桂枝汤有效部位A对下丘脑热休克蛋白含量的影响

目的 :研究桂枝汤有效部位A(Fr.A)在双向调节体温的同时对下丘脑热休克蛋白 (HSP)的影响。方法 :取高、低体温大鼠下丘脑组织 ,应用蛋白印迹法测定热休克蛋白含量。结果 :Fr.A在双向调节体温的同时 ,可明显拮抗安痛定性低体温大鼠下丘脑HSP70含量的降低 ,对酵母性高体温大鼠下丘脑HSP70含量具有一定的降低作用。结论 :Fr.A对高、低体温大鼠下丘脑HSP70含量的调节作用是其双向调节体温的机理之一。

桂枝汤有效部位A对体温双向调节作用及其机理研究*——对下丘脑NE、DA、5-HT含量的影响

在酵母诱导的发热大鼠中，桂枝汤有效部位Ａ（Ｆｒ．Ａ）能降低下丘脑５－ＨＴ、ＮＥ、ＤＡ含量；在安痛定诱导的低体温大鼠中，能升高５－ＨＴ含量。结果提示，Ｆｒ．Ａ为桂枝汤体温双向调节作用的一种物质基础，影响中枢神经递质５－ＨＴ的水平是其机理之一；

桂枝汤A部分指纹图谱的确定及比较(一)

本文利用液质技术对桂枝汤A部分的双向调节样品与单向升温样品进行了指纹图谱的确定。应用质谱中质荷比(M Z)值及HPLC图峰响应比比较了两者的差异 。

桂枝汤有效部位A对体温双向调节作用机理研究——对下丘脑和隔区AVP及下丘脑NT含量的影响

在酵母诱导的发热大鼠中，桂枝汤有效部位Ａ（Ｆｒ．Ａ）能降低隔区ＡＶＰ和下丘脑ＮＴ含量，对下丘脑ＡＶＰ含量无影响；在安痛定诱导的低体温大鼠中，Ｆｒ．Ａ能提升下丘脑、隔区ＡＶＰ含量和下丘脑ＮＴ含量。结果提示，Ｆｒ．Ａ对发热动物的解热作用与影响下丘脑ＮＴ和隔区ＡＶＰ的释放有关；抑制中枢ＡＶＰ和ＮＴ的释放或利用参予Ｆｒ．

桂枝汤有效部位A对体温的双向调节作用及其机理研究——对大鼠下丘脑PGE_2含量的影响

在酵母诱导的发热大鼠中，桂枝汤有效部位Ａ可使下丘脑前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）水平下降；在安痛定诱导的低体温大鼠，则使ＰＧＥ２水平升高。

补阳还五汤有效部位对局灶性脑缺血再灌注后caspase表达的作用

目的研究补阳还五汤中4类有效部位抗脑缺血再灌注损伤作用是否是通过抑制脑组织cas- pase表达而实现的。方法采用大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血模型,缺血2 h再灌注46 h,分别于缺血前和缺血后12、24、36 h给予由补阳还五汤提取的生物碱、苷、多糖和苷元,以尼莫地平为对照药。以免疫组化法检测caspase-1、caspase-3、caspase-8蛋白表达。结果脑缺血再灌注后,缺血侧脑组织caspase-1、caspase- 3蛋白表达增强,caspase-1主要表达在脉络膜,caspase-3在海马、皮质和髓质均有表达。补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元均可抑制caspase-1表达,尼莫地平对caspase-1表达无显著影响。生物碱可抑制海马和髓质区caspase-3表达,苷和苷元可抑制海马、皮质和髓质caspase-3表达,尼莫地平可抑制海马和髓质caspase-3表达,而多糖对其无显著影响。各组caspase-8表达均无显著差异。结论补阳还五汤中生物碱、苷、多糖和苷元可能通过抑制caspase-1表达,减少炎性细胞因子的产生,从而对抗缺血后炎症反应。生物碱、苷和苷元可能通过抑制caspase-3表达,抑制缺血后神经元凋亡,从而对抗神经元迟发性死亡。生物碱、苷、多糖和苷元可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的主要物质基础。

