贵州野生葛枣猕猴桃组培快繁体系的建立

【目的】探明贵州野生葛枣猕猴桃组培快繁体系,为优异猕猴桃野生资源繁殖推广和保存利用提供参考。【方法】以葛枣猕猴桃单芽茎段为外植体,对比分析不同激素浓度组合下葛枣猕猴桃单芽茎段离体后诱导培养、增殖培养、生根培养和植株移栽情况,建立组培快繁技术。【结果】葛枣猕猴桃单芽茎段诱导和增殖培养均以MS培养基为基本培养基,添加不同种类和浓度的植物激素组合后腋芽生长情况不同,诱导率、增殖率和增殖系数呈先升后降趋势或下降趋势;生根培养以1/2 MS培养基为基本培养基,随植物激素的种类和浓度不同其生根情况存在一定差异性,在相同浓度(0.25 mg/L)不同种类植物生长素的生根培养基上,猕猴桃单芽茎段在添加IBA的培养基上生根情况最好。野生葛枣猕猴桃最佳单芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,诱导率达87.33%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,增殖系数达4.37;最佳生根培养基为1/2 MS+0.25 mg/L IBA,生根率可达74.00%,主根数8.57条/株,根长3.93 cm;将生根≥3且带有3~5片叶的组培苗进行移栽,移栽成活率达88.60%。【结论】以贵州野生葛枣猕猴桃的带芽茎段为外植体,成功构建葛枣猕猴桃茎段组培快繁体系:诱导培养(MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA)、增殖培养(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)、生根培养(1/2 MS+0.25 mg/L IBA)和移栽培养(生根≥3且带有3~5片叶的组培苗进行移栽),为葛枣猕猴桃组培苗工厂化快速繁育种苗、苗圃资源保存和利用奠定了基础。

红花椒和青花椒主要品质特征指标值的评价

以收集的123份不同产地红花椒和青花椒为试材,结合高效液相色谱法以及色差分析技术,分析测定红花椒和青花椒的颜色、挥发油、麻味物质3个品质特征指标值,借助DPS数据统计软件评价不同种类和不同产地花椒之间的品质差异性和相关性。结果表明:红花椒和青花椒的挥发油与麻味物质含量变异系数均较小(均小于5%),这两个品质特征相对比较稳定;青花椒品质优于红花椒,青花椒挥发油含量均值约为红花椒的2.4倍,分别为5.278ml/100g和2.211ml/100g,而麻味物质含量均值约为红花椒的1.6倍,分别为14.797mg/g和9.390mg/g;红花椒、青花椒的挥发油和麻味物质含量两个特征指标与其颜色四个指标(ΔL、ΔA、ΔB、ΔE)之间无极显著相关性;红花椒挥发油和麻味物质两个指标之间无极显著相关,而青花椒的这两个指标之间有极显著正相关(P≤0.01);不同产地红花椒麻味物质之间不存在显著性差异,而挥发油含量有显著性差异;不同产地青花椒挥发油和麻味物质之间都存在显著性差异。

基于无机元素的花椒产地溯源和品种聚类分析

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法,对红花椒(陕西韩城、四川汉源、四川茂汶、甘肃武都)和青花椒(云南昭通、贵州关岭、四川金阳、四川汉源、重庆江津)9大主产地的80个样品中21个无机元素含量进行测定。采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least squaresdiscriminationanalysis,PLS-DA)对红花椒和青花椒中无机元素进行综合评价,PCA和PLS-DA将80个花椒聚为9组,PLS-DA分类效果更佳,并能将红花椒和青花椒有效区分,从元素组成角度揭示了红花椒和青花椒的亲缘关系和地域分布特征。研究证明多元素分析结合PLS-DA可作为一种花椒品种和产地识别的有效工具,对于产地溯源和品种鉴定具有重要意义。

