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带J链的α-防御素-1的基因重组和表达载体的构建 被引量:2
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作者 刘贤华 白晓东 +2 位作者 粟永萍 艾国平 张韶峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期697-699,共3页
目的 将α防御素 1(HNP 1)改建为一种杀菌分子J链α防御素 1(J HNP 1) ,这种杀菌分子具有与细胞膜上具备的多聚IgA受体(PIgR)相结合而进入粘膜上皮细胞的能力,发挥其杀菌作用。即克隆人Jchain HNP 1嵌合基因DNA ,并构建真核表达载体。... 目的 将α防御素 1(HNP 1)改建为一种杀菌分子J链α防御素 1(J HNP 1) ,这种杀菌分子具有与细胞膜上具备的多聚IgA受体(PIgR)相结合而进入粘膜上皮细胞的能力,发挥其杀菌作用。即克隆人Jchain HNP 1嵌合基因DNA ,并构建真核表达载体。方法 将从pCH质粒中获取的J链片段,采用人工连接方法与HNP 1片断相连接,并将其构建于新型哺乳动物细胞质粒表达载体pcDNA3 .1( ) Myc HisC中,进行序列测定。结果 经过重组得到的J链防御素 1的目的片断为786bp ,序列分析与GenBank中报道的编码J链及HNP 1成熟肽的序列完全一致。结论 Jchain HNP 1嵌合基因DNA的克隆和哺乳动物细胞表达载体的构建,为进一步进行抗菌肽的研究及制备奠定了基础。 展开更多
关键词 基因重组 抗菌肽 J链 α-防御素-1
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人α-防御素-1基因与J链基因的融合及其表达载体的构建 被引量:2
2
作者 白晓东 刘贤华 +1 位作者 仝青英 张韶峰 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期263-266,共4页
目的本研究旨在将α-防御素-1(HNP-1)基因与J链基因进行融合使其成为融合基因J-HNP-1。方法从pCH-J质粒中扩增出J链;从pBabeNeo-HNP-1质粒中扩增出HNP-1;然后以它们的自身产物为模板,进行重组PCR,获取J-HNP-1 DNA片段,并插入编码双重报... 目的本研究旨在将α-防御素-1(HNP-1)基因与J链基因进行融合使其成为融合基因J-HNP-1。方法从pCH-J质粒中扩增出J链;从pBabeNeo-HNP-1质粒中扩增出HNP-1;然后以它们的自身产物为模板,进行重组PCR,获取J-HNP-1 DNA片段,并插入编码双重报告基因Myc和6个多聚组氨酸(His)的哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中,构建出C端带Myc和6×His的rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1。结果经过重组得到的融合基因J-HNP-1的目的片段为786 bp,与预测相符。结论杀菌分子J-HNP-1的重组和哺乳动物细胞表达载体的构建,为进一步进行抗菌肽的研究及制备奠定了基础。 展开更多
关键词 重组PCRI抗菌肽 J链 α-防御素-1
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猪β防御素-1的研究进展 被引量:2
3
作者 孟虹艳 李培锋 +2 位作者 朱建国 华修国 杨志彪 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第9期50-52,共3页
猪β防御素-1(porcineβ-defensin 1,PBD-1)是广泛分布于猪消化道、呼吸道、肝肾等多种组织细胞内的一类活性多肽,在猪防御系统中有着重要的作用,大量研究结果证明PBD-1具有独特的作用机制,几乎无耐药性,已引起各国研究者的日益重视。... 猪β防御素-1(porcineβ-defensin 1,PBD-1)是广泛分布于猪消化道、呼吸道、肝肾等多种组织细胞内的一类活性多肽,在猪防御系统中有着重要的作用,大量研究结果证明PBD-1具有独特的作用机制,几乎无耐药性,已引起各国研究者的日益重视。目前对PBD-1科研工作在不断深入,可以相信PBD-1将在动物养殖、疾病预防和提高畜产品品质方面发挥重要作用。作者就PBD-1的分布、分子结构、抗菌作用机制和基因表达调控研究进展作一综述。 展开更多
关键词 猪β防御素-1 抗菌肽 研究进展
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C端带Myc和多聚组氨酸双重标签基因的改构体J-HNP-1在COS-7细胞的转染表达 被引量:1
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作者 白晓东 刘贤华 +1 位作者 仝青英 张韶峰 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期129-133,共5页
