产生几丁质酶的交枝顶孢(Acremonium implicatum)对南方根结线虫生防潜力

由于化学杀线剂给环境带来了污染问题,寄生线虫的生防真菌成为研究热点。为进一步鉴定和筛选高效食线虫真菌,从山东日照五莲烟草北方根结线虫卵中分离到1株较高应用潜力菌株WLE1。根据形态学和rDNA-ITS序列分析方法鉴定该菌为交枝顶孢Acremonium implicatum。该菌是1株能够产生几丁质酶的食线虫真菌,在第4天几丁质酶活性到达高峰,为18.49μmol·h-1·mL-1,直到第16天依然维持较高活性;活性电泳测定其几丁质酶分子量分别为98.0、82.9、70.2和35.9 kDa;交枝顶孢几丁质粗酶液处理南方根结线虫卵,第7天卵的孵化抑制率为80.17%。该菌能够寄生南方根结线虫卵、2龄幼虫和雌虫。第6天卵和2龄幼虫的寄生率分别为82.11%和73.97%。说明具有高效产生几丁质酶特性且能寄生南方根结线虫不同生活史阶段的交枝顶孢WLE1对南方根结线虫具有巨大生防潜力。

交枝顶孢霉杀柑橘全爪螨活性及其生物学特性研究

为了明确交枝顶孢霉Acremonium implicatum CQBBW8的杀螨活性及其生物学特性,采用触杀毒力法检测CQBBW8菌株对柑橘全爪螨的致死率,通过单因素试验测试不同培养基、碳源、氮源、温度、pH及紫外线对CQBBW8菌株生长、产孢及其分生孢子萌发的影响。结果表明,CQBBW8菌株对柑橘全爪螨Panonychus citri(McGregor)的校正致死率为54.42%,LC_(50)为1.2×10~6个/mL,LT_(50)值为5.175 9d。最佳生长和产孢培养基分别为PDA和SEA;菌丝生长最适碳源和氮源为甘露醇和蛋白胨,产孢最适碳源和氮源为可溶性淀粉和氯化铵;最适生长温度为25℃,最适产孢和分生孢子萌发温度为30℃;最适生长和产孢pH为6.0,最适萌发pH为7.0;紫外线对菌丝生长影响不明显,对产孢影响较大,紫外线照射时间越长,孢子萌发率越高。综上,CQBBW8菌株对柑橘全爪螨有较强的毒力,对营养需求不高,环境适应性较强,具有开发为杀螨真菌制剂的潜力。

交织顶孢霉保肝活性物质的研究

利用吸附色谱、凝胶过滤色谱法等方法对交织顶孢霉发酵菌粉水提物中的保肝活性物质进行了分离纯化,根据其理化性质及各种光谱技术对分离到的化合物Ⅰ,化合物Ⅱ进行了结构鉴定。结果表明化合物Ⅰ为腺嘌呤,化合物Ⅱ为尿嘧啶。

不同营养液液体培养对交织顶孢霉形态和胞外多糖的影响

通过改变蔗糖浓度和选用不同的氮源对交织顶孢霉RCEF0260菌株液体发酵工艺进行研究。结果表明,不同的氮源对菌丝体的形态影响显著。以蛋白胨和黄豆粉为氮源时,菌丝较粗,分生孢子较宽,呈卵形、长卵形至椭圆形,且黄豆粉组可见大量分生孢子和具长芽管的孢子;而以硝酸铵为氮源时,菌丝细长,孢子一般较窄,呈梭形。不同浓度的蔗糖对菌丝体的形态影响不大,但对胞外多糖产量的影响显著。另外,不同氮源对菌重的影响显著。

