基于Maxent模型的海地瓜(Acaudina molpadioides)区域适宜生境分布预测研究

生境适宜性预测对物种保护、外来生物及有害生物防治具有重要指导意义。本研究应用Maxent模型对宁德晴川湾海域海地瓜适宜性生境进行预测,模型的预测结果达到优秀水平,并结合Arc-GIS软件对海地瓜适宜生境划分为5级。研究结果表明,极高和较高海地瓜适宜生境占总研究区域的1.3%,面积为25.6 km^(2)。水体环境、沉积环境和生态群落均对海地瓜分布产生影响,水体环境中水深、盐度、无机氮和活性磷酸盐是影响海地瓜生境适宜性的主要水环境因子,对海地瓜适宜生境预测累计贡献率达39%,尤其水深是制约海地瓜分布最为主要的因子,预测贡献率为27%;沉积物粒度、硫化物和总有机碳是沉积环境主要影响因子,预测累计贡献率达40.4%,其中沉积物黏土颗粒体积占比是第二重要影响因子,预测贡献率约为18%。浮游动物密度和生物量以及底栖动物种类数量均对海地瓜分布产生一定影响,三者预测累计贡献率为16.8%,其中浮游动物密度的贡献相比其他生物要素最为重要,贡献率约为8%。总体上,海地瓜最为理想的分布区是近岸水深小于5 m、盐度相对较低、沉积物有机碳含量较高、底质为黏土−粉砂土为主的浅水淤泥质生境。

福建海域海地瓜(Acaudina molpadioides)形态特征及系统发育的初步分析

本研究应用形态学和分子生物学方法对福建海域的一种海参——海地瓜(Acaudina molpadioides)进行了观察和分析,描述了海地瓜的骨片、触手、石灰环、波里氏囊、呼吸树、性腺等重要特征。观察到的骨片类型有哑铃体、颗粒体、杆状体、C形体、穿孔板和环形体,数量上以哑铃体为主。与之前的报道相比,颗粒体和C形体是两种新观察到的骨片类型。获得了一段海地瓜的mtCOⅠ基因片段序列(长度为596 bp),基于mtCOⅠ序列的系统发育树(NJ树、ML树和Bayes树)在一定程度上支持了海地瓜属于海参纲芋参目尻参科物种的分类地位。将该序列与GenBank中已收录的4条海地瓜mtCOⅠ序列(登录号:MK050109、EU827691、FJ971405.KX874336)进行了遗传距离分析,结果显示MK050109序列样本与本研究样本为相同物种,即海地瓜,其余3条mtCOⅠ序列的物种命名还需要进一步论证。

福建北部海域海地瓜(Acaudina molpadioides)的性腺发育研究

海地瓜(Acaudina molpadioides)是一种低值海参,本研究运用组织学和形态学方法对福建北部海域海地瓜的性腺发育特征及其周年变化进行了研究,并进一步探究了性别比、生殖周期、精卵排放类型、繁殖季节等繁殖生物学相关内容。结果表明,雌、雄海地瓜的性腺发育均可划分为休止期(Ⅰ)、发育早期(Ⅱ)、增长期(Ⅲ)、成熟期(Ⅳ)、部分排放期(Ⅴ)和排空期(Ⅵ),雌、雄性腺发育程度基本同步。海地瓜性腺发育有明显的周年变化规律:大多数海地瓜在5月性成熟后开始陆续排放配子,配子排放过程中伴随着生殖管的自体破坏然后重生,即性腺开始新一轮发育,新的生殖细胞在11月开始生成并逐步发育直至翌年5月成熟。海地瓜性别比接近1∶1,生殖周期为1年,繁殖期为5-8月(夏季),属于多次排精卵类型。

海地瓜聚集行为对核电厂冷源的风险分析

福建北部海域5月中下旬,海地瓜亲体进入繁殖季节高峰期;6月中旬小型海地瓜在沉积物浅表层生存,9月中旬前受台风搅动可再悬浮进入水体。海地瓜繁殖能力强,在幼体浮游阶段和小型海地瓜再悬浮阶段两次区域再分配以及核电厂取水作用下,可在核电厂取水口海域形成海地瓜高聚集区;伴随着海地瓜指数性增长,可在7—9月形成大量的致灾小型海地瓜,在台风等作用下悬浮进入水体,在取水作用下聚集于鼓网并致灾。因此在海地瓜适宜生长环境建设核电厂,应开展海地瓜聚集风险评估与防控措施。

