基于网络药理学的青楷槭抗败血症作用及其机制研究

[目的]应用网络药理学方法研究青楷槭的抗败血症潜在作用靶点及作用机制.[方法]检索中药系统药理学数据库TCMSP数据库和Swiss Target Prediction数据库获得青楷槭的主要有效成分和药物靶点,利用OMIM、Genecards等数据库获得疾病的作用靶点,运用Cytoscape 3.7.2软件构建出青楷槭活性成分-疾病靶点的网络模型,通过Cytoscape 3.7.2软件和String数据库构建PPI网络图,筛选出抗败血症作用的关键靶点并进行GO富集分析和KEGG通路富集分析.[结果]从青楷槭中筛选出33种有效成分和446个作用靶点,与816个疾病靶点取交集,共得到88个药物-疾病的共同靶点.青楷槭中的6-羧基-(-)-儿茶素甲酯、没食子酸甲酯、原儿茶酸、槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖及灰毡毛忍冬皂苷A等可能是青楷槭抗败血症作用的主要活性成分;PPI网络图显示CASP3、PTGS2、VEGFA、AKT1、TNF、ALB等靶点是抗败血症的关键靶点;通路分析结果显示,抗败血症靶点主要富集于NF-κB、MAPK及TNF通路等.[结论]青楷槭的多个活性成分通过多靶点、多通路实现抗败血症作用.

基于网络药理学探讨青楷槭的抗弓形虫作用机制

[目的]应用网络药理学方法探究青楷槭抗弓形虫病作用的可能机制.[方法]通过检索Swiss Target Prediction数据库得到青楷槭的成分和靶点、检索Disgenent数据库获得弓形虫相关靶点,取两者相关靶点的交集为青楷槭抗弓形虫的活性成分及作用靶点,使用Cytoscape 3.7.2软件构建青楷槭活性成分-抗弓形虫病作用靶点网络并进行关键化合物的筛选,利用STRING平台建立靶蛋白的相互作用网络并筛选关键靶点,再通过R 3.6.1软件对靶点基因进行GO富集分析和KEGG代谢通路分析,明确生物学机制.[结果]共检索出青楷槭中的33个主要活性成分、446个相关靶基因和876个疾病靶点,两者取交集得到66个青楷槭-弓形虫病共同靶点.药物-成分-靶点-疾病网络与靶蛋白相互作用网络分析结果显示,TgHSP70是青楷槭抗弓形虫的关键靶点.[结论]青楷槭中的多个成分通过作用于多个靶点和通路发挥抗弓形虫作用.

青楷槭皮热水提取物的抗氧化性和抗菌性研究

为研究青楷槭皮热水提取物的抗氧化性和抗菌性,利用1,1二苯基2三硝基苯肼(DPPH)、2,2’联氮双(3乙基苯并噻唑啉6磺酸)二铵盐(ABTS)和铁离子的还原能力评价了青楷槭皮热水提取物的抗氧化性,并选用变形链球菌(3289)、金黄色葡萄球菌(4220)和大肠杆菌(1924)对热水提取物的抗菌性进行了研究.结果表明:青楷槭皮热水提取物具有良好的抗氧化性,且抗氧化性与提取物浓度呈明显量效关系.在测定浓度范围内,青楷槭皮热水提取物对DPPH的清除率可达95.56%,对ABTS的清除率可达94.76%,对铁离子还原力吸光值可达2.60;青楷槭皮热水提取物的乙酸乙酯和水层仅对大肠杆菌(1924)具有抗菌性,最小抑菌浓度(MIC)分别为128μg/mL和16μg/mL.以上实验结果可为开发利用青楷槭资源提供参考.

青楷槭树皮营养成分、活性物质含量及其抗氧化、抗菌活性

目的:丰富天然抗氧化剂和抗菌剂来源,探索槭树科植物生物活性的发展潜力。方法:测定青楷槭(AT)树皮营养成分及其乙醇提取物(ATEE)和热水提取物(ATWE)的总酚和总黄酮含量,HPLC法测定红景天苷和酪醇含量;考察提取物对DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基清除能力和铁还原力的影响,并分析其对变形链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果:AT的水分、粗脂肪、粗灰分、粗蛋白、碳水化合物和总膳食纤维含量分别为7.12%,4.67%,5.83%,3.96%,78.42%,66.08%;常量元素含量为Ca>K>Mg>Na;微量元素含量为Mn>Fe>Zn>Al>Cu>Cr。ATEE的总酚、总黄酮、红景天苷和酪醇含量高于ATWE,分别为315.66,79.26,183.26,26.89 mg/g。ATEE的DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基清除能力和铁还原力均高于ATWE的,与维生素C的相差不大且总体上高于BHA的。ATEE的乙酸乙酯相表现出了更好的抗菌性,其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的MIC分别为128,16μg/mL,对变形链球菌无抑菌活性。结论:青楷槭提取物具有良好的抗氧化和抗菌活性。

青楷槭化学成分及抗氧化活性的研究

目的对青楷槭的二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行研究,并考察青楷槭的乙醇总提取物、各萃取部位及分离得到的单体化合物的抗氧化活性。方法采用乙醇加热回流法得到青楷槭茎的乙醇总提取物,蒸馏水制成悬浮液,依次用二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取。利用正、反相硅胶及葡聚糖凝胶柱层析等分离技术进行分离,通过1H-NMR及13C-NMR等波谱方法对化合物的结构进行鉴定。利用DPPH法对青楷槭的粗提取物及分离得到的单体化合物进行体外抗氧化活性测试。结果醇粗提取物、二氯甲烷层、乙酸乙酯层和水层的IC50值分别为11.64、39.45、8.46和53.32 mg/L。从青楷槭的二氯甲烷层(1~7)和乙酸乙酯层中(8~15)分离得到15个单体化合物。化合物8~15的IC50值分别为23.40、15.87、14.84、32.52、34.84、31.25、14.14和9.92μmol/L。结论青楷槭茎的15个化合物中1、2、4、5为首次得到。青楷槭茎醇粗提物、乙酸乙酯层及其中分离的化合物具有良好的抗氧化活性。