内生真菌交织枝顶孢次生代谢产物及其生物活性（英文）

从番茄内生真菌交织枝顶孢(Acremonium implicatum)中分离到5个次生代谢产物,经理化特性和波谱数据分析鉴定为对羟基苯甲醛(1)、对羟基苯甲酸(2)、吲哚-3-甲醛(3)、5'-O-乙酰胸苷(4)和酵母甾醇(5)。化合物1和2表现出强的抗细菌、抗真菌、抗氧化和抗线虫活性。化合物3对秀丽隐杆线虫和南方根结线虫表现出一定的抑制活性,半抑制浓度(IC50)分别为82.3μg/m L和93.4μg/m L。结果表明对羟基苯甲醛(1)、对羟基苯甲酸(2)、吲哚-3-甲醛(3)是交织枝顶孢中的主要活性成分,为深入研究交织枝顶孢对线虫的生防机制以及该真菌的开发与应用提供了依据。上述化合物均为首次从交织枝顶孢中分离得到。

不同温度下交织顶孢霉对六星黑点豹蠹蛾幼虫的致病力研究

研究了不同温度下交织顶孢霉[Acremonium implicatum(Miller et al.)Gams]对六星黑点豹蠹蛾(ZeuzeraleuconotumButler)幼虫的致病力.分别测试18℃,23℃,28℃,33℃和38℃共5个温度梯度下对六星黑点豹蠹蛾幼虫的感染及致死情况.结果表明:在28℃下,交织顶孢霉对六星黑点豹蠹蛾幼虫的致死效果最好,校正死亡率达到92.9%,致死速率最快,致死中时(LT50)为6天.高于或低于28℃时,交织顶孢霉对六星黑点豹蠹蛾幼虫的侵染效果减弱,死亡率下降,致死速率减慢,LT50均在10天以上.

交枝顶孢发酵液对根结线虫胁迫下番茄防御酶活性的影响

为明确根结线虫胁迫下交枝顶孢发酵液对番茄南方根结线虫的作用机制,采用温室苗期人工接种方式,研究了不同浓度的交枝顶孢发酵液对南方根结线虫胁迫下番茄叶片中保护酶的影响。结果显示,接种60 d后交枝顶孢发酵液处理显著降低番茄根结指数,发酵液原液、发酵液稀释2倍液及发酵液稀释4倍液对南方根结线虫的防效为70.32%、62.18%和47.26%。线虫胁迫条件下不同浓度的交枝顶孢发酵液可显著提高根结线虫胁迫下番茄叶片SOD、POD、CAT、PPO和PAL的活性。交枝顶孢发酵液中次级代谢产物对根结线虫病有显著的防控效果。

根结线虫生防真菌交枝顶孢原生质体的制备与再生体系构建

本研究以根结线虫生防真菌交枝顶孢Acremonium implicatum为供试菌株,探究了菌龄、降解酶种类、酶解温度和时间、不同渗透压稳定剂、不同pH等因素对其原生质体制备的影响,并建立了交枝顶孢原生质体制备体系;制备的原生质体在SR培养基上再生率达到17.78%。此外,GFP遗传转化菌株的获得充分表明制备的原生质体可作为后续遗传转化材料,为进一步研究交枝顶孢对根结线虫的生防机理奠定基础。

湿度对交织顶孢霉孢子萌发及对六星黑点豹蠹蛾致病力的影响

测定在不同湿度下对交织顶孢霉(Acremonium implicatum(Miller et al.)Gams)孢子萌发率及对六星黑点豹蠹蛾(Zeuzera leuconotumButler)幼虫的致病力的影响.结果表明:随着相对湿度的增大,孢子萌发速度、萌发率也增高.相对湿度为100%时,72 h孢子萌发率达到90%以上,相对湿度低于75%时,孢子萌发明显受到抑制.在相对湿度为(95±5)%时,交织顶孢霉对六星黑点豹蠹蛾幼虫的致死效果最好,校正死亡率和僵虫率分别为90.04%和70.00%,此时的致死速率也最快,致死中时(LT50)为6.368 d;相对湿度低于(65±5)%时,六星黑点豹蠹蛾幼虫校正死亡率和僵虫率显著降低,LT50均在20 d以上.