超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探究超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响机制。方法:将30只实验兔随机分成正常对照组、2%超分子水杨酸(Salicylic acid,SA)组、30%SA组、夫西地酸组、模型对照组,每组6只,并予以相应外用药物干预,连续4周,并分别于用药2周后、用药4周后检测p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白的表达。结果:结果显示,随着用药时间的延长,各组的p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8均呈下降趋势。用药前,各组间p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白表达均差异无统计学意义(P>0.05)。用药2周后,2%SA组、30%SA组、夫西地酸组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.001);三个用药组之间p38MAPK、NF-κB、IL-1β两两比较差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组IL-8低于30%SA组、夫西地酸组(均P<0.05);30%SA组与夫西地酸组IL-8差异无统计学意义(P>0.05)。用药4周后,三个用药组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.05);2%SA组、30%SA组p38MAPK、NF-κB、IL-8低于夫西地酸组(P<0.05),2%SA组IL-8低于30%SA组(P<0.05);2%SA组与30%SA组p38MAPK差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组、30%SA组与夫西地酸组IL-1β均差异无统计学意义(均P>0.05);2%SA组IL-1β低于30%SA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超分子水杨酸可通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路来发挥抗炎作用,且随着用药时间的延长疗效也在逐渐增加,并优于夫西地酸。

一种痤疮复合动物模型的建立

目的建立一种基于Kligman痤疮模型的痤疮复合动物模型,以期获得更接近临床症状的痤疮模型。方法将家兔随机分为正常组、注射病菌组、Kligman组和复合模型组。正常组不做处理,Kligman组和复合模型组均在家兔耳内侧涂抹2%煤焦油持续2周,注射病菌组及复合模型组在造模期间隔日进行痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)液的接种,出现可见囊肿后即可停止接种。模型制备成功后,测量各组表面微循环,检测耳增厚程度,并进行病理组织检查。采用酶联免疫吸附测定法(Elisa)检测血清中白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)和二氢睾酮(DHT)浓度。结果复合模型组与Kligman组比较,IL-1α差异无统计学意义(P>0.05),IL-6增加显著(P<0.01),DHT有一定程度的上升(P<0.05);复合模型组较Kligman组兔耳肿胀程度显著性增加(P<0.01),血液微循环差异有统计学意义(P<0.05)。病理组织观察显示复合模型组表皮角化过度增厚,颗粒层、棘层肥厚,毛囊口充满角化物质,毛囊口由于过多的内容物而膨胀突出,毛囊漏斗部破裂,可见炎症细胞浸润。痤疮复合模型相对于Kligman模型表现出更严重的痤疮反应。结论该方法能制备符合临床症状的痤疮复合模型。

复方中药痤疮凝胶对兔耳痤疮模型治疗作用的实验研究

[目的]采用Kligman法,建立兔耳痤疮模型,观察复方中药痤疮凝胶对兔耳实验性痤疮的治疗作用。[方法]煤焦油稀释液(95%乙醇配成的2%浓度煤焦油溶液)外涂于兔耳内侧导管开口处2 cm×2 cm范围,连续14 d。肉眼及病理确认兔耳痤疮造模成功。造模成功后将兔随机分为A、B、C三组,分别于皮损处外涂5%浓度复方中药痤疮凝胶、10%浓度复方中药痤疮凝胶、维A酸乳膏治疗。治疗两周后,根据分级标准对兔耳痤疮进行分级,统计学分析复方中药痤疮凝胶对兔耳痤疮模型的治疗作用。[结果]治疗两周后,维A酸组与5%、10%浓度复方中药痤疮凝胶组与治疗前相比均取得显著效果,但三组疗效间比较无显著性差异。[结论]复方中药痤疮凝胶对实验性兔耳痤疮模型有确切治疗效果。

