头孢克肟片微生物限度检查方法研究

目的建立头孢克肟片微生物限度检查方法。方法本品需氧菌总数计数采用1∶100供试液和薄膜过滤法,并在培养基中加入头孢菌素酶;霉菌和酵母菌总数计数采用平皿法(1∶10供试液);控制菌大肠埃希菌采用薄膜过滤法,并在最后20 ml冲洗液中加入头孢菌素酶并静置10 min后过滤,同时在培养基中加入头孢菌素酶,采用上述方法对头孢克肟片各试验菌进行回收试验测定及对控制菌检查方法进行验证。结果采用上述方法可有效消除头孢克肟片的抑菌作用,需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数方法适用性试验中的回收比值均在0.5~2.0之间;控制菌检查方法适用性试验检出阳性试验菌。结论所建立的方法可用于头孢克肟片的微生物限度检查。

头孢西丁耐药肠杆菌科高产AmpC酶的细菌研究

目的研究头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产头孢菌素酶(Am pC酶)菌株的分离、分布及耐药现状。方法无重复收集临床分离头孢西丁耐药肠杆菌科细菌86株,酶提取物三维试验检测高产Am pC酶,纸片扩散法测定菌株对12种常用抗菌药物的敏感性。结果头孢西丁耐药肠杆菌科细菌高产Am pC酶阳性率为23.3%(20/86),以阴沟肠杆菌最高,达39.4%(13/33)。在常用β-内酰胺类抗生素中,除亚胺培南和头孢吡肟外,高产Am pC酶菌株的耐药率显著高于非产酶株。结论细菌高产Am pC酶是对头孢西丁耐药的主要原因之一;高产Am pC酶菌株的多重耐药和交叉耐药现象相当严重,应高度重视高产Am pC酶细菌的监测与控制。

产CMY型AmpC酶费劳地枸橼酸杆菌的耐药机制研究

目的研究产CMY型AmpC酶费劳地枸橼酸杆菌的耐药机制。方法应用VITEK-2药敏卡S检测4株费劳地枸橼酸杆菌的MIC,用PCR技术扩增ESBLs、AmpC酶基因、Ⅰ类整合子及插入序列ISEcp1B,对PCR产物进行DNA测序,并进行质粒接合试验以了解耐药基因的转移。结果 4株费劳地枸橼酸杆菌对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、氨基糖甙类抗生素均表现为耐药,但对呋喃类和碳青霉烯类表现为敏感;β-内酰胺酶基因的检出情况:TEM-1(2/4)、SHV-1(2/4)、CTX-M-G1(1/4)、DHA(2/4),Ⅰ类整合子(2/4),ISEcp1B(1/4);质粒接合试验证实其中3株费劳地枸橼酸杆菌的质粒上都含有CMY基因,为可转移质粒。结论 4株费劳地枸橼酸杆菌的β-内酰胺酶耐药基因、插入序列、Ⅰ类整合子和可转移质粒检出率较高,对费劳地枸橼酸杆菌多重耐药的形成起了重要作用。

头孢地尼的临床应用

头孢地尼是头孢菌素类第 3代口服抗生素 ,除对 β 内酰胺酶具有高度的稳定性 ,对肠杆菌科细菌作用突出外 ,还增强了对革兰阳性细菌的作用 ,特别是对葡萄球菌属的抗菌效力 ,其 3位侧链上的乙烯基可提高其口服吸收性 。

鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因型研究及ADC型AmpC酶基因的发现

目的了解绍兴地区鲍氏不动杆菌(ABA)临床分离株中β-内酰胺酶基因型存在状况。方法用聚合酶链反应(PCR)法检测18种β-内酰胺酶编码基因,对其中新发现的ADC型基因作核苷酸序列测定,并与GenBank已登录的相应基因进行比对。结果85株ABA中ADC阳性73株(85.9%)、OXA-23群阳性50株(58.8%)、TEM阳性23株(27.1%),其余基因均阴性;其中ADC基因氨基酸序列与GenBank已登录的基因比对有两个氨基酸不同,可能是新亚型,已被GenBank收录。结论绍兴地区ABA中普遍存在ADC型AmpC酶基因,同时存在TEM型ESBLs和OXA-23群碳青酶烯酶基因,是导致多药耐药的主要原因。

