涂片与培养方法检测痰液和肺泡灌洗液中抗酸菌诊断肺结核的管理研究

目的评价痰液和肺泡灌洗液联合抗酸菌检测的临床应用价值,为肺结核临床诊疗决策提供参考。方法以在同一周内并行痰液涂片染色查找抗酸菌和/或分枝杆菌培养检查的可疑肺结核患者为研究对象,从医院LIS系统中收集、整理2021年1月—7月的相关检测数据,分析4种检测结果的同一性与差异性。结果①在272例患者中,痰涂片、肺泡灌洗液涂片、痰培养、肺泡灌洗液培养(以下分别称为“A”“B”“C”“D”)的阳性检出率分别为14.71%(40/272)、19.49%(53/272)、25.00%(67/268)和31.90%(74/232),4种检测作为平行试验的阳性率为37.50%(102/272);②A^(+)C^(+)、A^(-)C^(+)、A^(+)C^(-)、A^(-)C^(-)、A^(-)C N(上标中的“+”“-”“N”分别代表“阳性”“阴性”“未检测”,下同)和B^(+)D^(+)、B^(-)D^(+)、B^(+)D^(-)、B^(-)D^(-)、B^(-)D^(N)结果组合分别占14.71%(40/272)、13.97%(38/272)、0、69.85%(190/272)、1.47%(4/272)和19.12%(52/272)、8.82%(24/272)、0.37%(1/272)、56.99%(155/272)、14.71%(40/272);③A^(+)B^(+)、A^(+)B^(-)、A^(-)B^(+)、A^(-)B^(-)和A^(+)D^(+)、A^(+)D^(-)、A^(+)D^(N)、A^(-)D^(+)、A^(-)D^(-)、A^(-)D^(N)、A^(N)D^(+)、A^(N)D^(-)、A^(N)D^(N)结果组合分别占14.71%(40/272)、0、4.78%(13/272)、80.51%(219/272)和19.12%(52/272)、5.51%(15/272)、4.04(11/272)、8.09%(22/272)、51.74%(140/272)、10.29%(28/272)、0.74%(2/272)、0.37%(1/272)、0.37%(1/272)。结论较通常应用痰液检测抗酸菌而言,行肺泡灌洗液抗酸菌检测可以大幅提高肺结核病原学确诊率,值得临床大力推广应用。

样本直接涂片法与液基夹层杯涂片法查找抗酸杆菌的效果比较

目的探讨液基夹层杯涂片法查找抗酸杆菌检验方法的临床应用价值。方法从广州市胸科医院医学检验科LIS系统中收集、整理2021年1月至7月痰液与支气管冲洗液主要送检临床样本的涂片染色检查和分枝杆菌培养结果,对同一患者时间间隔不超过1周的直接涂片与液基夹层杯涂片查找抗酸杆菌检验的结果进行回顾性分析。结果在241份痰液样本、178份支气管冲洗液样本和全部419份样本的检测中,直接涂片法、液基夹层杯涂片法的阳性率分别为15.35%(37/241)和13.69%(33/241)、15.17%(27/178)和12.92%(23/178)、15.27%(64/419)和13.37%(56/419)。在同期分枝杆菌培养结果阳性的65份痰液样本、50份支气管冲洗液样本和115份全部阳性样本中,直接涂片法、液基夹层杯涂片法的阳性率分别为56.52%(65/115)和50.78%(65/128)、54.34%(50/92)和45.88%(50/109)、55.56%(115/207)和48.73%(115/236)。在241份痰液样本、178份支气管冲洗液样本检测中,直接涂片阳性且液基夹层杯涂片阳性、直接涂片阳性且液基夹层杯涂片阴性、直接涂片阴性且液基夹层杯涂片阳性、直接涂片阴性且液基夹层杯涂片阴性的样本占比分别为12.03%(29/241)、3.32%(8/241)、1.66%(4/241)、82.99%(200/241)和8.99%(16/178)、6.18%(11/178)、3.93%(7/178)、80.90%(144/178)。结论液基夹层杯涂片法查找抗酸杆菌检验方法总体阳性检出率略低于直接涂片检测法,但可以发现相当比例的直接涂片法阴性的病原学阳性结核病患者,尤其是在支气管冲洗液检测中,具有一定的临床应用价值。

