Tangutidines A-C,Three Amphoteric Diterpene Alkaloids from Aconitum tanguticum

Three new diterpene alkaloids,tangutidines A-C(1-3),and four known alkaloids(4-7)were isolated from the whole plant of Aconitum tanguticum,from which amphoteric diterpene alkaloids(1-3)were obtained for the first time.The structures of 1-3 were elucidated by detailed interpretation of spectroscopic data,including MS and NMR data.All of them were evaluated for their cytotoxic activities.

Chemical composition and antimicrobial activities of the essential oil of Aconitum tanguticum

The composition and antimicrobial activities of the essential oil of Aconitum tanguticum from the southern part of Gansu Province of China were investigated. The essential oil of aerial parts was obtained by hydrodistillation with a 0.7% （v/w） yield. The chemical composition of the essential oil was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS） method. Thirty-five compounds were characterized in the oil, which were mainly monoterpenoids （41.7%） and sequiterpenoids （12.7%）. The main compounds in the oil were （-）-tran-pinecarvyl acetate （15.6%）, heptane （14.88%）, cineole （6.82%）, 3-pinanone （3.64%）, pinocamphone （3.34%）, cadinol （2.93%）, and cubenol （2.33%）. These compounds are identified for the first time in Aconitum tanguticum. The antimicrobial activities of the oil were evaluated against 9 bacteria strains, 1 yeast strain and 3 fungi strains using agar diffusion and broth microdilution methods. It showed strong inhibition against Fusarium semitectum and methicillin-resistant Staphlococcus aureus, low activity against Escheriehia eoli, but no effect against Epidermophyton floccosum. Its MIC values ranged from 0.125 5.000 mg/mL. Thirty-five compounds are newly identified in Aconitum tanguticum.

基于网络药理学和分子对接探讨藏药唐古特乌头抗炎作用机制

目的基于网络药理学、分子对接技术及体外细胞实验验证,拟探讨唐古特乌头抗炎作用的潜在分子机制。方法文献调研并使用数据库检索并筛选得到唐古特乌头活性成分靶点和疾病靶点;交集得到共同靶点,构建protein protein interaction(PPI)网络,得出核心靶点,绘制成分-靶点-疾病网络;对共同靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;将唐古特乌头二萜类生物碱活性成分和部分核心靶点进行分子对接验证。最后基于RAW264.7细胞体外炎症模型,采用MTT法、Griess试剂盒和实时荧光定量RT-PCR等方法验证唐古特乌头醇提物的药效及机制。结果文献搜集得到唐古特乌头17种活性成分,交集得到284个共同靶点;KEGG富集得到PI3K-Akt、Ras、MAPK、HIF-1等108条通路;分子对接结果显示,唐古特乌头活性成分与对接的核心靶点均具有较高的亲和力;体外细胞炎症实验表明,唐古特乌头能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞上清液中NO的释放,减少iNOS的表达。实时荧光定量RT-PCR显示,唐古特乌头可以通过调节PI3K-Akt信号通路发挥抗炎作用。结论唐古特乌头可通过PI3K-Akt等通路发挥抗炎作用,为更好地推进其开发应用提供了科学根据。

甘青乌头的生物碱

从甘青乌头 (AconitumTanguticum(Maxim)Stapf.)中分出五个生物碱 ,其中一个为新生物碱 ,命名为Tangutimine ,四个为已知生物碱 ,分别为 :Hetisinone、Talatizamine、Atisine、Hordeine。经IR ,MS ,1H和13 CNMR以及 2DNMR的测定 ,确定了它们的化学结构。其中Talatizamine。

甘青乌头总黄酮提取精制工艺研究

目的:优选甘青乌头总黄酮的提取精制工艺。方法:以总黄酮含量为检测指标,采用正交设计考察乙醇浓度、乙醇加入量、提取时间和提取次数对总黄酮提取率的影响,优选甘青乌头总黄酮的提取工艺;以总黄酮吸附量(mg/g)和解析率(%)为检测指标,考察D101、AB-8、X-5和XAD-16四种大孔吸附树脂对甘青乌头总黄酮的富集能力,优选树脂类型,并确定上样液浓度、上样流速、上样量、洗脱溶媒和洗脱流速等工艺参数。结果:甘青乌头总黄酮最佳提取精制工艺为:10倍量70%乙醇回流提取3次,每次提取1 h;优选XAD-16树脂精制甘青乌头总黄酮,最佳上样液浓度为8 mg/mL,上样量为112 mg/g干树脂,上样液pH值为5,上样流速为3 mL/min,最佳洗脱溶媒为70%乙醇,洗脱流速为5 mL/min;在最佳吸附解析条件下,甘青乌头总黄酮质量分数从4.39%提高到46.19%。结论:甘青乌头总黄酮提取精制工艺操作简单,结果可靠,可用于工业化生产。