失水处理对软枣猕猴桃贮藏期间褐变相关因子的影响

为研究失水处理对软枣猕猴桃贮藏中褐变的影响,以软枣猕猴桃为材料,经过失水处理,分析室温(20.0±0.5)℃条件下贮藏过程中果实褐变指数、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、酚类物质和丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:适当失水处理降低了果实褐变指数的上升,推迟了果实PPO和POD活性高峰的出现时间并降低其峰值,抑制了酚类物质降解,在贮藏后期保持较高的CAT活性,减少MDA生成量,延缓果实褐变发生时间。其中以失水6%处理组果实抑制褐变效果最好,有效地延缓褐变的发生时间,贮藏期延长至10d时,褐变指数为55.14%,低于其他处理组。

干旱胁迫对箭叶淫羊藿的影响

目的 研究干旱胁迫对箭叶淫羊藿的影响及其抗旱性。方法 采用分光光度法测定干旱胁迫中植物叶内过氧化物酶 (POD) ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果 随干旱胁迫的增强 ,叶内 POD活性和 MDA含量上升 ,而 SOD活性在 12 d内上升 ,12 d后活性下降。结论 箭叶淫羊藿具有一定的抗旱性 ,栽培一年以上的植株较当年栽培植株抗旱性强。

软枣猕猴桃叶片光系统Ⅱ活性对不同温度的响应

以软枣猕猴桃“魁绿”为试验材料,利用快速叶绿素荧光诱导动力学曲线分析技术（JIP-test）研究了热胁迫处理对植株叶片光系统Ⅱ活性的影响。结果显示：（1）软枣猕猴桃叶片最大光化学效率（Fv/Fm）在35～48 ℃的范围内并没有明显变化,只有当温度升高到52 ℃时才显著下降。（2）随着温度升高,叶绿素荧光诱导动力学曲线中J点和I点的相对可变荧光Vj和Vi呈显著下降趋势,在52 ℃又显著升高,而K点的相对可变荧光Vk则逐渐上升;叶片捕获的激子将电子传递到电子传递链中QA-下游电子受体的概率（ψ0）随着温度升高而逐渐上升,但在52 ℃时显著下降。（3）随着热胁迫时间的延长,Vj和Vi随时间延长而升高,ψ0则下降,电子传递链受体侧受到了严重的抑制。研究表明,高温显著抑制了软枣猕猴桃叶片PSⅡ电子传递链供体侧和受体侧的活性,但PSⅡ的供体侧比受体侧对高温更加敏感;JIP-test测定的相关参数能有效地评价不同温度对软枣猕猴桃光系统活性的影响。

双波长分光光度法测定软枣猕猴中总黄酮的含量

介绍了一种双波长分光光度法,应用于测定软枣猕猴桃中的总黄酮含量,测定波长510nm,参比波长584nm,平均回收率98.63%,结果表明,软枣猕猴桃中总黄酮平均含量为3.42%,该方法稳定可靠,重现性好。

采后适当失水处理对软枣猕猴桃20℃下生理生化变化的影响

【目的】为了探讨失水处理对采后软枣猕猴桃生理生化变化的影响,【方法】以软枣猕猴桃为试验材料,研究了失水率分别为0、2%、4%、6%的软枣猕猴桃,在温度(20±0.5)℃条件下贮藏过程中生理生化变化。【结果】结果表明,适当失水处理可有效抑制软枣猕猴桃果实的呼吸作用,降低呼吸强度和推迟呼吸高峰出现;同时也抑制乙烯的释放量,推迟乙烯高峰和呼吸跃变的到来,并降低其峰值;适当失水处理也明显降低了软枣猕猴桃的果胶酶活性,抑制了果胶的降解,保持了果实硬度和风味,从而延缓软枣猕猴桃果实的成熟和衰老进程。其中以失水4%对软枣猕猴桃保鲜效果最为显著,贮藏至10 d时,腐烂率达37.23%,显著低于其他处理组(P<0.05)。【结论】失水4%处理对软枣猕猴桃具有良好的贮藏保鲜效果。