微生物抑制法快速检测鲜牛乳中红霉素残留

目的利用微生物抑制法快速检测鲜牛乳中红霉素残留。方法将待测的牛奶样品和空白样品经杀菌后接入乳酸菌,经过相同时间发酵后,计算待测牛奶样品发酵前后的pH变化差值与空白样品发酵前后的pH变化差值,从而判断鲜牛奶中红霉素残留的含量。结果经过单因素及正交实验,确定乳酸菌发酵产酸条件如下:接种量0.15 U/L、发酵温度40℃、菌粉溶解时间25 min、发酵时间3.5 h,利用乳酸菌发酵产酸建立了检测鲜牛奶中红霉素残留的标准曲线Y=0.024X-0.013(其中,Y为△pH,X为鲜牛乳样品中的红霉素浓度),线性相关系数R^2=0.9949,检测的灵敏度IC_(50)为29.71μg/L,检测的线性范围为0~50μg/L,加标回收率为103.54%~124.58%,同一批次内检测的变异系数为4.39%~16.46%。结论建立的检测方法可用于筛选鲜牛乳中是否有抗生素残留并进行定量检测。

支气管冲洗液涂片与培养在肺结核诊断中的价值分析

目的探讨应用支气管冲洗液进行结核病病原学检查的临床应用价值。方法2019年1月至12月应用广州市胸科医院医学检验科LIS系统资料,对比分析在3周内并行痰、支气管冲洗液金胺O荧光染色涂片与分枝杆菌培养结果情况。结果115例患者支气管冲洗液直接涂片与痰直接涂片、307例患者支气管冲洗液夹层杯法涂片与其痰直接涂片比较,应用支气管冲洗液样本的阳性检出率显著低于痰样本(P<0.001,P=0.049);应用MGIT 960系统对882例患者支气管冲洗液和痰进行分枝杆菌培养,支气管冲洗液、痰的培养阳性率分别为37.53%和33.90%,而且89例(10.09%)痰培养阴性患者支气管冲洗液培养阳性,差异具有统计学意义(χ^2=353.555,P<0.001)。结论应用支气管冲洗液进行分枝杆菌培养是结核病病原学诊断的重要手段,而其涂片染色检查则价值不大。

夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用研究

目的探讨夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用价值。方法同时用液基夹层杯离心集菌涂片法、直接涂片法和罗氏培养法对收集的864例晨痰标本进行检测,并比较检测结果。结果夹层杯法、直接法和培养法检测864例晨痰标本的阳性率分别为17.59%、5.67%和18.63%,夹层杯法阳性率明显高于直接涂片法(P<0.05);以培养法为标准,夹层杯法的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值及准确性分别为93.16%、99.71%、98.68%、98.46%和98.50%。结论夹层杯离心集菌涂片法是一种阳性率高、更利于标准化和简便化的抗酸杆菌检验方法,其阳性率高于直接涂片法,并与培养法相比有较好的符合率,可能是一种值得推广的检测方法。

