。实验证明,STEM具有对试样穿透能力强和电子束损伤小的特点,特别适用于高聚物材料。在高放大倍数下的观察,能获得直接透射象(TEM)难以观察到的某些微结构情景。

倒卵叶五加总皂甙抗心肌缺血再灌注心律失常的作用

目的探讨倒卵叶五加总皂甙 (SAOH)对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响。方法采用结扎左冠状动脉前降支的方法复制在体大鼠心肌缺血再灌注损伤 (IRI)的模型 ,结扎前 1 0分钟分别舌下静脉注射SAOH5 0mg/kg、1 0 0mg/kg ,分别观察SAOH对大鼠缺血 3 0分钟和 5分钟后再灌注的作用。 结果SAOH能消除大鼠缺血 3 0分钟再灌注 4 0分钟时室性心动过速 (VT)和室性颤动 (VF)的发生 ,并能显著降低缺血 5分钟再灌注 1 5分钟时心律失常的发生率和持续时间。

元江县6种森林蔬菜的育苗及修剪试验

2001年3月至2003年10月,在元江县林木种苗管理工作站进行了6种森林蔬菜的育苗及修剪试验,结果表明,采用生长调节剂处理插穗后,可提高臭菜、树头菜、越南甜菜和刺五加扦插生根率,在大棚中最佳扦插时间生根率分别达80%、60%、80%、60%,吲哚丁酸好于ABT1#生根粉,大棚中扦插优于露天;其中刺五加最佳扦插时间为10月,其他3种为3月。南山藤和长蕊甜菜的种子育苗,出苗率分别为100%和92%;南山藤和长蕊甜菜最佳育苗时间分别为3月和8月。臭菜、南山藤、刺五加、树头菜和越南甜菜的最佳修剪高度分别为50 cm、50 cm、40 cm、60 cm和50 cm,与未修剪相比,分别提高了191.43%、415.63%、214.29%、336.94%和531.39%,修剪能大幅度提高森林蔬菜产量。