新型兔耳慢性难愈性创面模型的构建

目的 :通过对以往兔耳缺血模型的改进 ,构建更为理想的慢性难愈性创面 (chronicwound)动物模型 .方法 :取实验用新西兰白兔 8只 ,分为 2组 ,老龄组 (4 8～ 6 0月龄 )及年轻组 (3～ 6月龄 ) .在双侧兔耳根部环切 ,分离结扎中央动脉及头侧动脉 ,并在耳腹侧以活检打孔器 (biopsypunch)制成直径 6mm的三个圆形创面 .刮除软骨膜 ,暴露软骨 .手术后 3,6 ,9和 1 2d对老龄组兔耳根部多次环切 ,最大限度阻断血运 .观测兔耳皮温、静脉血氧分压变化及镜下新生上皮间距 (EG)、新生肉芽间距 (GTG)及新生肉芽最大厚度 (PH) .结果 :通过连续观测证实 ,缺血后皮温及氧分压的恢复 ,老龄组显著慢于年轻组 (P <0 .0 1 ) .从HE染色测量结果看 ,老龄组EG增加了72 % (P <0 .0 1 ) ,GTG增加了 6 7% (P <0 .0 1 ) ,PH减少了 6 %(P >0 .0 5 ) .结论 :采用老龄兔作为实验动物 ,并在多个时间点反复环切兔耳根部所构建的缺血动物模型 ,更符合真正意义上的chronicwound .

人参皂苷Rb_1增生性瘢痕影响的研究

本实验通过建立增生性瘢痕的动物模型探讨人参皂苷Rb1对增生性瘢痕的治疗效果。选取十分成熟的兔耳增生性瘢痕模型,每只兔子做5处增生性瘢痕,每个瘢痕做不同处理:空白对照组(a),生理盐水注射组(b),药物浓度分别为:0.2 mg/mL(c)、0.4 mg/mL(d)、1.0 mg/mL(e),共5组。通过HE、VG染色,计算HI和胶原纤维含量等发现人参皂苷Rb1可使得瘢痕增生情况有所抑制。免疫组织化学上相关胶原Ⅰ型蛋白和Caspase 3的表达以及原位杂交检测胶原Ⅰ型mRNA的表达从更深的角度表明了该药物有促进成纤维细胞凋亡的趋势和抑制胶原增生的现象。实验结果表明人参皂苷Rb1有抑制增生性瘢痕发展的作用。

他克莫司抑制兔耳瘢痕增生的作用及其机制研究

目的:他克莫司是临床广泛应用的一种药物,其对增生性瘢痕是否产生作用并无相关报道,为此提出并证实了他克莫司可以抑制兔耳瘢痕增生。方法:建立兔耳增生性瘢痕模型,选10只新西兰大耳白兔双耳腹侧用打孔器制作直径1cm圆形创面,伤后14天创面上皮化后给药,每只兔左耳为空白对照组涂等剂量凡士林软膏,右耳为他克莫司治疗组。分别在伤后14天、21天2、8天3、5天和49天采集标本,行HE染色,观察形态学差异;Real-t i me PCR检测纤维化相关因子TGF-β1、TGF-β2、Col l agen-α1等的表达。结果:HE染色可见他克莫司组成纤维细胞数量及胶原纤维较对照组明显减少,PCR结果可见TGF-β1、TGF-β2及Col l agen-α1表达较对照组在各时间点均减少。结论:实验组较对照组瘢痕明显减轻,证明他克莫司显著抑制兔耳瘢痕增生,可作为临床上治疗及预防瘢痕增生的全新疗法。

不同深度兔耳烫伤创面模型的研究

目的建立兔耳不同深度烫伤创面模型。方法以改装的冷热温喷雾机作为烫伤装置,在兔每只耳背侧中段区域内的中线两边设计对称的4个直径1.5 cm烫伤创面,烫伤时间分别为2,3,4,5,6 s,每一时间点6个创面。观察烫伤区变化,伤后24h取标本行组织病理检查并测量烫伤深度。结果各烫伤创面呈圆形且边界清楚,制作浅Ⅱ度、深Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度创面的烫伤时间分别为2,3,4,5 s,5 s以上均达软骨,烫伤深度随烫伤时间延长而加深。结论制作本模型的烫伤设备简单,操作便捷、安全,烫伤创面形状、大小一致,创面深度准确、稳定,制作的兔耳烫伤模型可用于创面修复方面的研究。

二氢青蒿素抑制兔耳瘢痕增生的实验研究

目的:观察二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响。方法:选取成年新西兰大耳白兔16只,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,待上皮化后,对实验组、对照组分别给予二氢青蒿素(180mg/kg)和生理盐水(乙醇终浓度为0.1%)各10ml灌胃,术后28天和56天时观察药物对瘢痕增生指数(HI)的影响及光镜下瘢痕变化情况。结果:二氢青蒿素组与生理盐水组之间HI差异均有显著性意义(P<0.O1);光镜下见二氢青蒿素组成纤维细胞凋亡增加及胶原纤维的含量降低。结论:二氢青蒿素可明显抑制兔耳增生性瘢痕的形成及瘢痕组织增生。