藏药甘青乌头生物碱抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用

目的探讨藏药甘青乌头脂溶性生物碱（ALA）和水溶性生物碱（AWA）抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）的作用和机制。方法四甲基偶氮唑蓝法测定细胞毒性,细胞病变作用法和蚀斑法测定甘青乌头生物碱体外抗HSV-2活性,以半数有效浓度和治疗指数为评价指标;荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和蚀斑法考察ALA和AWA体外抗HSV-2作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对AWA体内抗HSV-2的活性进行评价。结果 ALA和AWA对Vero细胞的半数中毒浓度分别为3.57和7.87mg/mL。ALA和AWA半数有效质量浓度分别为4.99和2.81 mg/mL,治疗指数分别为0.72和2.80。ALA和AWA均能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性。ALA对吸附到非洲绿猴肾细胞的HSV-2没有抑制作用,能微弱抑制HSV-2大分子的增殖,对HSV-2 DNA的复制没有作用。AWA能够抑制HSV-2吸附,抑制HSV-2大分子的增殖,抑制HSV-2 DNA的合成,抑制倍数达10~2。AWA对小鼠的半数中毒质量浓度为0.28mg/kg。AWA延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。结论 AWA抗HSV-2的活性大于ALA,ALA主要通过直接灭活HSV-2,AWA通过抑制HSV-2复制循环的各个环节起作用。

甘青乌头抗炎镇痛活性部位的半仿生-酶法提取工艺优化

用半仿生-酶法提取甘青乌头抗炎镇痛的活性部位,考察加酶量、酶解时间、半仿生提取(SBE)温度和总时间4个因素的影响。结果表明,优选工艺为:加酶量36 U/g,酶解时间90 min,SBE温度80℃,SBE总时间180 min。

超声法提取藏药唐古特乌头中多糖的研究

采用L9(34)正交实验对藏药唐古特乌头中多糖的超声提取工艺进行了优化。以葡萄糖为标准品,用硫酸-苯酚法测定藏药唐古特乌头水提物中可溶性多糖的含量。得到了用超声法提取唐古特乌头中多糖的最佳工艺条件为:药材粒度8目、料液比(质量比)1∶16、提取时间2 h,此条件下提取液中多糖含量可达4.03%。研究结果表明该工艺稳定可行。

藏药唐古特乌头中多糖的提取实验研究

采用正交试验考查了不同因素对藏药唐古特乌头中多糖提取量的影响。结果表明,藏药唐古特乌头中多糖的最佳提取工艺为:粉碎度8目,料液比1∶16,60℃回流提取5 h。

藏药唐古特乌头总生物碱的急性毒性及抗炎镇痛作用

目的:研究藏药唐古特乌头总生物碱(TAA)的急性毒性及抗炎镇痛作用。方法:采用灌胃和腹腔注射两种给药途径研究TAA的急性毒性;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、琼脂肉芽肿两种炎症模型,考察TAA的抗炎作用;采用冰醋酸致小鼠扭体和热板致痛两种疼痛模型,观察TAA的镇痛作用。结果:TAA具有一定急性毒性,对二甲苯致小鼠耳肿胀和皮下琼脂肉芽肿两种炎症模型以及冰醋酸致小鼠扭体和热板致痛两种疼痛模型均有一定的抑制作用。结论:藏药唐古特乌头总生物碱具有抗炎镇痛作用,也具有一定的急性毒性。

毛果甘青乌头中生物碱成分的提取和鉴定

目的:分离纯化鉴定毛果甘青乌头中的生物碱成分。方法:药材室温下自然烘干后,粉粹,用酸提碱沉法提取总生物碱,然后用硅胶柱层析法分离得到单体生物碱,利用化学法和光谱法鉴定其结构。结果:分离鉴定得到了10个化合物的结构,其中有六个内酯型C19二萜生物碱、四个C20二萜生物碱。结论:得到了10个纯的单体生物碱。

乌头类药物的毒性研究及唐古特乌头的研究概述

乌头类药物在我国古代时就开始作为药用。近年,对其化学成分、药理作用及毒理作用的研究较多,但大多集中在中药乌头类,如川乌、草乌、附子的研究,而对于其它乌头类植物研究较少。本文在乌头类药物的化学成分、药理作用和毒理作用的研究基础上,概述唐古特乌头研究进展,为扩大药源,开发新药提供参考依据。