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别。方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型。结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7%、28.3%、6.5%;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8%、38.3%、9.9%。大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA。阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA。结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型。

某地区分离自呼吸系统感染患者产ESBLs、AmpC酶肠杆菌科细菌耐药性检测

目的分析肠杆菌科细菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC酶)情况,及其与肠杆菌科细菌耐药性的关系。方法收集该地区12家医院2009～2010年分离自呼吸系统感染患者呼吸道标本的肠杆菌科细菌1612株,双纸片增效法检测ESBLs、三维试验检测AmpC酶、K-B纸片法检测菌株耐药性,采用χ2检验进行统计学分析。结果 1612株细菌中,产ESBLs和AmpC酶菌株检出率分别为45.0%(726/1612)和11.6%(187/1612),产酶株对多种抗菌药物的耐药率高于非产酶株;未检出碳青霉烯类抗菌药物耐药菌株。结论分离自该地区呼吸道感染患者呼吸道标本的产ESBLs和AmpC酶肠杆菌科细菌具有多药耐药性,应加强细菌耐药性监测,采取有效措施防止耐药性的水平传播。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药机制检测

目的筛查大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌膜孔蛋白基因情况,分析其与耐药的关系。方法随机抽取2008—2010年耐3代头孢菌素(头孢他啶)的大肠埃希菌72株和肺炎克雷伯菌57株,56株头孢他啶敏感的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为对照组;三维试验确定细菌头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的产生情况;超广谱β-内酰胺酶(ESBL)确证试验检测细菌产ESBL的情况;多重聚合酶链反应(PCR)扩增AmpC基因和膜孔蛋白ompF、ompk35、ompk36基因;纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性。结果 72株大肠埃希菌中,14株产AmpC酶,23株产ESBL,3株膜孔蛋白基因缺失;57株肺炎克雷伯菌中,13株产AmpC酶,19株产ESBL,5株膜孔蛋白缺失,膜孔蛋白缺失株4代头孢均出现耐药。结论我院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢类抗生素的耐药机制主要是产AmpC酶和ESBLs,同时膜孔蛋白基因的缺失会造成耐药程度增高。

产β-内酰胺酶痢疾杆菌检测及其基因分析

目的研究临床分离志贺菌产β-内酰胺酶的发生率及其基因型分布情况。方法用聚合酶链反应(PCR)方法扩增CTX-M组、OXA组、blaTEM-1、blaSHV-1、AmpC基因。PCR产物纯化测序法明确β-内酰胺酶基因型。结果91株痢疾杆菌产β-内酰胺酶的检出率为58株(63.74%),产β-内酰胺酶菌中blaTEM-1、blaCTX-M-1、blaCTX-M-13、blaOXA-1和blaAmpc扩增阳性率分别为62.07%(36/58)、17.24%(10/58)、24.14%(14/58)、36.21%(21/58)和10.34%(6/58),产AmpC中全为EBC型;携带2种耐药基因的菌株占20.88%,携带3种耐药基因的为5.49%,未测出CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-25、OXA-2、OXA-10、SHV-1型。结论本地区志贺菌β-内酰胺酶的检出率较高,以TEM-1型和OXA-1型基因为主。

儿童致泻性大肠埃希菌产酶及药敏的相关性分析

目的探讨重庆地区近2 a儿童致泻性大肠埃希菌(E.coli)腹泻的病原菌分布、药敏情况及耐药与产酶间的相关性,为临床治疗提供依据。方法对重庆医科大学附属儿童医院2005年1月-2006年12月收集保存的31株E.coli分别采用表型确证法检测其产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、表型筛选法检测头孢菌素(AmpC)酶及药物纸片法检测其药敏情况。其中,致病性大肠杆菌18株、产毒性大肠杆菌8株、侵袭性大肠杆菌5株,所做药敏试验的抗生素包括氯霉素、阿米卡星、庆大霉素、诺氟沙星、环丙沙星、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、亚胺培南。采用SPSS 12.0软件进行统计学分析。结果31株E.coli对亚胺培南的耐药率为3.2%,对氟喹诺酮类(诺氟沙星、环丙沙星)的耐药率分别为35.5%、38.7%,对氨基糖甙类(阿米卡星、庆大霉素)的耐药率则超过60%,对头孢菌素耐药率更高,均超过67.7%(头孢他啶、头孢吡肟除外);总产酶率为87.1%,单产ESBLs、单产AmpC酶、同时产ESBLs和AmpC酶的检出率分别为64.5%、6.5%和16.1%;单产AmpC酶与单产ESBLs及产2种酶的E.coli的耐药性比较均有显着性差异(Pa<0.05)。结论产酶与否及产酶的种类与细菌耐药有明显相关性;重庆地区儿童致泻性E.coli的产酶率较高,且产酶状况不同,耐药情况也有差异。