目的改构α-防御素-1(HNP-1)使其成为一端带J链的改构体J-HNP-1分子,并探索建立能有效表达和分泌J-HNP-1,其表达产物又易于被检测和分离纯化的哺乳动物细胞表达系统。方法利用重组PCR技术,使HNP-1一端带上J链;将J-HNP-1 DNA片段插入哺... 目的改构α-防御素-1(HNP-1)使其成为一端带J链的改构体J-HNP-1分子,并探索建立能有效表达和分泌J-HNP-1,其表达产物又易于被检测和分离纯化的哺乳动物细胞表达系统。方法利用重组PCR技术,使HNP-1一端带上J链;将J-HNP-1 DNA片段插入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中,构建出C端带Myc和6×His的rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1;将此重组真核表达载体导入COS-7细胞,分别从mRNA和蛋白质水平分析J-HNP-1的表达情况,并同步检测细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性。结果采用RT-PCR法从被转染的细胞中扩增出1条约786bp的片段,其大小与预测相符;采用Western印迹法,用抗His抗体检测到细胞可溶性蛋白及培养上清在相对分子质量约24×103处有强反应条带显示;细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性检测显示,经rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清均有明显的抗菌活性。结论α-防御素-1(HNP-1)被成功改构成杀菌肽J-HNP-1;所建立的J-HNP-1哺乳动物细胞表达载体系统能有效表达和分泌活性J-HNP-1。 展开更多
关键词 抗菌肽 J链 α-防御素-1
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带J链的α-防御素-1基因转染COS-7细胞后的表达检测 被引量:1
5
作者 刘贤华 白晓东 +1 位作者 仝青英 张韶峰 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期71-73,共3页
目的将α防御素1(HNP 1)基因与J链基因重组为一种新的杀菌肽分子J HNP 1,观察J HNP 1在细胞内的表达及分泌情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法分别从pCH J质粒和pB abeN eo HNP 1质粒中扩增出J链和HNP 1;进行重组PCR,获取J HNP 1 DNA... 目的将α防御素1(HNP 1)基因与J链基因重组为一种新的杀菌肽分子J HNP 1,观察J HNP 1在细胞内的表达及分泌情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法分别从pCH J质粒和pB abeN eo HNP 1质粒中扩增出J链和HNP 1;进行重组PCR,获取J HNP 1 DNA片段,并插入哺乳动物细胞表达载体pcDNA 3.1()/M yc H isC中;用脂质体转染法将此重组真核表达载体导入CO S 7细胞,然后应用蛋白质免疫印迹法(W estern b lot)检测H is tag标签基因。结果用抗H is抗体检测到细胞可溶性蛋白及培养上清在约24 ku处均有强反应条带显示,其大小与预测相符;对照组未见相应条带显示。结论采用W estern b lot检测到新的杀菌肽分子J HNP 1在细胞内得到表达并分泌到细胞外,为进一步研究J HNP 1杀菌肽的抗菌活性奠定了基础。 展开更多
关键词 重组聚合酶链反应 杀菌肽 J链 α-防御素-1 转染
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J-HNP-1多肽的重组及体外抗菌作用研究
6
作者 刘贤华 白晓东 +1 位作者 仝青英 张韶峰 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第22期2640-2644,共5页
目的:将α-防御素-1(HNP-1)基因与J链基因进行重组使其成为一种新的杀菌肽分子J-HNP-1,并将其构建于能有效表达和分泌活性J-HNP-1杀菌肽的哺乳动物细胞表达系统.方法:应用PCR技术从不同的质粒中获得J链基因和 HNP-1基因,然后应用重组PC... 目的:将α-防御素-1(HNP-1)基因与J链基因进行重组使其成为一种新的杀菌肽分子J-HNP-1,并将其构建于能有效表达和分泌活性J-HNP-1杀菌肽的哺乳动物细胞表达系统.方法:应用PCR技术从不同的质粒中获得J链基因和 HNP-1基因,然后应用重组PCR技术将这两个不同的基因连接在一起而成为J-HNP-1基因.将此基因克隆入哺乳动物细胞表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-HisC中.用脂质体转染法将此重组子导入COS-7细胞,分别从 mRNA和蛋白质水平采用RT-PCR和Western blot分析 J-HNP-1的表达情况,并体外检测细胞可溶性蛋白及培养上清的抗菌活性.结果:获得的J链基因和HNP-1基因大小分别为489和 297 bp.采用RT-PCR法从被转染的细胞中扩增出一条约786 bp的片段,其大小与预测相符;采用Western blot 印迹法.用抗His抗体检测到细胞可溶性蛋白及培养上清在约Mr 24 000处有强反应条带显示;抗菌活性检测显示,经rpcDNA3.1(-)/Myc-HisC/J-HNP-1转染的 COS-7细胞的可溶性蛋白和培养上清均有明显的抗菌活性,抑菌圈的直径分别为34和43 mm.结论:重组J-HNP-1基因构建到哺乳动物细胞表达系统,并体外表达,具有抑菌作用. 展开更多
关键词 重组PCR 抗菌肽 J链 α-防御素-1
