基于酰胺基柱的HPLC-RID同时测定异麦芽酮糖中5种糖的含量及其影响因素

研究高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)同时测定异麦芽酮糖产品中果糖、葡萄糖、蔗糖、异麦芽酮糖和海藻酮糖的含量及影响因素。方法采用酰胺基柱,通过精密度试验、t检验确证方法准确性,通过单因素试验和谱图比较确定色谱条件和前处理条件对分离的影响。结果表明,流动相中乙腈的增加能加强糖在酰胺基柱上的保留,三乙胺能显著消除果糖、葡萄糖和海藻酮糖在分离时产生的分裂峰或分叉峰并影响谱图中负峰的位置;样液介质中乙腈、三乙胺分别主要影响溶剂峰和负峰(峰的极性和大小)。在流动相中乙腈、三乙胺体积分数分别为75%、0.05%、柱温45℃、流速1.0 mL/min、进样体积10μL条件下,5种糖在10 min内基本基线分离,且色谱柱pH耐受安全,实际样品测定结果与COA无显著差异(p=0.05),精密度均小于1.3%,均满足相关检测标准的要求。

RID-HPLC法测定阿卡波糖原料药含量

为提高阿卡波糖原料的质量监测水平,采用HPLC法,利用示差折光检测器,以Agela Venusil XBP NH2柱,以V（乙腈）∶V（磷酸盐缓冲液）=65∶35作为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,对阿卡波糖原料药含量进行了测定。该方法对阿卡波糖的线性范围是0.396-4.752 mg/mL（r=0.999 9）,平均回收率100.11%,RSD=0.93%。原料药中阿卡波糖平均含量为98.60%。结果表明：RID-HPLC法测定阿卡波糖原料药的含量,操作简便、分析速度快、结果准确。

大蒜中低聚糖的TLC鉴别和HPLC-RID含量测定

目的建立大蒜中低聚糖的薄层色谱(TLC)法和高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法,用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。方法采用TLC法大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖进行鉴别,以冰乙酸-氯仿-水(21/18/4)为展开系统,苯胺-二苯胺溶液为显色剂;采用HPLC-RID法测定大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖的含量,色谱柱为碳水化合物分析柱(4.6×250 mm,4μm);流动相:乙腈-水(75/25),柱温:35℃,流速:1.0 mL/min,进样量:15μL。结果薄层色谱中可以检测到果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖4种低聚糖。果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖分别在0.03~0.81、0.5~16.04、0.02~0.65、0.02~0.64 mg/mL范围线性关系良好。4种糖类低、中、高浓度平均回收率(n=3)分别为98.0%、99.7%、100.3%和98.2%;测定新疆5种不同海拔(1733、1680、1250、2800、2300 m)大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖的含量分别为0.34~0.54、6.54~8.74、0.45~0.61、0.04~0.15 mg/g。结论本研究建立的大蒜中低聚糖的定性、定量分析方法准确可靠、重现性好,可用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。

HPLC-RID法测定蒜酶提取物中PEG含量

目的建立高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法测定蒜酶提取物中聚乙二醇(PEG)含量的方法,并进行方法学考察。方法高效液相色谱法色谱柱为TSK gel G3000PWXL(7.8 mm×300 mm,7μm),流动相为纯水,柱温25℃,流速0.7 mg/mL,检测器为示差检测器,进样量15μL进行PEG含量检测。结果 PEG在浓度为0.05~15 mg/mL时,呈良好线性,相关系数r=1;精密度实验峰面积RSD分别为0.32%(日内精密度)和1.35%(日间精密度);重复性实验峰面积RSD为0.35%;稳定性实验峰面积RSD为1.27%;低、中、高浓度回收率分别为101.077%、100.045%、99.213%,RSD值分别为1.05%、1.08%、1.58%。6批蒜酶提取物中PEG平均含量为456.4mg/g。结论建立的HPLC-RID法各项检测指标均符合要求,可用于测定蒜酶提取物中PEG含量。