海地瓜岩藻聚糖与硫酸软骨素双水相分离方法的研究

目前海参中的岩藻聚糖与硫酸软骨素的简便分离方法较少,该研究拟建立一种双水相分离方法用于海参中的岩藻聚糖与硫酸软骨素的简便高效分离。以海地瓜岩藻聚糖和海地瓜硫酸软骨素为研究材料,以分配系数、回收率为评价指标,进行单因素试验,分别考察盐种类、聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)分子质量、pH、PEG质量分数和K_(2)HPO_(4)质量分数对海地瓜岩藻聚糖及海地瓜硫酸软骨素在双水相体系中分配行为的影响。结果表明,PEG 6000-K_(2)HPO_(4)双水相体系可以分离海地瓜中的岩藻聚糖与硫酸软骨素,其中岩藻聚糖集中分配于上相,硫酸软骨素集中分配于下相。最佳分离条件为PEG 6000的质量分数为15%,K_(2)HPO_(4)的质量分数为10%。此条件下,海地瓜中的岩藻聚糖在该体系的分配系数为6.36,在上相的回收率为(86.92±0.97)%;硫酸软骨素在该体系的分配系数为16.53,在下相的回收率为(106.47±1.84)%。该研究建立的方法分离效果良好且简便快捷,具有良好的应用前景。

海地瓜化学成分研究

目的 :研究海地瓜的化学成分。方法 :采用反复硅胶柱层析的方法分离纯化 ,根据化合物的理化特征和光谱数据鉴定其结构。结果 :从海地瓜中分离到 6个化合物 ,分别是 :尿嘧啶 ( 1)、胸腺嘧啶 ( 2 )、胸腺嘧啶脱氧核苷 ( 3)、尿嘧啶脱氧核苷 ( 4 )、胆甾醇 ( 5 )、对羟基苯甲醛 ( 6 )。结论

海地瓜多糖中蛋白含量测定方法比较

比较4种常用的蛋白定量方法来测定海参多糖中蛋白含量,建立海参多糖中蛋白含量的测定方法。氨基酸组成折算出海地瓜多糖中蛋白含量为(5.06±0.31)%,将此结果作为其他测定方法比较的标准。采用4种常用的蛋白定量方法:Folin-酚法、BCA法、考马斯亮蓝法、荧光光度法进行测定,对测定结果进行比较分析。Folin-酚法、BCA法、荧光光度法测定多糖中蛋白含量分别为(4.92±0.20)%、(6.29±0.51)%、(3.88±0.25)%。考马斯亮蓝在反应中不显色,此法检测不出多糖中蛋白。经比较分析,Folin-酚法精确度高,重现性好,测定时间短,操作简便,对仪器要求低,可以准确简便地测定海地瓜多糖中蛋白含量。

海参岩藻聚糖硫酸酯对小鼠急性酒精中毒防治作用的研究

目的研究海参岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan isolatedfrom sea cucumber,SC-FUC)对小鼠急性酒精中毒的防治作用。方法将♂ICR小鼠随机分为5组:正常对照组、模型对照组、益肝灵阳性对照组、SC-FUC低、高剂量组(50和100mg.kg-1.d-1),连续灌胃SC-FUC 4 d,于末次给药后1 h按体重灌胃乙醇体积分数为56%的白酒(15 ml.kg-1),分别记录醉酒和醒酒时间,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ala-nine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspar-tate aminotransferase,AST)活性,肝脏中乙醇脱氢酶(alcoholdehydrogenase,ADH)、乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogen-ase,ALD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果 SC-FUC能有效推迟小鼠的醉酒时间,缩短醒酒时间,明显降低小鼠血清ALT和AST活力(P<0.01),提高肝脏ADH、ALD和抗氧化酶GSH-Px和CAT活力,降低MDA含量,对SOD活力无明显影响。结论 SC-FUC能明显促进乙醇在小鼠肝脏中的代谢速度,提高肝脏的抗氧化能力,具有较好的防治醉酒和保护肝脏作用。

响应面法优化海地瓜皂苷提取工艺

目的:以海地瓜为原料,开展了海地瓜皂苷的提取工艺研究。方法:在单因素分析的基础上,采用了响应面法分析了乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间等因素对海参皂苷得率的影响,优化获得最佳的海地瓜皂苷提取工艺为:乙醇浓度为79%,提取温度为73.5℃,提取时间为2.75 h,料液比为1∶1.7 g/m L。对海地瓜皂苷的影响由大到小依次为乙醇体积、乙醇浓度、提取时间和提取温度。在该工艺下提取海地瓜皂苷得率为0.378%。与模型预测值一致。结论:响应面分析法确定的提取条件合理,验证值与预测值接近,可以用于海地瓜皂苷的提取工艺优化。