11742例可疑结核病患者痰涂片染色抗酸菌检查情况分析

目的分析结核病控制规划实施过程中痰涂片染色抗酸菌检查工作的现状,探讨影响检测质量的可能因素,以持续改进和不断完善相应措施,快速提高结核病诊疗与防控水平。方法回顾性分析广州市结核病防治所越秀区2006—2015年、海珠区2018—2019年《广州市结核病控制项目初诊患者登记本》登记资料。结果在册登记11742例可疑结核病患者,其中结核病患者5989例、痰涂片抗酸菌检查阳性者1970例(占结核病患者的32.89%)。结核病患者3个送检涂片样本中全部阳性、2个样本阳性、1个样本阳性、全部阴性的分别有1481例(24.73%)、284例(4.74%)、205例(3.42%)和4019例(67.11%)。以就诊时间和痰涂片检查报告时间间隔,将患者样本分为时间间隔为0 d的至少2个即时痰的“A组”和时间间隔≥1 d可能包括晨痰、夜间痰、及时痰的“B组”,在可获得时间间隔资料的2147例患者中,A组、B组病例分别为406例和1741例,A组占比18.91%。其中:临床诊断结核病患者1149例(A组185例、B组964例),痰涂片抗酸菌检查阳性509例(44.30%),A组、B组患者3个送检涂片样本中全部阳性、2个样本阳性、1个样本阳性、全部阴性的分别有70例(37.83%)、14例(7.56%)、17例(9.19%)、84例(45.41%)和303例(31.43%)、53例(5.50%)、52例(5.39%)、556例(57.60%),B组阳性率显著低于A组(χ2=9.4718,P<0.05)。结论在结核病临床诊疗与防控实践中,宣教和督促患者按“即时痰”“夜间痰”和“晨痰”规范留取样本并及时送检的工作力度有待加强,以提高涂片染色抗酸菌检查的阳性检出率。

两种染色法检测结核分支杆菌的对比观察

目的比较(intenfised kinyoun,IK)染色法和改良的Wade-Fite染色法检测抗酸菌的临床应用价值。方法采用IK染色法和改良的Wade-Fite染色法对66例病理诊断为慢性肉芽肿性炎,形态符合结核病改变的患者的石蜡组织切片分别进行染色。结果 IK染色法阳性例数为43例,阳性率为65.2%(43/66),其中抗酸分支杆菌L型的阳性率为43.9%(29/66);改良的Wade-Fite染色法阳性例数为24例,阳性率为36.4%(24/66),其中抗酸分支杆菌L型的阳性率为21.2%(14/66),两种方法染色阳性率之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 IK染色法检测抗酸菌的阳性率明显高于改良的Wade-Fite染色法。

夹层杯集菌离心涂片法与改良罗氏培养法检测抗酸杆菌的比较

目的评价夹层杯集菌离心涂片法（夹层杯法）检测抗酸杆菌的临床诊断价值。方法收集2008年7—12月就诊于湖南省湘潭、湘乡、邵东和耒阳4个县（市）结核病防治部门共1190例肺结核可疑症状者的1782份痰标本（晨痰642份，即时痰1140份），每份标本同时采用夹层杯法与改良罗氏培养法（培养法）平行处理，对其检测结果进行比较。结果对晨痰标本检测的阳性率，培养法为26．64％（171／642），高于夹层杯法的阳性率23．52%（151／642），两者差异有显著性（Х^2=4．56，P=0．04）；对即时痰标本检测的阳性率，培养法为23．33％（266／1140），高于夹层杯法的阳性率18．07％（206／1140），两者差异有高度显著性（Х^2=34．60，P=0．00）。夹层杯法对晨痰的阳性检出率高于即时痰（Х^2=7．62，P=0．01）；培养法对晨痰的阳性检出率与即时痰比较，差异无显著性（Х^2=2．42，P=0．12）。结论夹层杯法检测抗酸杆菌的阳性率低于培养法，但简单、省时，便于进行质量控制，是一种很有推广价值的检测方法；夹层杯法检测晨痰抗酸杆菌的阳性率较高，故应尽量留取晨痰作抗酸杆菌检测。

夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌对肺结核诊断的价值

目的探讨夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌对肺结核诊断的意义。方法对614份痰标本同时进行夹层杯集菌离心涂片法与普通痰涂片法检测抗酸杆菌,比较2种方法的检出率。结果夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌阳性率为32.28%,明显高于普通涂片法镜检法的19.87%(P<0.005)。结论夹层杯集菌离心涂片法简单省时、阳性率高,且便于进行质量控制,是一种很有推广价值的检测方法。