红花椒和青花椒HPLC指纹图谱的分析

采用HPLC法建立了花椒的高效液相指纹图谱。色谱条件为色谱柱:迪马铂金C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:V(乙腈)∶V(水)=50∶50,流速:0.8 mL/min,检测波长:254 nm,进样量2μL,检测时间:40 min。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》(研究版)提取HPLC图谱共有模式,计算各批次样品的相似度,结果显示,红花椒特征指纹图谱中有11个共有峰,15批红花椒样品中,除一份样本外,其他14批样品相似度均大于0.97,表明不同产地红花椒内在品质相似;青花椒特征指纹图谱中有10个共有峰,18批青花椒样品相似度都很低,相似度为0.52～0.67,表明不同产地青花椒内在品质差异性很大。红花椒相比青花椒在保留时间约30 min处存在一个比较明显的色谱峰,并采用飞行时间质谱对该特征差异色谱峰进行鉴定,推断该物质为不饱和五烯酰胺,即羟基-γ-山椒素或2'-羟基-N-异丁基-2,4,8,10,12-十四烷五烯酰胺及其同分异构体。

花椒与青椒中酰胺类成分的含量比较

比较不同基源花椒药材中酰胺类成分的含量差异。采用高效液相色谱法测定，色谱柱：Hypersil BDS C18（250 mm ×4．6 mm，5μm）；流动相：甲醇-水梯度洗脱；检测波长：268 nm；柱温：40℃；流速：1．0 mL/min。花椒和青椒中酰胺类成分的含量分别为1．038％～1．660％和1．997％～2．777％，青椒中的含量明显高于花椒。不同产地相同基源的花椒药材中酰胺类成分的含量也存在差异。结果表明：遗传背景、生长环境、栽培方式等对花椒药材中酰胺类成分的含量存在较大影响。故应将酰胺类成分的含量纳入花椒药材的质量控制指标，并分别规定其在花椒和青椒中的含量限度，以更好地控制花椒药材的质量。

野生软枣猕猴桃冷藏期间生理变化与叶绿素降解相关性研究

实验对野生软枣猕猴桃冷藏期间生理变化与叶绿素降解进行了相关性分析。结果表明:野生软枣猕猴桃冷藏期间,果实质地变软的同时L*和b*不断下降,与果实显色有密切关系的叶绿素和β-胡萝卜素含量也不断下降,而类黄酮物质含量与果实色度无显著相关,叶绿素酶的活力不断降低而脱镁螯合酶的活力则是先升高后降低,叶绿素含量与叶绿素酶活性呈显著正相关。

野生软枣猕猴桃果醋饮料的研制

以野生软枣猕猴桃为主要原料,经酒精发酵、醋酸发酵后获得果醋,然后与其他配料相混合调配成较高品质的果醋饮料,通过正交试验等实验方法进行优化,确定出最佳工艺条件和配方。

箭叶淫羊藿适宜采收期的研究

目的:通过大田试验研究,比较箭叶淫羊藿不同采收时期产量和质量,确定适宜的采收期。方法:每月采样,测定地上部分生物量;HPLC测定不同采收期淫羊藿叶4种黄酮成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的含量。结果:箭叶淫羊藿3月底含量最高,8月底产量最高。结论:根据箭叶淫羊藿不同采收期的综合评价结果确定其适宜采收期为8月31日前后。

响应面法优化软枣猕猴桃蛋白水解及多肽的抗氧化研究

以酶解产物清除羟基自由基能力为指标,选用碱性蛋白酶为水解酶,利用响应曲面法优化软枣猕猴桃蛋白最佳酶解工艺条件并制取抗氧化肽。考察其水解度和清除率的相关性。结果表明:碱性蛋白酶最佳酶解工艺为温度50℃、pH9、加酶量4000U/g、酶解时间3h,此时水解度达到最大值为25.08%。在此条件下将软枣猕猴桃蛋白分别水解1、2、3、4、5h得到肽混合物进行抗氧化活性分析,得到其对羟自由基清除率分别为18.69%、24.67%、28.0 4%、25.8 2%、26.6 5%。当酶解时间为3h时,此时抗氧化肽的羟自由基清除率最高。