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源自螺旋藻渣枯草芽孢杆菌发酵抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌抑菌机制对比研究 被引量:15
7
作者 付云 赵谋明 +1 位作者 庞一扬 刘小玲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第1期108-114,共7页
目的:研究枯草芽孢杆菌发酵螺旋藻渣的发酵液中分离出的抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。方法:采用紫外分光光度法、邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法和原子吸收光谱法研究抗菌肽对金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的影响... 目的:研究枯草芽孢杆菌发酵螺旋藻渣的发酵液中分离出的抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。方法:采用紫外分光光度法、邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷法和原子吸收光谱法研究抗菌肽对金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的影响;采用考马斯亮蓝法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳考察抗菌肽对金黄色葡萄球菌胞内蛋白合成及对基因组DNA结合作用的影响,并通过模拟细胞膜的疏水环境探究抗菌肽发挥抑菌作用时其二级结构的变化情况。结果:抗菌肽SP-AP-1和伊枯草菌素均能引起金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,导致胞内钾离子释放量、蛋白质泄漏量及细胞膜疏水性增加,但抗菌肽SP-AP-1的抑菌效果更为显著(P<0.05);两种抗菌肽均能抑制菌体蛋白合成,尤其对分子质量为17、20、25~35 kDa的蛋白抑制作用最为明显;虽然两种抗菌肽对金黄色葡萄球菌基因组DNA没有明显阻滞作用,但增大抗菌肽质量浓度,SP-AP-1可与溴化乙锭竞争性结合DNA,使基因组DNA条带变暗,影响蛋白质的表达。本实验为螺旋藻渣抗菌肽拮抗金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究提供了理论参考。 展开更多
关键词 抗菌肽SP-AP-1 伊枯草菌素 金黄色葡萄球菌 抑菌机理
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多肽突变体Cbf-14-2抗青霉素耐药细菌的活性研究 被引量:1
8
作者 汪梦筱 马菱蔓 +3 位作者 刘含含 蒋美玲 窦洁 周长林 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期496-502,共7页
本研究主要探讨了新型多肽突变体Cbf-14-2对携带NDM-1基因重组菌(E.coli BL21(DE3)-NDM-1)的抗菌活性及机制。实验采用肉汤倍比稀释活菌计数法测定多肽对E.coli BL21(DE3)-NDM-1重组菌的MIC/MBC和杀菌曲线,评价多肽的体外抗菌活性;采用... 本研究主要探讨了新型多肽突变体Cbf-14-2对携带NDM-1基因重组菌(E.coli BL21(DE3)-NDM-1)的抗菌活性及机制。实验采用肉汤倍比稀释活菌计数法测定多肽对E.coli BL21(DE3)-NDM-1重组菌的MIC/MBC和杀菌曲线,评价多肽的体外抗菌活性;采用重组菌腹腔感染法建立小鼠败血症模型,评价多肽的体内抗菌活性;通过Zeta电位分析和流式细胞术探讨Cbf-14-2抗耐药细菌感染的作用机制。结果表明,多肽Cbf-14-2对携带NDM-1基因的耐药细菌具有良好的抗菌活性(MIC=16μg/m L),能在2 h内快速杀灭细菌;同时,多肽能显著降低感染小鼠肝、脾、肺和肾脏等组织的细菌负载量,对细菌显示出强效清除能力,将小鼠存活率由10%提高至70%。这主要由于Cbf-14-2能与细菌细胞膜表面负电荷发生静电结合,增加对膜的穿透能力。因此,Cbf-14-2有望成为治疗NDM-1耐药细菌诱发感染的潜在抗菌剂。 展开更多
关键词 抗菌肽 Cbf-14-2 抗菌活性 NDM-1
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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制肺脏抗菌肽PG-1基因表达 被引量:1
9
作者 刘春玲 焦慧娟 +3 位作者 许美娟 丁志青 李宏全 姜俊兵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期28-31,I0001,共5页