应用显微扫描仪检测临床样本中抗酸菌的假阳性与假阴性结果情况分析

目的了解应用显微扫描仪检测临床样本中抗酸菌的假阳性与假阴性情况,以优化仪器检测参数,并不断提高检测准确度。方法研究时间为2019年12月至2020年6月。资料来源于广州市胸科医院。采用试验研究方法对痰、纤维支气管镜冲洗液、胸腔积液、脑脊液、关节腔积液等临床样本在仪器配套的玻片上按要求进行直接涂片,对干燥涂片行金胺O荧光染色,对所有仪器报告阳性涂片、约15%的仪器报告阴性涂片(随机抽取)进行人工复检。采用分类资料统计描述假阳性率和假阴性率,对假阴性者,应用显微镜玻片夹坐标尺标注人工复检到的抗酸菌在涂片中所在位置,估计其在仪器扫描区域内外的情况。结果在5284张涂片中,仪器报告阳性1290例,人工复检报告阳性850例,假阳性率为34.11%(440/1290);随机抽查仪器报告阴性涂片665张,人工复报告阳性100例,假阴性率为15.04%,假阴性结果包括38例±、50例1+、6例2+、4例3+、2例4+;在假阴性涂片中,人工复检查见抗酸菌在仪器扫描区域内者42例、区域之外者58例,两类假阴性率分别为6.32%(42/665)和8.72%(58/665)。结论显微扫描仪检测临床样本中抗酸菌存在较高程度的假阳性与一定程度的假阴性,应不断改进和优化仪器扫描参数,并强化实验室人工复检程序。

1株抗酸阳性丙酸杆菌的分离和鉴定

目的对1株乳腺脓肿标本分离的缓慢生长革兰阳性抗酸杆菌进行菌种鉴定。方法采用细菌的16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因测序分析,结合细菌的菌体形态、生长特征、API 20A和手工生化实验进行菌种鉴定。结果该菌为厌氧的、无芽孢、直或弯曲的多形性杆菌,革兰和抗酸染色为阳性。血平板培养5d形成直径大于2mm、米黄色、圆形、光滑、突起、边缘整齐、β溶血性菌落。但16SrRNA基因测序分析发现,该菌与贪婪丙酸杆菌的同源性为100%,API 20A生化编码为44365062,VP试验的阳性,符合贪婪丙酸杆菌的特征。结论该乳腺脓肿的病原菌为贪婪丙酸杆菌,其抗酸染色阳性,为国内首次报道。

贮藏温度和冷却方法对酸奶品质的影响

为了获得不同的贮藏温度和冷却方法对酸奶品质的影响规律,本实验研究了在5℃冷藏和-25℃快速冻藏条件下,对2个品牌的酸奶同时进行了30d的实验研究,分别测量两种酸奶的乳酸菌含量、酸度,并综合口感和外观进行评定,研究得出2种品牌的酸奶在相同的时间内,快速冻藏能提高酸奶的品质,并有效延长酸奶的保存期。该结论为酸奶运输售卖及家庭贮存等冷链条件提出改进措施。

酸马奶中分离到的乳酸菌耐酸性及抗霉菌活性的研究

从锡林郭勒盟正蓝旗采集的3份酸马奶样品中分离得到30株菌株,未分离到球菌,均为杆菌,分别鉴定为:Lactobacillus coryniformis subsp.Torquens、Lb.bifermentans、Lb.amylophilus、Lb.helueticus和Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus。并从这5种乳酸菌中选出6株菌株进行了耐酸实验及抗霉菌活性测定。结果为:所测菌株均对酸的耐受性良好。选出的菌株Lb.coryniformis subsp.Torquens1、Lb.bifermentans2、Lb.amylophilus3、Lb.helueticus5对本试验中使用的6株霉菌具有较广的抗霉菌活性,其抗霉菌效果一般;菌株Lb.helueticus4、Lb.helueticus5虽然是从同一类群中选出来的,但其抗霉菌效果明显不同;菌株Lb.delbrueckii subsp.Bulgarcus6其抗霉菌活性不是最广的,但对Fusarium oxysporum f.sp.Cucumerinum JCM9284具有较强抗性。