双丹脂质体凝胶抑制兔耳瘢痕增生的作用及机制研究

目的考察双丹脂质体凝胶抑制兔耳瘢痕增生的作用及可能机制。方法制备兔耳增生性瘢痕模型,21 d后给药,持续42 d。采集兔耳缘静脉血,分离血清进行IL-1β、TGF-β_1含量测定,采集瘢痕组织标本进行HE染色后光镜下观察病理组织学变化,同时测量瘢痕增生指数和成纤维细胞密度。结果与模型组相比,双丹脂质体凝胶组瘢痕内炎性细胞显著减少,成纤维细胞呈梭形,细长,呈疏松状有序排列;双丹脂质体凝胶剂组的成纤维细胞密度明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,兔血清IL-1β、TGF-β_1含量较治疗前均有显著变化,与模型组及治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双丹脂质体凝胶有良好的抑瘢效果,可能通过调节IL-1β和TGF-β_1的表达来发挥抑制瘢痕增生的作用。

5-氟尿嘧啶对增生性瘢痕的作用研究

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳外伤性皮肤早期瘢痕增生模型。将12只兔随机平均分为3组,设立生理盐水注射对照组(A组)、局部注射5-FU组(B组)和局部涂抹5-FU软膏组(C组),观察各组瘢痕改变情况。60d后空气栓塞法随机处死兔子,切取含创面的兔耳组织,分别进行苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察组织形态学变化及组织中细胞及胶原等的改变。Real-time PCR及ELISA法检测TGF-β、PDGF、bFGF和INF-γ的表达水平。结果 HE和Masson染色显示,与A组和C组比较,B组真皮层变薄,成纤维细胞和胶原纤维数量较少,胶原纤维排列规则,无胶原结节或者胶原结节不明显。B组和C组TGF-β、PDGF、bFGF、INF-γmRNA表达水平和蛋白水平均显著低于A组,且B组效果好于C组。结论 5-FU对增生性瘢痕有治疗作用,瘢痕组织局部注射5-FU比局部涂抹5-氟尿嘧啶软膏更为有效。

仙人掌提取物对兔耳增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ、Ⅲ及基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:探讨仙人掌提取物对兔耳腹侧创面增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ、Ⅲ及基质金属蛋白酶-1表达的影响。方法:选取新西兰大耳白兔20只,随机分为仙人掌组和空白对照组,每组各10只。在每只兔耳腹侧中线两侧分别做近、中、远各3个直径约1.0cm、间隔约为1.0cm的全层皮肤缺损创面(深达软骨膜表面);每只兔左右耳各6个创面,每组120个创面,共240个创面。分别在仙人掌组创面上喷洒仙人掌提取物,空白对照组创面喷洒0.9%生理盐水。测定并比较术后不同时间点各组增生性瘢痕组织块胶原Ⅰ、胶原Ⅲ、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量表达。结果:各组兔耳腹侧创面愈合后均不同程度出现类似人增生性瘢痕的增生性瘢痕组织块。仙人掌组术后22、54d时增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ含量表达低于空白对照组(P<0.01或0.05);仙人掌组术后22、39d时增生性瘢痕组织块中胶原Ⅲ含量低于空白对照组(P<0.01或0.05),术后54d时则高于空白对照组(P<0.01)。仙人掌组术后22d时MMP-1表达高于空白对照组(P<0.01),术后54d时则低于空白对照组(P<0.01)。结论:仙人掌提取物具有降低兔耳腹侧增生性瘢痕组织块中胶原Ⅰ表达,促进胶原Ⅲ表达,使MMP-1表达升高,从而减轻瘢痕增生,促使已形成的增生性瘢痕组织块软化、吸收的作用。

兔耳增生性瘢痕动物模型的建立与应用

目的:观察外科感染常见致病细菌对兔耳腹侧创面愈合后增生组织块形成的影响。方法:在兔耳腹侧制作72个直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,待其愈合后形成增生性瘢痕组织块作为兔耳增生性瘢痕动物模型,进行形态学和组织学观察。另选同等大小兔耳腹侧240个创面,将其随机分成对照组和实验组,实验组又分为金黄色葡萄球菌污染组、大肠杆菌污染组、绿脓杆菌污染组,观察各组创面愈合情况与增生块发生等情况。结果:人为造成兔耳腹侧创面后可出现类似人增生性瘢痕的增生组织块,出现率为66.7%;4组平均愈合时间分别为(13.367±1.025)d、(19.283±1.091)d、(13.967±0.948)d、(16.233±0.981)d,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);4组增生块出现率分别为64%、90%、75%及80%。金黄色葡萄球菌污染组增生块出现率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);各组创面愈合时间与增生块出现率呈正相关(r=0.169,P<0.01)。结论:增生性瘢痕兔耳动物模型制作简单,模型稳定,重复性强,可作为人增生性瘢痕形成机制与防治研究的动物模型;外科感染常见致病细菌可延长兔耳创面愈合时间,增加兔耳创面愈合后增生块的出现率是促进增生性瘢痕形成的重要因素。