海地瓜硫酸软骨素对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的研究海地瓜硫酸软骨素(Acaudina Molpadioideschondroitin sulfate,AM-CHS)对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,并探讨其作用机制。方法采用传统的鸡尾酒诱导剂诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,以MTT法检测AM-CHS对3T3-L1前脂肪细胞及不同分化阶段3T3-L1细胞增殖活性的影响;分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。采用RT-PCR法检测脂肪细胞中过氧化物酶体增殖体激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer bind-ing protein alpha,C/EBPα)、固醇调节元件结合蛋白-1c(ste-rol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)等分化相关基因的mRNA表达水平。结果 AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞的增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,以对分化早期的抑制作用最强。RT-PCR结果表明,AM-CHS能明显降低脂肪细胞PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表达。结论海地瓜AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,其作用机制与下调分化相关基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c的表达有关。

大孔树脂对海地瓜多肽脱色工艺的研究

以海地瓜为实验原料,选用大孔树脂对海参多肽进行脱色。通过比较6种大孔树脂对海地瓜多肽的脱色效果,从中筛选出效果最好的大孔阴离子交换树脂D392;利用响应面实验构建D392脱色的数学模型,确定其脱色工艺为:pH值8.5、温度44℃、树脂用量6.5 g/g(处理液固形物)、处理液浓度4%、处理时间3 h,此时脱色率达(83.2±1.0)%,多肽保留率为(80.5±1.9)%。

两种海参多肽对糖尿病大鼠肾脏的防护作用研究

目的:研究海地瓜与仿刺参酶解液对Ⅰ、Ⅱ型糖尿病大鼠的肾脏系数和生化指标的作用,为进一步开发海地瓜与仿刺参的利用提供理论依据。方法:以Ⅰ、Ⅱ型糖尿病大鼠为模型,适应性饲养7 d后,分为预防组与治疗组,空腹注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型,测定各组大鼠的空腹血糖、血清、组织等生化指标。结果:与模型组相比,预防组与治疗组均能显著降低(p<0.01)糖尿病大鼠的空腹血糖、糖化血清蛋白,改善糖耐量;显著降低尿素氮、肌酐、尿蛋白、低密度脂蛋白胆固醇,显著升高(p<0.01)高密度脂蛋白胆固醇。结论:两种海参多肽均可显著(p<0.01)改善Ⅰ、Ⅱ型糖尿病大鼠的糖、脂代谢等指标,从而达到对糖尿病预防和缓解的功效。

一种低值海参蛋白酶解物降血压活性的研究

通过水解低值海参——海地瓜(Acaudina molpadioides)的体壁蛋白,制备出具有显著抗高血压效果的水解产物。海地瓜的体壁蛋白先后被菠萝蛋白酶和alcalase蛋白酶水解,利用超滤技术,把水解产物分级成>2 kDa和<2 kDa两种组分。<2 kDa的组分具有很强的血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性,其IC50值为0.615 mg/mL。肾血管性高压大鼠灌胃给药(<2 kDa的组分)1个月后,与模型组相比,其收缩压和舒张压均有明显下降,呈剂量依赖性,其中120μg/g剂量的降压效果与卡托普利10μg/g相当。

海地瓜多糖提取条件的优化和脱蛋白的研究

通过对海地瓜多糖提取工艺的摸索研究,确定采用碱解结合木瓜蛋白酶解的方法提取海地瓜粗多糖,并对所提取的海地瓜粗多糖进行了脱蛋白的研究。结果表明,海地瓜于2倍体积的原料重量的溶剂中加入4%氢氧化钠溶液6℃提取24h处理后再用木瓜蛋白酶水解,能提高粗多糖的提取率。采用L9(34)正交实验设计,确定酶解的最佳条件为:酶解温度55℃、酶解时间4h、加酶量4.8×104U/g、酶解液pH6.5,粗多糖得率可达12.08%。在海地瓜多糖脱除蛋白的实验中,三氯乙酸法(TCA)蛋白脱除率为50.86%和多糖损失率为3.92%优于醋酸钾沉淀法的29.83%和10.85%,其脱蛋白效果理想。