革兰阴性杆菌诱导型β-内酰胺酶测定及耐药性分析

对 174株革兰阴性杆菌进行诱导型 β-内酰胺酶的测定和耐药性分析 ,结果产诱导型 β-内酰胺酶细菌 6 5株(37.4% ) ,其中铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌检出率最高 ,分别为 6 0 .0 %、6 0 .0 %、5 3.8%、5 0 .0 %。产诱导型β-内酰胺酶细菌对第一代、第二代头孢菌素有较高耐药性 ,对第三代头孢菌素和氨基糖甙类、喹喏酮类耐药率较低 ,产酶株与非产酶株耐药率很接近。提示常规药敏试验未能真正反映细菌耐药情况 ,诱导型 β-内酰胺酶的检测可以补充常规药敏的不足。

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因研究

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌连续分离株质粒AmpC基因情况和耐药性。方法应用聚合酶链反应(PCR)法对耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌连续分离株进行AmpC酶DHA和ACT-1基因检测和分析。结果68株大肠埃希菌中ACT-1基因阳性4株(5.9%),DHA基因全为阴性;44株肺炎克雷伯菌中DHA基因阳性4株(9.1%),ACT-1基因全为阴性。结论质粒型AmpC酶基因可通过转化、接合等方式转移给其他同种或不同种菌,易于传播,应加强监测。

头孢地尼体外抗菌活性和作为头孢哌酮序贯治疗药物的研究

目的:检测头孢地尼体外抗菌活性,同时观察在下呼吸道感染中,作为第3代头孢菌素序贯治疗药物的作用。方法:用琼脂培养基纸片扩散法检测头孢地尼及其他11种抗生素对4种菌属:葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌共117株细菌体外药物敏感性,同时观察该药对下呼吸道感染患者作为头孢哌酮序贯治疗药物的效果。结果:头孢地尼对葡萄球菌的敏感率与头孢曲松、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢他定、头孢比肟、头孢唑林相似(P>0.05),较氧氟沙星、诺氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星强(P<0.05)。头孢地尼对肺炎克雷伯菌的敏感率与头孢哌酮、头孢曲松、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢唑林、头孢他啶相似(P>0.05),较头孢吡肟弱(P<0.05)。不动杆菌与头孢吡肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星相似(P>0.05),对铜绿假单胞菌敏感率低(敏感率13.33%)。头孢地尼作为头孢哌酮序贯治疗药物,与对照组比较,痊愈率和显效率无明显差别(c2=0.200,P>0.05)。结论:头孢地尼对葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、不动杆菌较敏感,可作为第3代头孢菌素序贯治疗药物。

VITEK2筛选鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶可靠性评价

目的验证和评价VITEK2高级专家系统（AES）判定鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶AmpC的可靠性。方法首先收集2009年l～8月经VITEK2的AES判定为产AmpC酶鲍曼不动杆菌，用AmpC纸片法进行确证试验，最后用聚合酶链反应验证阳性株是否存在AmpC基因。结果15株AES判断为产AmpC酶的菌株，经AmpC纸片法确证试验为阳性，其中12株阳性产酶株可以检测到AmpC基因。132株AES判断为不产AmpC酶的菌株中，经AmpC纸片法验证均为阴性。结论VITEK2AES可以很好地预测鲍曼不动杆菌产AmpC酶情况，有助于快速、准确地检测鲍曼不动杆菌这一相关耐药机制，为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌提供更有力的支持。