藏药唐古特乌头总生物碱的LD50及心血管活性研究

用改良寇氏法(Karber)测定了唐古特乌头总生物碱腹腔注射给药的半数致死量LD 50;以SD大鼠为药理实验对象,考察SD大鼠血压变化确定唐古特乌头总生物碱的心血管活性。结果表明,唐古特乌头总生物碱腹腔注射的LD 50为0.340 4 g·kg^-1,置信系数α=0.05时的置信区间为0.2895 g·kg^-1≤LD 50≤0.3913 g·kg^-1;对SD大鼠血压测量结果显示,唐古特乌头总生物碱具有平稳的降压作用,降压速度较为平缓。表明,藏药唐古特乌头总生物碱的急性毒性较小,属小毒;且具有一定的心血管活性。

藏药榜嘎的生药学研究

目的:对藏药榜嘎进行生药学研究。方法:采用性状、显微鉴定及薄层鉴别的方法。结果:榜嘎的两个品种在性状上存在一定差异,但在显微特征和薄层色谱上无明显差异。结论:该研究结果可为榜嘎的药材鉴定和质量标准制定提供参考依据。

藏药甘青乌头化学成分研究

目的对甘青乌头Aconitum tanguticum抗炎活性部位中的化学成分进行研究,以阐明其清热解毒的药效物质基础。方法采用脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎症模型,以NO释放量为评价指标考察甘青乌头各部位的抗炎活性,确定活性部位,然后采用多种现代色谱技术对活性部位的化学成分进行分离纯化,经过光谱技术以及与文献值比对的方法鉴定化合物结构。结果甘青乌头乙醇提取物上大孔吸附树脂后的30%乙醇洗脱部位抗炎活性最好,从该部位中共分离鉴定了13个化合物,分别是香草酸(1)、七聚己内酰胺(2)、榜嘎苷D(3)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-[β-D-葡萄糖基-(1→3)-α-L-(4-O-反式-对香豆酰基鼠李糖基)-(1→6)]-β-D-甘露糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(4)、山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-甘露糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(5)、4-二羟基苯乙氧基-8-O-β-D-[6-O-(4-O-β-D-吡喃葡萄糖基)-阿魏酰基]-吡喃葡萄糖苷(6)、榜嘎苷C(7)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖基-(1→2)-[α-L-鼠李糖基-(1→6)]-β-D-甘露糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(8)、槲皮素3-O-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-甘露糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、榜嘎苷A(10)、2-甲氧基-4-羧基-苯基-O-β-D-[6-O-(4-O-β-D-吡喃葡萄糖基)-阿魏酰基]-吡喃葡萄糖苷(11)、槲皮素-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖基]-7-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖苷(12)、槲皮素-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-(4-O-反式-咖啡酰基)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖基]-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(13)。结论化合物11~13为新化合物,分别命名为榜嘎酸A、榜嘎苷E、榜嘎苷F;化合物8为首次从甘青乌头中分离得到,研究结果不仅部分阐明了甘青乌头清热解毒的药效物质基础,而且丰富了天然产物的结构类型。

藏药甘青乌头化学成分研究(Ⅲ)

对藏药甘青乌头全草的化学成分进行研究。采用多种色谱技术进行分离纯化，并通过光谱分析（1D，2D-NMR和MS）及与文献比对的方法鉴定了19个化合物，分别是5-羟甲基糠醛（1），5-乙酰氧基甲基糠醛（2），pyrrolezanthine{5-hydroxymethyl-1-[2-（4-hydroxyphenyl）ethyl]-1H-pyrrole-2-carbaldehyde}（3），lichiol B（4），邻苯二甲酸二丁酯（5），3，4-二羟基苯乙醇（6），3，4-二羟基苯乙醇-β-D-葡萄糖苷（7），红景天苷（8），对羟基苯乙醇（9），对羟基苯甲酸葡萄糖酯苷（10），对羟基苯甲酸（11），天麻苷（12），1-（3，4二甲氧基苯基）-1，2-乙二醇（13），对羟基苯甲醛（14），对羟基苯乙酮（15），3，4-二羟基苯乙醇乙酸酯（16），丁香醛（17），乙基-β-D-吡喃果糖苷（18），对羟基苯甲酸甲酯（19）。化合物 3和4 为首次从该科植物中分离得到，化合物 2，6，9~19 为首次从该属植物中分离得到，化合物 1 和 5 为首次从该植物中分离得到。

藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用研究

目的探讨藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的作用和机制。方法MTT法测定甘青乌头对Vero细胞的毒性,采用细胞病变法和蚀斑法测定甘青乌头体外抗病毒活性,以半数抑制浓度和治疗指数为评价指标;定量荧光PCR法和蚀斑法考察甘青乌头体外抗病毒作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对甘青乌头体内抗单纯疱疹病毒的抗病毒活性进行评价。结果甘青乌头对Vero细胞的半数中毒浓度(CC50)为5.57 g.L-1。细胞病变法和蚀斑法测得甘青乌头的半数有效浓度(EC50)分别为2.25,1.68 g.L-1,治疗指数TI分别为2.47,3.32。LD50值为0.85 g.kg-1。甘青乌头延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。甘青乌头能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性;对病毒吸附到细胞没有抑制作用,能抑制HSV-2大分子的增值。抑制HSV-2 DNA合成的抑制倍数达102。结论甘青乌头体外具有较强的抗HSV-2的活性,抗病毒作用是通过抑制病毒复制循环的各个环节起作用的。

藏药甘青乌头化学成分研究

对甘青乌头Aconitum tanguticum全草的化学成分进行研究。应用硅胶,ODS,Sephadex LH-20,制备HPLC等各种色谱技术进行分离纯化,采用MS,NMR等波谱技术鉴定化合物结构。甘青乌头乙醇总提取物经石油醚、乙酸乙酯萃取后的剩余水溶液经AB-8大孔吸附树脂,依次用水,30%,60%,95%乙醇洗脱,合并回收溶剂分别得到各洗脱部分。从30%,60%乙醇洗脱部分共分离得到19个化合物,分别鉴定为紫丁香苷(1),香草酸4-O-β-D-阿洛糖苷(2),阿魏酸4-O-β-D-阿洛糖苷(3),阿魏酸4-O-β-D-葡萄糖苷(4),芥子酸4-O-β-D-葡萄糖苷(5),4-羟基-肉桂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷(6),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-[α-L-鼠李糖基-(1→6)]-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(7),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-[α-L-鼠李糖基-(1→6)]-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(8),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(9),山柰酚-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→3)-(4-O-反式-对香豆酰基)]-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(10),槲皮素-3-O-[β-D-葡萄糖基-(1→3)-(4-O-反式-对香豆酰基)]-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(11),红景天苷(12),2-(3,4-二羟基苯基)乙醇1-O-β-D-葡萄糖苷(13),(7S,8R)-去氢二松柏醇-9'-O-β-D-葡萄糖苷(14),citrusin B(15),异叶乌头碱(16),tanaconitine(17),山栀苷甲酯(18)和淫羊藿次苷B1(19)。除化合物4,13,16和17外,其余化合物均为首次从甘青乌头中分离得到。

藏药甘青乌头化学成分的研究

目的:研究藏药甘青乌头Aconitum tanguticum的化学成分。方法:采用硅胶,SephadexLH-20凝胶,ODS,制备液相等多种色谱技术进行化合物的分离纯化,通过多种波谱分析方法鉴定化合物结构。结果:从甘青乌头大极性部位分离鉴定了7个化合物,分别为山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(1),山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷(2),山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(3),龙胆苦苷(4),吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(5),二氢吐叶醇-9-O-β-D-葡萄糖苷(6),3,4-二羟基-苯乙醇-β-D-葡萄糖苷(7)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

8种藏药体外抑菌作用研究

目的测定8种清热解毒类藏药异叶青兰、甘青乌头、獐芽菜、乌奴龙胆、五脉绿绒蒿、铁棒锤、蒺藜、兔耳草体外抑菌活性。方法用琼脂扩散法和微量稀释法研究8种清热解毒类藏药体外抑菌活性,以抑菌圈和最小抑菌浓度（MIC）为评价指标。结果藏药水提取物和醇提取物对所选菌种都具有一定的抑制作用,形成抑菌圈直径范围为8~22 cm,MIC范围为1.56~50.00 mg.mL-1。其中异叶青兰和甘青乌头抑菌活性最强,五脉绿绒蒿基本没有抑菌作用。结论8种藏药水提取物,抑菌活性异叶青兰〉甘青乌头〉獐芽菜〉兔耳草〉铁棒锤〉蒺藜〉乌奴龙胆〉五脉绿绒蒿;而对于醇提取物,异叶青兰〉甘青乌头〉铁棒锤〉兔耳草〉蒺藜〉獐芽菜〉乌奴龙胆〉五脉绿绒蒿。