青楷槭的化学成分研究

[目的]对青楷槭的乙酸乙酯萃取部分的化学成分进行研究.[方法]将青楷槭的茎皮部分用95%(体积分数)的乙醇浸泡后回流提取,减压浓缩得到青楷槭茎皮浸膏,再用乙酸乙酯溶剂萃取浸膏,减压浓缩,得到乙酸乙酯提取物72.6 g.利用多种分离方法对提取物进行分离,再将分离得到的单体化合物通过^(1)H-NMR和^(13)C-NMR核磁进行结构鉴定.[结果]根据NMR核磁谱图确定了4种青楷槭中含有的化学成分.[结论]从青楷槭中共分离确定了4种化合物,其中化合物1、3和4为首次从青楷槭中分离得到,为青楷槭的进一步的化学研究提供了依据.

高效液相色谱法测定青楷槭中红景天苷含量

[目的]建立测定青楷槭中红景天苷含量的方法.[方法]采用乙醇回流法提取青楷槭中的红景天苷,通过正交试验判断提取时间、提取温度、乙醇体积分数等因素对所提取红景天苷含量的影响.以红景天苷标准品作为对照品,采用高效液相色谱法测定青楷槭中的红景天苷含量.[结果]青楷槭中红景天苷的最佳提取工艺为乙醇体积分数95%、提取时间1.0 h、提取温度70℃.在此条件下采用高效液相色谱法测得红景天苷的峰面积(Y)与体积分数(X)的回归方程为Y=1224609.1599 X-23697.2139(R~2=0.9990),RSD<2%.[结论]该测量方法较为精准,可用于青楷槭中红景天苷的含量测定.

响应面法优化超声辅助法提取青楷槭叶红景天苷工艺研究

以青楷槭叶为原料,采用超声辅助法提取青楷槭叶中的红景天苷。在单因素实验基础上,应用中心组合实验设计原理,以红景天苷得率为响应值,分别考察了影响提取率的乙醇体积分数、液料比、超声提取时间、超声功率及超声温度5个因素,再采用三因素三水平对超声的三个影响因素(温度、功率、时间)进行响应面优化。结果确定提取过程优化的工艺条件:乙醇体积分数50%、液料比20∶1[V(mL)∶m(g)]、超声提取时间20 min以及超声功率180 W。超声提取法可快速地提取青楷槭叶中的红景天苷,具有省时、高效、稳定等优点。

青楷槭树叶成分分析及其提取物的抗氧化能力研究

以青楷槭树叶为原料,研究其一般成分含量、游离糖含量及青楷槭树叶提取物的抗氧化能力。以DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子的清除能力和铁离子还原能力为评价指标测定青楷槭树叶热水提取物(ATWE)和青楷槭树叶乙醇提取物(ATEE)的抗氧化能力。结果表明:青楷槭树叶水分为13.24%,粗灰分为4.73%,粗脂肪为5.41%,蛋白质为19.77%,碳水化合物为56.85%,总膳食纤维为49.57%;青楷槭树叶中检测出3种游离糖,其中果糖、蔗糖、葡萄糖的含量分别为5.13%, 1.38%和3.45%,未检测出麦芽糖和乳糖。结果表明, ATEE和ATWE均具有良好的自由基清除及还原能力,且在总体上ATEE抗氧化能力优于ATWE。

基于均匀设计法优化三种槭树属植物高效快繁体系

以花楷槭、青楷槭和小楷槭的嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合于嫩茎腋芽生长伸长同时生根的培养基。结果表明,最适合花楷槭的培养基为:改良MS+IAA0.10mg·L^(-1)+GA_31.10 mg·L^(-1),再生率为98%;最适合青楷槭的培养基为:改良MS+IAA0.40mg·L^(-1)+IBA0.10 mg·L^(-1)+NAA0.07 mg·L^(-1)+GA_31.10 mg·L^(-1),再生率为96%;最适合小楷槭的培养基为:改良MS+IBA0.10 mg·L^(-1)+GA_31.10 mg·L^(-1),再生率为94%。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30～35 d的一个培养周期内,增殖倍数达65以上。

青楷槭树叶成分及抗氧化性的研究

为充分利用自然植物资源,对青楷槭树叶的成分进行基础性研究。测定青楷槭树叶营养成分及其乙醇提取物的总酚和总黄酮含量。测定其乙醇提取DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和Fe;还原力。结果显示,青楷槭树叶水分、碳水化合物、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和总膳食纤维含量分别为13.1%,55.4%,24.1%,3.4%,4.0%和45.2%。常量元素含量顺序为K>Ca>Mg>P>Na,微量元素含量顺序为Mn>Fe>Zn>Cu。青楷槭树叶游离糖成分为葡萄糖、果糖、蔗糖,含量分别为2.5%,3.5%和0.9%。青楷槭树叶乙醇提取物的总酚、总黄酮含量分别为350.67mg/g和57.42 mg/g,高于对照组青楷槭树叶(115.48 mg/g和21.4 mg/g)。青楷槭树叶乙醇提取物的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、Fe;还原力均高于青楷槭树叶,与抗坏血酸相差不大且总体上高于BHA。由此可得,青楷槭树叶乙醇提取物具有良好的抗氧化性。