HPLC-RID法测定苹果中果糖 山梨醇 葡萄糖和蔗糖

采用高效液相色谱-示差检测器优化并建立苹果中果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖的测定方法,该方法具有线性好(R2>0.99)、检测限(0.03~0.10 mg/mL)和定量限(0.09~0.30 mg/mL)低、精确性(RSD<2.16%)和回收率(93.59%~99.76%)高的特点。通过对苹果样品的分析,发现阿克苏冰糖心苹果中果糖含量最高(74.43±2.00 mg/g),其次是蔗糖(30.51±1.89 mg/g)、葡萄糖(18.75±1.52 mg/g),山梨醇含量最低(16.53±0.03 mg/g);其中,糖心果肉中山梨醇含量高,而果糖、葡萄糖和蔗糖低,说明阿克苏苹果“冰糖心”的形成与山梨醇的含量密切相关,山梨醇可能是阿克苏“冰糖心”苹果的重要特征指标。

HPLC-RID测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量

目的建立高效液相色谱-示差折光检测器法(HPLC-RID)测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量。方法采用Waters Sun Fire C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(10:90),柱温30℃,进样量20μL,流速1.0 mL/min,检测器为RID,检测池温度30℃。结果盐酸金刚烷胺的线性范围为0.2513~2.5130mg/mL(r=0.9994),平均回收率为100.1%,RSD为0.9%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于盐酸金刚烷胺片的含量测定。

HPLC-RID法同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸的含量

目的:建立同时测定复方牛磺酸滴眼液中牛磺酸和氨基己酸含量的高效液相色谱-示差折光检测器法。方法:采用Waters氨基键合硅胶柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈(40∶60),流速为0.8 ml·min^(-1),柱温为35.0℃,检测器参比池和检测池温度均为35.0℃,进样量为20μl。结果:牛磺酸和氨基己酸质量浓度在0.05~2.00 mg·ml^(-1)(r均为0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.57%(RSD=1.07%,n=9)和100.69%(RSD=0.75%,n=9)。结论:该方法准确、简便、快速,适用于复方牛磺酸滴眼液的质量控制。

高效液相色谱-示差折光法检测紫胶桐酸

采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法,利用示差折光检测器(refractiveindex detector,RID)测定紫胶桐酸含量。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm),以V(甲醇):V(水)=60:4 0(0.1%三氟乙酸)作为流动相,流速1 m L/m i n,进样体积1 0μL,柱温3 0℃。结果表明:紫胶桐酸在0.01～1.0mg/mL呈良好的线性关系,R2=0.9994;最低检测限为0.008mg/mL;精密度RSD值为0.86%;平均加标回收率为100.23%,RSD值为0.65%。采用HPLC-RID测定紫胶桐酸的含量,操作简单,结果准确,稳定性和可信度好。

反相高效液相色谱法-二极管阵列检测器测定降糖中药制剂中的化学药品

目的:应用反相高效液相色谱／二极管阵列检测(RP-HPLIC-DAD)测定中药降糖制剂中可能存在的3种化学药品。方法:采用RP-HPLC-DAD对临床常用3种降糖化学药品进行筛选,并对降糖中药制剂进行初步分析。色谱柱:Agilent ZORB- AX ODS C18柱(4．6 mm×250 mm,5μm);流动相:醋酸盐缓冲液(10 mmol·L-1醋酸胺,20mmol·L-1三乙胺,用醋酸调节pH 5．5)与乙腈,梯度洗脱,流速:0．6 ml·min-1,检测波长230 nm,格列吡嗪为内标物进行定量分析。结果:所测定的中药降糖药中含有三种化学药品组分,分别为格列本脲、苯乙双胍、阿卡波糖,并能在该色谱条件下与中药完全分离。结论:本方法可用于所测中药降糖药中3种化学药品成分的分析。

莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光法检测奶粉中乳糖和蔗糖的比较研究

选用市售同种品牌不同年龄段的奶粉,采用莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光检测法对其乳糖和蔗糖进行测定,分析乳糖和蔗糖的差异,并对两种分析方法的结果进行比较,为奶粉中乳糖和蔗糖的检测方法提供依据。结果表明,莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光检测法相比,高效液相色谱—示差折光检测法测定乳糖和蔗糖含量的准确度更高,蔗糖和乳糖的线性范围均为2-12 mg/mL,相关系数分别为0.999 3、0.999 6,精密度实验结果表明,相对标准偏差分别为2.53%、3.81%,平均加样回收率分别为99.70%、101.06%。高效液相色谱—示差折光检测法结果准确、分析时间短、前处理简单,适用于快速测定奶粉中蔗糖和乳糖含量。