猪抗菌肽(Protegrin-1,PG-1)对革兰阳性菌、革兰阴性菌和产生耐药性的细菌具有抗菌作用,还可降低慢病毒亚科的传染性和抗囊膜病病毒感染。目的为了研究PG-1基因在猪体内的表达是否受到病毒感染的影响,我们设计了猪繁殖与呼吸综合征病毒... 猪抗菌肽(Protegrin-1,PG-1)对革兰阳性菌、革兰阴性菌和产生耐药性的细菌具有抗菌作用,还可降低慢病毒亚科的传染性和抗囊膜病病毒感染。目的为了研究PG-1基因在猪体内的表达是否受到病毒感染的影响,我们设计了猪繁殖与呼吸综合征病毒攻毒试验,采用荧光定量PCR技术方法测定PG-1基因在肺脏和肠道的表达水平,分析猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对PG-1基因表达的影响。结果表明,PG-1基因在肺脏和小肠组织中均有表达,与对照组比较,攻毒组肺脏和肠道中的PG-1基因的表达量均有所降低,肺脏中PG-1基因的表达水平下降显著(P<0.05),而小肠中PG-1基因下降不显著。结论分析认为,猪繁殖与呼吸综合征病毒感染抑制了抗菌肽PG-1基因在肺脏中的表达。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗菌肽 PG-1
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儿童社区获得性肺炎不同临床类型外周血β-防御素1水平的表达 被引量:11
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作者 刘开云 刘欢 +1 位作者 张融 马爱宁 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期44-47,共4页
目的研究儿童社区获得性肺炎(CAP)不同临床类型其外周血中β-防御素1(HBD-1)的表达水平,探讨其临床意义。方法选择2015年2-10月CAP患儿122例。进行年龄、病原学、临床类型分类;设同期对照组52例。所有患者入院后按其临床特点进行相关类... 目的研究儿童社区获得性肺炎(CAP)不同临床类型其外周血中β-防御素1(HBD-1)的表达水平,探讨其临床意义。方法选择2015年2-10月CAP患儿122例。进行年龄、病原学、临床类型分类;设同期对照组52例。所有患者入院后按其临床特点进行相关类型分类,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其血清HBD-1。结果 CAP组HBD-1水平显著高于对照组(P?<0.05);CAP组中不同病原体、不同性别之间HBD-1水平无显著差异;重度肺炎和轻度肺炎HBD-1水平比较无差异;CAP组中6~12月龄患儿HBD-1水平显著高于其他年龄组;CAP组HBD-1水平与C反应蛋白及中性粒细胞无明显相关性。结论 HBD-1除了作为机体固有免疫的一部分参与到抗感染过程,而且在获得性免疫方面亦可发挥重要的作用;HBD-1对各类病原体呈现出非特异性的、广谱的抗感染免疫功能。 展开更多
关键词 人β-防御素1 社区获得性肺炎 抗微生物肽 儿童
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抗菌肽Piscidin 1 PG/聚乳酸电纺纳米纤维膜的制备及其对海鲈鱼的保鲜作用 被引量:5
11
作者 徐宇辰 励建荣 +4 位作者 李婷婷 谢晶 劳敏军 王轰 郭晓华 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第4期102-109,共8页
本研究使用静电纺丝法制备了Piscidin 1 PG/聚乳酸(Pis-1 PG/PLA)纳米纤维膜,并对纤维膜形态、拉伸强度、结构、热性能、力学性能以及对腐败希瓦氏菌生长的影响进行了研究。最后用Pis-1 PG/PLA纤维膜包裹海鲈鱼鱼肉,通过测定4℃冷藏15d... 本研究使用静电纺丝法制备了Piscidin 1 PG/聚乳酸(Pis-1 PG/PLA)纳米纤维膜,并对纤维膜形态、拉伸强度、结构、热性能、力学性能以及对腐败希瓦氏菌生长的影响进行了研究。最后用Pis-1 PG/PLA纤维膜包裹海鲈鱼鱼肉,通过测定4℃冷藏15d内菌落总数、p H、挥发性盐基氮(TVB-N)等指标研究膜的保鲜效果。结果表明:Pis-1 PG/PLA纳米纤维呈线状,结构光滑无序;Pis-1 PG的加入使得Pis-1 PG/PLA纤维膜纤维平均直径下降至225 nm,纤维膜拉伸强度提升至2.70 MPa,结晶度降低;红外光谱显示Pis-1 PG的加入对PLA的结构没有影响;体外抑菌实验显示Pis-1 PG/PLA纤维膜在6 h内会抑制腐败希瓦氏菌的生长并有持续抑菌的效果,抑菌效果显著(p<0.05);在4℃贮藏6 d后,Pis-1 PG/PLA纤维膜处理鱼肉的菌落总数低于空白组2.02~3.23 lg(cfu/m L),进而有效抑制鱼体p H值和TVB-N含量的升高,能延长海鲈鱼鱼肉冷藏期3 d以上。综上所述Pis-1 PG成功负载到了PLA纤维膜中;Pis-1 PG/PLA纤维膜对海鲈鱼鱼肉有保鲜效果,在水产品保鲜和食品包装等方面具有应用潜力。 展开更多
关键词 抗菌肽Piscidin 1 PG 聚乳酸 静电纺丝 保鲜 海鲈鱼
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抗菌肽Protegrin-1的研究进展 被引量:2
12
作者 施益如 李暄 +2 位作者 蔡明烩 段玉婉 刘璨颖 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期67-72,共6页
抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,具有抗病原微生物活性。在抗菌肽Protegrin(PG)家族中,PG1因其有效的抗病原微生物活性和体内的稳定性日益受到关注,是具有前景的疾病治疗候选物,也是研究抗菌肽作用机理的理想模型。本文对PG1... 抗菌肽是机体天然免疫系统的重要组成部分,具有抗病原微生物活性。在抗菌肽Protegrin(PG)家族中,PG1因其有效的抗病原微生物活性和体内的稳定性日益受到关注,是具有前景的疾病治疗候选物,也是研究抗菌肽作用机理的理想模型。本文对PG1的结构特性、基因表达、生物活性、作用机制和相关应用研究等进行综述,为生产中抗菌肽PG1的进一步开发和应用提供参考。 展开更多