用硼酸衍生物检测产质粒AmpC酶

目的调查用3-氨基苯硼酸检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产质粒AmpC酶的实用性。方法菌株鉴定用API20E系统。用纸片增效试验、双纸片协同试验、微量稀释试验检测产质粒AmpC酶。结果用3-氨基苯硼酸与纸片增效试验、双纸片协同试验、微量稀释试验结合检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的质粒AmpC酶,产酶率分别为23.8%(96/403)、22.8%(92/403)、24.3%(98/403);1 6.9%(38/225)、16.9%(38/225)、18.22%(41/225)。5.3%(33/628)产质粒AmpC酶对头孢西丁敏感。1.8%(11/628)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产质粒AmpC酶和ESBLs。结论采用3种方法与3氨基苯硼酸结合检测产质粒AmpC酶,操作简单,灵敏度高,特异性强,可作为临床微生物实验室的常规工作。纸片增效试验、双纸片协同试验更适合于基层医院。用头孢西丁筛选产质粒AmpC酶的方法存在一定缺陷。

铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶检测

目的：调查淮北矿工总医院临床分离铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,Pa）DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶（AmpC酶）的产生情况。方法：收集2007-2008年36株临床多重耐药Pa,用K-B法检测其对12种临床常用抗生素的耐药性 用改良三维试验法检测耐药表型 用聚合酶链反应（PCR）扩增DHA结构基因。采用肠杆菌科基因间重复一致序列PCR（ERIC-PCR）方法对产DHA群Pa进行同源性分析。结果：36株临床多重耐药Pa中有25株扩增出DHA-1型酶基因,检出率为69.4%。25株Pa对10种抗生素的耐药率〉50%,ERIC-PCR分析结果显示在同一科室或不同科室间存在DHA-1流行。结论：淮北矿工总医院DHA-1型质粒AmpC酶检出率远高于国内其他地区 产DHA-1型质粒AmpC酶菌株对头孢菌素及单环酰胺类抗生素耐药严重,在同一科室或不同科室间的传播应引起高度重视。

宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因检测

目的了解近年宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中质粒AmpC酶基因流行状态。方法用K-B法对临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作耐药表型分析,通过聚合酶链反应(PCR)检测AmpC酶基因,然后用三维试验予以证实。结果 140株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,质粒AmpC酶基因阳性率2009、2010、2011年分别为4.4%(2/45)、8.6%(3/35)、13.3%(8/60);其中2009和2010年所检出的均为DHA基因型,2011年分别从2株大肠埃希菌和1株肺炎克雷伯菌中检出ACT-1基因。结论宁波地区临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶基因的流行率有增长趋势。

羟羧氧酰胺菌素临床副反应

本文观察了使用羟羧氧酰胺菌素治疗肺部感染的患者14例,其每日用量为4.0克,持续用药1—2周。结果表明,治疗后有8例出现了不同程度的血液系统异常改变,肝肾功能未见明显异常。文章分析了该药引起血液系统异常的原因,并提出了应用该药时应注意的事项。

卫生学检查中和剂头孢菌素酶作用范围研究

为给生产厂家选择头孢菌素酶提供参考依据,探讨头孢菌素酶去除各种常见头孢菌素类抗生素抑菌性的能力.采用抑菌圈的方法,对比试验组和空白对照组头孢菌素酶对20种头孢菌素类和3种碳青霉烯类(培南类)药敏纸片去除抑菌性能力的大小,判断头孢菌素酶能否有效地水解各种头孢菌素β-内酰胺环的酰胺键,使其降低或丧失抑菌活性.结果表明,头孢菌素酶对大多数头孢菌素类抗生素均有较强的中和能力,对少部分如头孢曲松等有中和作用,但需要的酶量较大;对碳青霉烯类(培南类)作用很弱.

医院感染革兰阴性杆菌产AmpC酶状况及耐药性检测分析

目的探讨产头孢菌素酶(AmpC酶)革兰阴性杆菌医院内感染现状及对药物敏感性的影响。方法对临床标本进行分离鉴定,采用K-B法对常规药物进行耐药性检测,采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的三维法检测AmpC酶。结果在331株革兰阴性杆菌中检出产AmpC酶109株,产酶率为18.4%,产酶菌株对第3代头孢菌素、头霉素类、环丙沙星及含酶抑制剂复合物药物敏感率下降明显,对亚胺培南、头孢吡肟、丁胺卡那耐药率较低,分别为3.28%(2/61)、44.26%(27/61)、31.1%(19/61),产酶菌株对抗菌药物的耐药率明显高于非产酶菌株。结论革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶有关,治疗该菌感染应选用亚胺培南、第4代头孢菌素等。