己酸菌耐酸能力状况的试验研究

为弄清有机酸对己酸菌耐酸能力的影响，作了试验研究。从优质窖泥中分离出己酸菌，接入功能性营养液，加入乙酸、乳酸、丁酸和己酸，３５℃培养７２ｈ，测活菌数。结果表明，丁酸、己酸对己酸菌有强抑制作用。研究指出，己酸菌在窖泥中的最适ｐＨ为５．５～６．５；不宜片面追求己酸在窖泥中的含量，应防止己酸在窖泥中的过量积累。（一平）

Pathology of Tuberculosis in Camels ( <i>Camelus dromedaries</i>) in the Sudan

The study was aimed to investigate the pathological changes of condemned lungs of dromedary camels in the Sudan abattoirs using conventional H & E and Zeihl Neelson (ZN) staining procedures. Proliferative granulomatous reaction was demonstrated in one H & E stained lung section which was characterized by focal fibrosis and infiltration of mononuclear cells resembled to tuberculous lesions. While ZN stained sections demonstrated acid fast rod in one pulmonary associated lymph node. These lesions were evidenced presence of tuberculous mycobacteria in camel tissues and recommended further deep investigation of tuberculosis among camels in the Sudan.

含油污泥中芘降解菌的筛选及代谢活性研究

以多环芳烃芘为唯一碳源对含油污泥中微生物进行富集,筛选出高效降解芘的菌株。菌株形态为杆状,其菌落形态呈现圆球状,生理生化鉴定结果表明为分支杆菌属。代谢活性研究表明,菌株在芘浓度为150mg/L、温度30℃、转速150r/min培养7d后,对芘的降解率可达到39.2%左右,OD600生长曲线表明该菌株在16h后进入对数生长期,其稳定期时间大约持续40h,其呼吸速率曲线趋势与生长曲线具有一致性,菌株代谢过程导致培养液pH有所升高。

夹层杯集菌离心涂片法检测抗酸杆菌及影响检出率的因素分析

目的探讨夹层杯离心集菌涂片法检测痰液抗酸杆菌的临床应用价值以及了解影响痰液抗酸杆菌检出率的因素。方法收集735例确诊肺结核住院患者的痰标本,每例患者分别留取晨痰、夜间痰、即时痰各一份,每份标本同时采用夹层杯法与改良罗氏培养法平行处理,比较两种方法的阳性检出率以及不同性质和不同时段痰标本的抗酸杆菌阳性检出率。结果夹层杯法和改良罗氏培养法检测2 205份痰标本的阳性率分别为28.9%和32.1%,二者相比较差异有统计学意义(χ2=54.744,P<0.001);以培养法为标准,夹层杯法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为89.39%、99.53%、98.90%和95.21%;夹层杯法检测抗酸杆菌的阳性率脓性痰和血痰高达53.3%和48.5%,黏液痰和唾液痰只有9.9%和3.7%,培养法亦以脓性痰阳性率最高,达到54.8%,血痰次之,阳性率为51.3%,黏液痰阳性率为13.5%,唾液痰阳性率最低,仅为8.8%;对于不同时段的痰标本,两种方法检测抗酸杆菌的阳性率均以晨痰最高。结论夹层离心集菌涂片法是一种简单、省时、阳性检出率高,更利于标准化的抗酸杆菌检验方法,且与改良罗氏培养法相比有较好的符合率,可能是一种具有推广价值的检测方法;晨痰、脓性痰、血痰阳性检出率高,应强调收集晨痰、脓性痰、血痰送检。