关键词 抗菌肽 Protegrin-1 结构 表达 作用机制
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牛乳铁素优势肽Lfcin B_(1-10)的生物信息学分析
13
作者 宋成祺 于立权 崔玉东 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年第4期81-86,104,共7页
牛乳铁素(Bovine lactoferricin,Lfcin B)是牛乳铁蛋白经胰酶消化后释放出的17位至41位氨基酸残基构成的短肽,具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤和抗寄生虫等生物活性。为了深入开发和利用Lfcin B,进一步去除Lfcin B的部分C-末端氨基酸残基... 牛乳铁素(Bovine lactoferricin,Lfcin B)是牛乳铁蛋白经胰酶消化后释放出的17位至41位氨基酸残基构成的短肽,具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤和抗寄生虫等生物活性。为了深入开发和利用Lfcin B,进一步去除Lfcin B的部分C-末端氨基酸残基,形成了由10个氨基酸残基构成的短肽,称为Lfcin B_(1-10)。Lfcin B1-10较好地保留了Lfcin B的生物活性,但有关Lfcin B_(1-10)的理化性质、结构、跨膜区等是否改变尚不清楚。因此,利用生物信息学方法对Lfcin B_(1-10)的氨基酸的理化性质、二级结构、跨膜区、信号肽及酶切位点等特征进行预测分析。结果显示,Lfcin B_(1-10)为阳离子型抗菌肽,理论等电点为11.71,热稳定性较差;分子为亲水性寡肽,二级结构仅有无规则卷曲,无跨膜区和信号肽,可被机体内多种酶降解,具有良好安全性。研究不仅为深入认识其构效关系、抗菌机制提供依据,同时为Lfcin B1-10的实际应用提供参考。 展开更多
关键词 牛乳铁素 Lfcin B_(1-10) 生物信息学 理化性质 抗菌肽
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一种新型抗菌肽Hydramacin-1在毕赤酵母中的重组表达、纯化及其抗菌活性 被引量:1
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作者 孟德梅 石林玥 +4 位作者 李文娟 孙雪晴 郭雅君 贾雪霞 樊振川 《天津科技大学学报》 CAS 2019年第4期22-29,共8页
Hydramacin-1是来源于大乳头水螅(Hydra)的上皮防御组织的具有广谱抗菌特性的新型抗菌肽.本研究构建了外泌型重组酵母表达载体pPICZαA-Hydramacin-1,再将线性化的重组表达载体pPICZαA-Hydramacin-1电转入毕赤酵母宿主菌(Pichia pastor... Hydramacin-1是来源于大乳头水螅(Hydra)的上皮防御组织的具有广谱抗菌特性的新型抗菌肽.本研究构建了外泌型重组酵母表达载体pPICZαA-Hydramacin-1,再将线性化的重组表达载体pPICZαA-Hydramacin-1电转入毕赤酵母宿主菌(Pichia pastoris)GS115中,成功构建了重组毕赤酵母表达菌株.在培养温度为28℃、甲醇体积分数为1.5%、诱导表达时长为120h时,蛋白表达量达到最高,重组抗菌肽Hydramacin-1的表达量可达83mg/L.经阳离子交换柱纯化,每升发酵液可得到约9mg纯度为90%的重组抗菌肽Hydramacin-1.经最小抑菌浓度的测定,制备的重组抗菌肽具有广谱抗菌特性,相比于革兰氏阳性菌,革兰氏阴性菌对此抗菌肽更为敏感.本实验将Hydramacin-1抗菌肽首次成功地在毕赤酵母中高效表达,为以后该抗菌肽的理论研究和应用奠定了基础. 展开更多
关键词 抗菌肽 Hydramacin-1 毕赤酵母 抗菌活性
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基于蝎抗菌肽Lausporin-1设计衍生肽以优化其抗“ESKAPE”病原菌活性
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作者 罗旭东 张凯月 +2 位作者 蒋僡雯 黎方琰 陈宗运 《湖北医药学院学报》 CAS 2021年第5期441-445,453,共6页
目的:基于蝎抗菌肽Lausporin-1,分子设计低溶血高抗菌活性先导多肽。方法:基于碱性氨基酸取代法设计Lausporin-1衍生肽(LP-M1,LP-M2,LP-M3与LP-M4),开展分子结构、抗菌活性与溶血毒性评价研究。结果:与Lausporin-1比较,4种衍生肽均表现... 目的:基于蝎抗菌肽Lausporin-1,分子设计低溶血高抗菌活性先导多肽。方法:基于碱性氨基酸取代法设计Lausporin-1衍生肽(LP-M1,LP-M2,LP-M3与LP-M4),开展分子结构、抗菌活性与溶血毒性评价研究。结果:与Lausporin-1比较,4种衍生肽均表现出更广谱的抗菌活性,其中LP-M3的溶血活性显著降低。结论:本研究为抗“ESKAPE”病原菌新型药物开发提供新的先导多肽,为蝎源抗菌肽分子优化设计提供了新思路。 展开更多
关键词 “ESKAPE”病原菌 抗菌肽 Lausporin-1 分子优化
