中坝鹅掌叶附子中的生物碱研究Ⅰ

从中坝（今名江油）３种栽培附于（ＡｃｏｎｉｔｕｍｃａｒｍｉｃｈａｅｌｉＤｅｂｘ．）之一的鹅掌叶附子中，分得１０种生物碱化合物，经几种光谱分析鉴定，证明其中２种为已知生物碱次乌头碱（ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ）和新乌头碱（ｍｅｓａｃｏｎｉｔｉｎｅ），还获得一种为新化合物，Ｎ－ＣＨＯＣ＿（１９）－二枯生物碱，命名为ａｌｄｏｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ，后者再由ｈｙｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ经氧化合成确证。

生附子中C_(19)型二萜生物碱的高速逆流色谱分离及其结构鉴定

应用高速逆流色谱法分离制备了生附子中的3个C19型二萜生物碱类化合物。以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶4∶5,v/v/v/v)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,在主机转速850 r/min、流动相流速2.0mL/min、检测波长235 nm条件下进行分离制备;一次性从90 mg附子总碱粗提物中分离制备得到15.3 mg北草乌碱,35.1 mg中乌头碱和22.7 mg次乌头碱,经高效液相色谱分析,测得它们的纯度分别为97.9%、96.2%和99.2%。并应用波谱(电喷雾离子质谱、核磁共振氢谱和核磁共振13 C谱)解析法确定了它们的结构。利用该方法可以对生附子中的二萜类生物碱成分进行快速的分离和纯化。

附子不同组织中生物碱含量的测定

对附子不同组织中乌头总碱和3种双酯型生物碱—新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量进行了测定。用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱的含量;反相高效液相色谱法测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,色谱柱为:Zorbax extend-C18(150 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为乙腈—0.1%乙二胺,梯度洗脱,流速为l mL/min,检测波长为240 nm,柱温30℃。结果表明:附子不同组织中生物碱的含量呈现明显的差异性。子根、茎秆、叶、须根和母根中乌头类总生物碱含量分别为:5.53,3.81,14.77,8.87和4.58 mg/g;3种双酯型生物碱含量在不同组织中的含量顺序为:须根>子根>母根>叶片>茎秆。该研究可为附子资源的综合利用提供科学依据。

附子双酯型生物碱的提取工艺研究

目的:探讨附子中3种双酯型生物碱提取的影响因素,确定适宜的提取条件。方法:采用HPLC法测定中乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量,采用单因素试验法,对附子双酯型生物碱的提取工艺进行研究。结果:最佳双酯型生物碱提取工艺为:在15℃条件下,将附子粗粉置于10倍无水乙醇中冷浸3次,每次1 d,双酯型生物碱收率为0.57%,质量分数为18.81%,其中中乌头碱、乌头碱和次乌头碱收率分别为0.16%、0.032%和0.38%。结论:该提取方法高效、低毒、经济、操作方便,适合工业化生产。