蛇丹合剂对兔耳痤疮模型的治疗作用

目的观察蛇丹合剂对兔耳痤疮模型病理改变的改善作用,探讨其治疗作用机理。方法取健康雄兔18只,按体重分层随机分为A,B,C三组,在其左耳涂用煤焦油进行造模2周,右耳不涂煤焦油作为正常对照。A组给予小剂量蛇丹合剂,B组给予大剂量蛇丹合剂,C组为模型对照组,治疗前后对兔耳进行肉眼及病理切片观察。结果外涂煤焦油2周后,兔左耳表面粗糙,可见粉刺、丘疹,且光镜下组织学改变与人类痤疮相似。灌药2周后,实验各剂量组肉眼可见粉刺、丘疹消退;光镜亦有相应改变;但模型对照组改善不明显。结论蛇丹合剂能有效改善兔耳痤疮模型的皮损及病理改变。

中药“消疮饮”对兔耳模型及血流变学的实验研究

痤疮(acne)是皮肤科的常见病、多发病,尤其在青春期男女发病率最高。本病属中医"肺风粉刺"范畴。中医认为其发病多因饮食不节,过食肥甘厚味,肺胃湿热,复感风邪而致。"消疮饮"是医院沿用多年的治疗痤疮的专方、基础方,纯中药制剂,具有疗效确切、复发率低、低不良反应的优点。为进一步探讨"消疮饮"的作用机制,为临床应用提供科学有效的药效学依据,验证"消疮饮"的主要药理作用,实验从活血化瘀及痤疮模型方面阐明其作用机制,验证"消疮饮"具有活血化瘀和对兔耳微痤疮的治疗作用。

二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响研究

目的研究二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响。方法选取20只成年新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕动物模型,待伤口上皮化后,将其随机分成两组,每组10只。对照组灌胃给予10 m L的生理盐水,实验组灌胃给予10 m L的二氢青蒿素,1次/天,连续给予1周。记录观察术后20 d和50 d 2组兔耳瘢痕的发生和兔耳瘢痕的大小。结果对照组兔耳瘢痕的发生率大于实验组兔耳瘢痕的发生率,差异有统计学意义(P<0.05),表明二氢青蒿素具有降低兔耳瘢痕发生的疗效;对照组兔耳瘢痕大于实验组兔耳瘢痕,差异有统计学意义(P<0.050),表明二氢青蒿素具有治疗兔耳瘢痕的作用。结论二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕具有显著的疗效,作为一种有效的药物,值得对其做进一步的研究。

耳缘静脉放血对偏头痛家兔模型的镇痛效应及中脑导水管周围灰质c-fos表达的影响

目的观察耳缘静脉放血对偏头痛家兔模型的镇痛效应及对中脑导水管周围灰质(PAG)c-fos的表达,从而揭示耳缘静脉放血的镇痛作用机制。方法 30只新西兰家兔按随机数字表分为耳缘静脉放血组、模型组和空白组。按5 mg/kg标准连续3 d颈后皮下注射硝酸甘油复制偏头痛家兔模型,在第3天造模60 min后耳缘静脉放血,分别在造模前、造模30 min和放血后即刻进行痛阈测定。免疫组化法观察偏头痛家兔模型PAG区c-fos表达。结果痛阈改变:造模30 min耳缘静脉放血组和模型组的痛阈明显降低,与造模前比较有统计学意义(P<0.01),与空白组比较均有统计学意义(P<0.01);耳缘静脉放血组放血后即刻痛阈明显升高,与造模30 min比较有统计学意义(P<0.01),与模型组比较有统计学意义(P<0.05);耳缘静脉放血组家兔模型PAG区c-fos阳性细胞数明显降低,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论耳缘静脉放血有明显的镇痛作用,通过抑制偏头痛家兔模型PAG区c-fos基因表达发挥了镇痛效应。