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厚壳贻贝抗菌肽myticusin-1的重组表达及功能分析 被引量:1
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作者 杨金月 刘璐 +5 位作者 何治江 何梦岚 郝明梅 张晓林 严小军 廖智 《浙江海洋大学学报(自然科学版)》 CAS 2022年第1期15-22,共8页
抗菌肽在无脊椎动物的先天免疫中起着重要作用。贻贝体内富含各种抗菌肽分子,其中,myticusin-1是厚壳贻贝体内发现的一种分子量较大的新型抗菌肽。天然myticusin-1在贻贝体内含量极低,因此采用大肠杆菌表达体系,结合密码子优化策略开展... 抗菌肽在无脊椎动物的先天免疫中起着重要作用。贻贝体内富含各种抗菌肽分子,其中,myticusin-1是厚壳贻贝体内发现的一种分子量较大的新型抗菌肽。天然myticusin-1在贻贝体内含量极低,因此采用大肠杆菌表达体系,结合密码子优化策略开展了厚壳贻贝myticusin-1的重组表达。表达产物经复性和纯化,所得重组myticusin-1表现出对革兰氏阳性菌、阴性菌以及真菌的广谱抑菌活性,其中,对革兰氏阳性菌的抑制活性较强。为进一步研究myticusin-1在厚壳贻贝体内的功能,采用实时荧光定量PCR技术,对厚壳贻贝分别在金黄葡萄球菌、溶藻弧菌和白色念珠菌的诱导下,其血细胞myticusin-1基因表达水平的时间曲线。结果表明厚壳贻贝myticusin-1基因表达对金黄葡萄球菌最敏感,且对金黄葡萄球菌的应激效应时间最持久。上述研究结果表明myticusin-1在厚壳贻贝体内可能参与对革兰氏阳性菌的免疫防御。 展开更多
关键词 抗菌肽 myticusin-1 原核表达 免疫响应
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抗菌肽Epinecidin-1的研究进展
17
作者 王吉荣 韩涵 邓莉 《药学实践与服务》 CAS 2023年第7期400-402,427,共4页
Epinecidin-1抗菌肽是从石斑鱼中提取的一种小分子活性多肽,是其先天免疫防御系统抵抗各种病原体的第一道防线。体内外研究证实,Epinecidin-1抗菌肽不仅表现出广谱的抗病原体活性(包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等),还具有免疫调节、抗... Epinecidin-1抗菌肽是从石斑鱼中提取的一种小分子活性多肽,是其先天免疫防御系统抵抗各种病原体的第一道防线。体内外研究证实,Epinecidin-1抗菌肽不仅表现出广谱的抗病原体活性(包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等),还具有免疫调节、抗癌以及伤口愈合等药理活性。归纳近年Epinecidin-1抗菌肽的有关研究,对该抗菌肽的作用机制、药理活性、潜在局限性及应用前景进行综述,为下一步研究提供依据。 展开更多
关键词 抗菌肽 Epinecidin-1 作用机制
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Research progress on the defensin Acipensins1
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作者 Qi-Long Du Zu-Xin Zhang +1 位作者 Tao Zhang Chun-Ming Dong 《Microenvironment & Microecology Research》 2022年第2期19-22,共4页
Antimicrobial peptides (AMPs) are bioactive peptides with antibacterial activity, generally composed of 10-60 amino acid residues, and are cationic peptides with amphiphilic structures. It has broad-spectrum antibacte... Antimicrobial peptides (AMPs) are bioactive peptides with antibacterial activity, generally composed of 10-60 amino acid residues, and are cationic peptides with amphiphilic structures. It has broad-spectrum antibacterial properties, and also has antiviral, antitumor, antifungal and other effects, and is recognized as the most potential antibiotic alternative. This paper mainly takes the defensin Acipensins1 as an example to introduce the molecular structure of antimicrobial peptides, expounds and analyzes the mechanism of action of antimicrobial peptides that have been