示差折光检测法检测肌醇含量

通过实验得到了一种简单、快速、准确分析肌醇的方法。该方法采用日本岛津LC—10AT高效液相色谱仪,BFRL-KNAUER K-2401示差折光检测器,大连依利特公司提供的Spherisorb C18柱,上海之信仪器有限公司生产的DL-360A型超声波清洗器,色谱流动相为蒸馏水,经超声脱气后,流动相流速为0.8mL/min,进样量为20μL。实验证实,采用示差折光检测器的高效液相色谱法所测得的肌醇样品含量的结果重现性好,标准偏差小。

高效液相色谱法在甘油含量测定中应用的研究

现有的甘油含量测定标准化方法，都是以假设“无杂质”为基础的。该法与气相色谱法，均以分离色谱为基础，解决了滴定法不具分离鉴别的缺点。完善了原气相色谱法在不同含量规格适用范围上的局限性，使液相色谱法对不同含量规格甘油定量测试的方法标准化成为可能。该法与气相色谱的“杂质倒扣”法的结合应用和互补，使定性鉴别和不同规格甘油含量测定得以完整组合。其检测下限：44．46ng／μL，线性相关系数r=0．99999，回收率：98．03％～99．88％，重复性：-↑Sr=0．4018，-↑r95=1．125，再现性：-↑SR=0．4463，-↑R95=1．250。

采用带示差折光检测器的高效液相色谱法检测肌醇

通过实验得到了一种简单、快速、准确分析肌醇的方法。该方法采用带示差折光检测器的高效液相色谱仪,Spherisorb C18色谱柱,色谱流动相为蒸馏水,经超声脱气后,流动相流速为0．8 mL/ min,进样量为20μL。实验证实,采用带示差折光检测器的高效液相色谱法所测得的肌醇样品质量分数重现性好、标准偏差小。

浓缩果汁中游离糖的组成分析

建立高效液相色谱分析浓缩果汁中游离糖的成分及含量的方法。该方法采用AgilentZORBAX Carbohydrate色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)进行分离,以乙腈-水(75∶25)为流动相进行等度洗脱,示差折光检测器检测浓缩果汁中游离糖的成分及含量。结果表明,在0.5mg/mL^20mg/mL范围内,木糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和乳糖的色谱峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系(R2>0.9990),相对标准偏差为0.77%~4.54%,加标回收率为87.20%~105.22%。

右美沙芬愈创甘油醚糖浆中蔗糖及单糖含量分析

目的:建立一种高效液相色谱-示差折光检测器(HPLC-RID)方法检测右美沙芬愈创甘油醚糖浆中蔗糖、葡萄糖和果糖的含量,从含糖量的角度评价该制剂质量。方法:采用氨基键合硅胶为填充剂的Phenomenex NH Luna色谱柱(250 mm×4.6 mm, 3μm),示差折光检测器,以水-乙腈(25∶75)为流动相,柱温为40℃,流速为1.0 mL·min^(-1),进样体积为20μL。结果:在该色谱条件下,果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖能得到良好分离。3个目标成分,果糖在1.515~30.3 mg·mL^(-1),葡萄糖在3.52~70.4 mg·mL^(-1),蔗糖在4.462~89.240 mg·mL^(-1)与峰面积呈线性关系。加样回收率,果糖为99.6%,葡萄糖为99.3%,蔗糖为101.1%,RSD均小于2.0%。3家企业的共73批次糖浆剂中均未检出麦芽糖,未发现违规投料;14批样品中蔗糖含量低于2020年版《中华人民共和国药典》四部通则0116规定的45%(g·mL^(-1)),不合格率为19.2%。较低pH导致蔗糖降解可能是不合格的原因。结论:该方法稳定、简便,可用于右美沙芬愈创甘油醚糖浆中蔗糖以及其转化糖的含量测定,也可用于麦芽糖违规投料筛查。建议右美沙芬愈创甘油醚糖浆pH控制在4~5,降低蔗糖降解率,稳定药品质量。