大亚湾西部海域海地瓜的空间分布及其栖息环境分析

本研究于2020年1月(冬季)、3月(春季)、8月(夏季)和11月(秋季)对大亚湾西部海域的海地瓜(Acaudina molpadioides)空间分布和环境特征进行了调查研究,并结合室内养殖实验,分析了海地瓜的空间分布规律和栖息特性。结果表明:①海地瓜最高生物量达到170 g/m^(2),其栖息生境为粘土质粉砂和砂质粉砂,低温季节具有较高生物量。②主成分分析(principal component analysis,PCA)发现,有海地瓜分布的站位环境特征表现为较大的水深、盐度和溶解氧浓度,以及较低的水温、叶绿素a含量和较细的底质。③海地瓜的埋栖特征表现为口部向下、尾部朝上,以粘土质粉砂层下的黑色胶泥为食。④经组织切片观察,海地瓜体壁表层无管足,口部有15个触手。海地瓜体表运动器官缺乏,附着能力较弱。⑤主成分分析结果表明,大亚湾西部海域适宜海地瓜栖息的底质为粘土质粉砂,常出现在盐度较高、温度较低的深水区域。冬季和春季的调查数量高于其他季节,这需要进一步研究其生活史以明确其在不同时期内的生活习性。

海地瓜营养成分的分析及评价

对海地瓜进行营养成分测定,包括对海地瓜中主要营养组分、氨基酸组成、脂肪酸组成和矿物质元素的测定、分析和比较,并对其营养价值进行分析和评价。结果显示,海地瓜体壁中粗蛋白、粗脂肪、多糖和粗灰分的含量分别为81.22%、0.23%、3.62%和10.33%;羟脯氨酸含量达31.2 mg/g;18种氨基酸的总量为80.08%(干重),其中8种必需氨基酸占总氨基酸的23.95%,鲜味氨基酸占总氨基酸的54.48%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为0.31,必需氨基酸指数为57.03,必需氨基酸的构成比例低于FAO/WHO的标准;不饱和脂肪酸(UFA)占脂肪酸总量的55.1%;矿物质元素中钙含量最高,为4 100 mg/kg。结果表明,海地瓜是一种低脂高蛋白的海洋生物资源。

海参多肽果冻的制备工艺研究

以海地瓜为原料,开展了海参多肽果冻制备工艺的研究。分别对卡拉胶、魔芋胶、柠檬酸、高麦芽糖浆等主要配方进行优化,获得海参多肽果冻的制备工艺为:5%的海参多肽液,0.3%卡拉胶,0.15%魔芋胶,0.06%柠檬酸,5.0%高麦芽糖浆,0.05%山梨酸钾。该产品营养价值高,感官性能良好,还具有一定的保健功能,为海参多肽的利用开辟了一条新途径。

即食地瓜参的加工工艺研究及营养分析

采用感官评分对即食地瓜参的生姜水脱腥工艺、调味配方进行优化,获得最佳加工工艺,并对其营养成分和卫生指标进行测定。结果显示,即食地瓜参脱腥时间为15 min最佳,调味配方为白砂糖3.5 g、鸡精2.5 g、酱油2.5 g、食盐3.0 g、食用油20.0 g、胡椒粉0.2g、蒜末18.0 g、生姜18.5 g、料酒7.0 g。制备的即食地瓜参含有丰富蛋白质、必需氨基酸、微量元素等营养物质,卫生指标符合即食海参SC/T 3308-2014标准要求。

海地瓜胶原蛋白抗氧化活性肽的酶解工艺优化

以海地瓜为研究对象,以复合蛋白酶为催化剂,以胶原蛋白酶解液DPPH清除率等抗氧化活性为衡量指标,选取底物浓度、酶用量、pH、酶解温度、酶解时间等条件为优化对象,在单因素基础上,进行响应面分析法(RSM),确定最佳抗氧化活性的海地瓜胶原蛋白肽。试验结果表明,海地瓜胶原蛋白酶解最佳条件为底物浓度150g.L-1,酶用量3AIM71,pH7.0,酶解温度53.5°C,酶解时间5.0h,此时DPPH清除率为(76.63±0.86)%,与模型预测值相符,本方法制备的胶原蛋白肽具有较强的抗氧化能力。

类蛋白反应修饰海地瓜酶解物及ACE抑制肽的制备

采用类蛋白反应修饰海地瓜体壁蛋白酶解物,制得修饰肽的血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性与原酶解液的活性相比显著提高;模拟消化实验结果表明,修饰肽与胃肠蛋白酶作用后可增强其降压活性;细胞毒性实验结果表明,样品浓度在低于10 mg/mL时对犬肾细胞(MDCK)无毒性,且低浓度可以促进细胞生长.采用超滤、Sephadex G-15凝胶柱层析和RP-HPLC等分离技术纯化修饰产物,得到高活性ACE抑制肽(IC50值为3.67μmol/L),序列结构为NQNFVQYTTNT.紫外光谱分析结果表明,修饰肽与ACE结合可引起吸光度变化.用SYBYL软件对抑制肽与ACE活性位点进行模拟对接,发现该抑制肽能与ACE很好地结合.