discovered, and summarizes the experiments of O. V. Shamova. The antimicrobial activity and safety of Acipensins1 are analyzed and compared, and the antimicrobial peptides are listed. Many applications of peptides, and finally put forward the prospect of designing and constructing hybrid antimicrobial peptides, hoping to provide some theoretical support for the research and application of antimicrobial peptides in the future. 展开更多
关键词 Acipensins1 antimicrobial peptide molecular structure mechanism of action antibacterial activity
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Circulating proteomic biomarkers for diagnosing sporadic amyotrophic lateral sclerosis:a cross-sectional study 被引量:5
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作者 Lu He Qinming Zhou +5 位作者 Chaoyang Xiu Yaping Shao Dingding Shen Huanyu Meng Weidong Le Sheng Chen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第8期1842-1848,共7页
Biomarke rs are required for the early detection,prognosis prediction,and monitoring of amyotrophic lateral sclerosis,a progressive disease.Proteomics is an unbiased and quantitative method that can be used to detect ... Biomarke rs are required for the early detection,prognosis prediction,and monitoring of amyotrophic lateral sclerosis,a progressive disease.Proteomics is an unbiased and quantitative method that can be used to detect neurochemical signatures to aid in the identification of candidate biomarke rs.In this study,we used a label-free quantitative proteomics approach to screen for substantially differentially regulated proteins in ten patients with sporadic amyotrophic lateral scle rosis compared with five healthy controls.Su bstantial upregulation of serum proteins related to multiple functional clusters was observed in patients with spo radic amyotrophic lateral sclerosis.Potential biomarke rs were selected based on functionality and expression specificity.To validate the proteomics profiles,blood samples from an additional cohort comprising 100 patients with sporadic amyotrophic lateral sclerosis and 100 healthy controls were subjected to enzyme-linked immunosorbent assay.Eight substantially upregulated serum proteins in patients with spora dic amyotrophic lateral sclerosis were selected,of which the cathelicidin-related antimicrobial peptide demonstrated the best discriminative ability between patients with sporadic amyotrophic lateral sclerosis and healthy controls(area under