中药消痤胶囊对兔耳痤疮模型皮脂腺、毛囊及血液流变学影响的实验研究

目的探讨中药消痤胶囊治疗寻常痤疮的作用机理。方法将40只兔随机分为5组,A组为空白组,B、C、D、E组均造成兔耳痤疮模型,A、B组用自来水灌胃,C、D组分别用消痤胶囊大、小剂量混悬液灌胃治疗,E组用珍珠暗疮片混悬液治疗。治疗14d后,心脏取血,测其全血高切黏度、全血低切黏度及红细胞压积。取兔耳痤疮标本作组织学切片,观察局部皮肤病理变化,并且运用形态学图象分析系统测量皮脂腺直径和毛囊面积。结果与模型组比较,消痤胶囊大剂量组、珍珠暗疮片组均可降低皮脂腺直径和毛囊面积(P<0.05),且消痤胶囊大剂量组与珍珠暗疮片组比较差异有显著性(P<0.05)。与模型组比较,消痤胶囊大剂量组可降低全血高切黏度、全血低切黏度及红细胞压积(P<0.05);消痤胶囊小剂量组、珍珠暗疮片组均可降低全血高切黏度(P<0.05),且消痤胶囊大剂量组与珍珠暗疮片组在改善全血高切黏度有显著性差异(P<0.05)。结论中药消痤胶囊通过抑制皮脂腺分泌及改善血液黏度起到治疗寻常痤疮的作用。

兔耳缺血性创面模型的构建

目的：为临床深入研究难愈性创面提供良好的实验模型．方法：采用新西兰白兔９只．首先通过动脉灌注了解兔耳动脉走行分布，然后结扎兔耳中央动脉及头侧动脉之总干，用活检打孔器在耳背制成ｄ＝６ｍｍ的４个对称的圆形创面，进行创面一般观察、连续的兔耳皮温测定及静脉血气分析．结果：血管结扎后各时间点皮温及氧分压、氧饱和度与血管结扎前比较均有明显下降（Ｐ＜０．０１）．结论：结扎中央动脉及头侧动脉后制成的兔耳缺血模型确切可靠．

贯穿缝扎法制作兔耳缺血淤血模型的研究

目的建立一种制作简单、便于管理、可靠的缺血淤血动物模型。方法新西兰大白兔6只,贯穿兔耳背腹侧皮肤和软骨,间断缝扎除尾侧血管外所有动、静脉,缝扎处暴露并外涂碘伏每天3次。分别在缝扎后第1、3、7、14、21天对比观察兔耳皮温、色泽、水肿和缝扎处感染情况,同时行静脉血气分析。结果缝扎后兔耳马上出现明显紫黑色,14天左右变浅,至21天时兔耳皮肤仍为淡紫黑色。缝扎后第1天兔耳开始出现水肿且逐渐加重至7天最为明显,此后逐渐减轻,21天时已无明显水肿。皮温、氧分压、二氧化碳分压在各观察点均较缝扎前有明显下降(P<0.01)。结论贯穿缝扎方法制作的兔耳缺淤血模型可靠、制作和管理简单,可作为缺血淤血所致创面的修复研究模型。

木犀草素对兔耳增生性瘢痕抑制作用机制的初步研究

目的:初步研究木犀草素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及可能机制。方法:9只新西兰兔随机分为空白组、生理盐水对照组和药物干预组,每组3只,生理盐水对照组和药物干预组建立兔耳增生性瘢痕模型,每只兔左右耳各3个直径约0.7cm瘢痕创面,相距约1cm。生理盐水对照组给予生理盐水,药物干预组给予木犀草素乳膏,瘢痕组织于给药前和给药后40d取材,Masson染色后显微镜下观察各组瘢痕组织的病理变化,ELISA法检测瘢痕组织中转化生长因子-β(TGF-β)、血小板衍化生长因子(PDGF-BB)、结缔组织生长因子(CTGF)的含量,qRT-PCR和Western Blot法检测TGF-β、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平。结果:Masson染色显示木犀草素干预后瘢痕组织中胶原沉积减少,胶原纤维致密且排列规则。与生理盐水对照组相比,药物干预组瘢痕组织中TGF-β、PDGF-BB、CTGF的表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,qRT-PCR和Western Blot结果显示,与生理盐水对照组相比,药物干预组MMP-2表达升高,而CollagenⅠ表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素能够抑制兔耳增生性瘢痕的形成,其作用机制可能与抑制TGF-β、PDGF-BB、CTGF的分泌、上调MMP-2、减少CollagenⅠ的表达有关。