关于中国药典淫羊藿药材定量指标的商榷

目的:通过测定箭叶淫羊藿野生品和栽培品中朝藿定C、淫羊藿苷、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ3种黄酮类成分含量,对中国药典淫羊藿药材定量指标的合理性进行评价。方法:建立HPLC-DAD方法,色谱柱为Alltima C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱;检测波长270 nm。对野生和栽培箭叶淫羊藿及不同干燥方法处理的样品进行分析测定。结果:箭叶淫羊藿各样品中朝藿定C含量最高,达2.0%以上,未检测到淫羊藿苷。结论:中国药典淫羊藿药材以淫羊藿苷为定量指标,箭叶淫羊藿难以达标,造成资源浪费,建议中国药典修订定量指标或将箭叶淫羊藿单列。

箭叶淫羊藿花芽分化过程中多糖和总黄酮的含量变化

目的:研究箭叶淫羊藿在花芽分化时期多糖和总黄酮含量的动态变化。方法:以微波辅助法提取并采用蒽酮-硫酸比色法和分光光度法测定了箭叶淫羊藿在不同的花芽分化时期多糖和总黄酮的含量变化。结果:花芽分化过程中箭叶淫羊藿叶多糖含量呈现出先降低再升高的趋势;茎、须根中多糖含量在花芽分化期内持续降低;而根状茎多糖含量在花芽分化期却保持不变。叶、茎、根状茎中总黄酮含量的变化都发生在生理分化期,其中叶和茎中总黄酮含量在花芽分化时期降低,而根状茎中总黄酮含量升高。须根的黄酮含量则呈现出先上升再下降的趋势。结论:多糖和总黄酮的含量与箭叶淫羊藿的花芽分化有一定关系。

野生软枣猕猴桃总黄酮含量的测定

利用分光光度法,测定了软枣猕猴桃中总黄酮的含量,建立了芦丁浓度-吸光度关系的回归方程。

花椒与青椒HPLC指纹图谱的比较研究

目的:建立花椒与青椒的HPLC指纹图谱,并比较二者的差异。方法:样品用50%甲醇25 mL超声提取15 min,采用HPLC法建立指纹图谱,色谱条件为Hypersil BDS C18(250 mm×4.6 mm5,μm)色谱柱,甲醇-水梯度洗脱,检测波长268 nm,柱温35℃,流量1.0 mL/min,分析时间130 min。分别采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"和SPSS 17.0对谱图进行相似度分析和聚类分析。结果:花椒和青椒HPLC指纹图谱的相似度分别为0.909～0.992、0.930～0.999,二者分别有27和24个共有峰,从标准指纹图谱和聚类分析结果看,二者存在明显差异。结论:本法简单、准确、快捷,可明显区别花椒与青椒,建议将HPLC指纹图谱纳入花椒药材的质量控制指标。

微波辅助提取淫羊藿多糖研究

目的:通过单因素及正交试验研究水浴及微波辅助提取淫羊藿多糖的最佳工艺。方法:以提取物的含糖量为考察指标,采用正交试验法比较微波辅助提取与水浴提取淫羊藿多糖效果。结果:水浴提取淫羊藿多糖的最佳方法为:料液比1∶80,水浴时间60min,水浴温度80℃,浸出液pH为8.0;微波辅助提取淫羊藿多糖最佳试验方案为:料液比1∶60,微波强度700W,微波时间4min,浸提液pH为8.0。结论:微波辅助提取淫羊藿多糖平均含量为1.8%,水浴法提取平均含糖量为1.2%,多糖提取率提高了47.1%,微波辅助提取法优于水浴提取法。

软枣猕猴桃果实发育与营养成分变化规律研究

以软枣猕猴桃[Actinidia arguta(Sieb.et Zucc)Planch.ex Miq.]桓优一号为试验材料,研究果实发育过程中果实鲜重、果实干物质含量及各种营养指标的变化特征。结果表明,随着果实的生长发育,果实鲜重和干物质含量同步逐渐增加,前期增加迅速,后期增加缓慢。全氮含量前期快速增加,后期逐渐下降。全磷、全钾、全钙的积累主要在果实发育的前期,后期总体呈下降趋势;全镁的含量总体呈缓慢上升趋势。总酸含量先上升后下降。pH先下降后上升。总固形物含量逐渐增加。维生素C含量初期较高,以后呈下降趋势。