the curve[AUC]=0.713,P<0.0001).To further enhance diagnostic accuracy,a multi-protein combined discriminant algorithm was developed incorporating five proteins(hemoglobin beta,cathelicidin-related antimicrobial peptide,talin-1,zyxin,and translationally-controlled tumor protein).The algo rithm achieved an AUC of 0.811 and a P-value of<0.0001,resulting in 79%sensitivity and 71%specificity for the diagnosis of sporadic amyotrophic lateral scle rosis.Subsequently,the ability of candidate biomarkers to discriminate between early-stage amyotrophic lateral sclerosis patients and controls,as well as patients with different disease severities,was examined.A two-protein panel comprising talin-1 and translationally-controlled tumor protein effectively distinguished early-stage amyotrophic lateral sclerosis patients from controls(AUC=0.766,P<0.0001).Moreove r,the expression of three proteins(FK506 binding protein 1A,cathelicidin-related antimicrobial peptide,and hemoglobin beta-1)was found to increase with disease progression.The proteomic signatures developed in this study may help facilitate early diagnosis and monitor the progression of sporadic amyotrophic lateral sclerosis when used in co mbination with curre nt clinical-based parameters. 展开更多
关键词 amyotrophic lateral sclerosis cathelicidin-related antimicrobial peptide HEMOGLOBIN label-free quantitative proteomics multi-protein combined diagnostic panel serum biomarkers talin-1 translationally-controlled tumor protein ZYXIN
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中国对虾素在大肠杆菌(Escherichia coli)中的重组表达 被引量:4
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作者 薛剑峰 康翠洁 +2 位作者 王金星 赵小凡 相建海 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期235-240,共6页
中国对虾素是从中国对虾血细胞中克隆得到的一种抗菌肽。为了进一步研究中国对虾素(CHP)的功能并为制备特异性抗体作准备,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,进行了对虾素原核表达的研究。根据从中国对虾血细胞中克隆得到的对虾素基因设... 中国对虾素是从中国对虾血细胞中克隆得到的一种抗菌肽。为了进一步研究中国对虾素(CHP)的功能并为制备特异性抗体作准备,采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法,进行了对虾素原核表达的研究。根据从中国对虾血细胞中克隆得到的对虾素基因设计特异性引物扩增中国对虾素成熟肽基因(Chp),插入原核表达载体pGEX4T1中,在E.coliBL21表达融合蛋白GSTCHP。结果表明,不同表达菌株的融合蛋白表达量为30%—34%,同一菌株在诱导5h后能达到最高表达量。利用GST亲和层析纯化融合蛋白,将融合蛋白用凝血酶裂解以得到CHP,其分子量约为5.6kDa,N端测序结果与期望的成熟对虾肽序列一致。用液体生长抑制方法检测活性,表明重组GSTCHP蛋白及CHP均表现出对大肠杆菌的抑菌活性。 展开更多
关键词 中国对虾 重组表达 融合蛋白 大肠杆菌表达 原核表达载体 E.coli 特异性抗体 特异性引物 外源蛋白 基因设计 层析纯化 抑制方法 抑菌活性 血细胞 表达量 CHP 抗菌肽 成熟肽 GST 酶裂解 分子量 克隆 菌株 凝血 测序
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