桂枝汤有效部位B对胃肠运动双向调节作用的实验研究Ⅵ—对cAMP、蛋白激酶A和C活性的影响

目的:探讨桂枝汤有效部位B(Fr.B)对胃肠运动双向调节的作用机理。方法:应用放射免疫法测定阿托品致胃肠运动受抑或新斯的明致胃肠运动亢进大鼠下丘脑及胃肠组织cAMP含量、PKA和PKC活性。结果:对阿托品致胃肠运动受抑大鼠,Fr.B可拮抗下丘脑和空肠组织cAMP含量及PKA、PKC活性的降低,对胃窦组织PKA活性的降低也具拮抗作用;对新斯的明致胃肠运动亢进大鼠,Fr.B可升高胃窦组织PKA活性、下丘脑和空肠组织PKC活性,对cAMP含量无明显影响。结论:Fr.B对胃肠运动的双向调节与其影响下丘脑及胃肠局部组织中cAMP含量和蛋白激酶活性有关。

桂枝汤有效部位A对IL-1刺激的大鼠脑微血管内皮细胞前列腺素E_2及其主要信号转导元件的影响

目的:探讨桂枝汤解热有效部位A(Fr.A)对IL-1刺激的大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)PGE2信号转导通路主要元件的影响。方法:制备大鼠含药血清,通过放射免疫法测定PGE2含量,酶反应底物法测定PLA2活性,ELISA法测定COX活性,比色法测定NO含量。结果:Fr.A含药血清处理rCMEC后,在IL-1刺激下,孵育液中PGE2和NO含量、总COX和COX-2活性均显著减低,对升高的sPLA2活性无明显影响。结论:Fr.A可通过影响PGE2信号转导通路主要元件COX及NO,进而影响PGE2水平。

六味地黄汤活性部位3A的免疫调节作用机理研究

目的 :对六味地黄汤活性部位 3A的免疫调节作用机理进行初步研究。方法 :观察 3A对环磷酰胺 (Cy)处理小鼠 ,荷瘤小鼠和快速老化小鼠的T细胞亚群 ,B细胞产生IgG水平 ,γ干扰素 (IFN γ)mR NA的表达水平的影响及体外活性研究。结果 :口服给予 3A对 3种模型小鼠脾脏T细胞亚群的变化均具有不同程度的恢复作用 ,并促进快速老化小鼠脾细胞分泌IgG ,提高Cy处理小鼠脾细胞IFN γmRNA的表达水平。结论 :3A对免疫功能的改善作用与调节T。

补阳还五汤及有效部位生物碱和苷对动脉血栓形成大鼠血浆血栓素A_2、前列环素的影响

目的:探讨补阳还五汤及其有效部位生物碱和苷对大鼠动脉血栓形成及血浆血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)的影响。方法:对颈总动脉血栓模型大鼠分别给予补阳还五汤原方、生物碱、苷、低分子肝素和抵克利得,比较各组动脉血栓重量和血浆TXB26、-keto-PGF1α的变化。结果:模型组可形成闭塞性血栓,TXB2升高(P<0.05),6-kcto-PGF1α降低(P<0.05)。各药均可使血栓重量减轻。原方可使6-keto-PGF1α升高(P<0.05),而对TXB2无显著影响。生物碱可降低TXB2(P<0.05),升高6-keto-PGF1α(P<0.05)。苷、低分子肝素和抵克利得对TXB2和6-keto-PGF1α均无显著影响。结论:补阳还五汤原方、生物碱、苷、低分子肝素和抵克利得均有抗血栓作用。原方的作用与促进PGI2合成有关;生物碱的作用与抑制TXA2合成、促进PGI2合成有关。而苷、低分子肝素和抵克利得不是通过调节TXA2和PGI2合成发挥作用的。

补阳还五汤四类有效部位对大鼠脑缺血再灌注后Caspase表达的作用

目的:研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3)蛋白表达的变化,探讨补阳还五汤四类有效部位对它的影响。方法:采用线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)后脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱组、苷组、苷元组、多糖组和尼莫地平对照组,采用免疫组化法测定脑组织Caspase-1、Caspase-3蛋白表达的变化。结果:脑缺血2 h再灌注46 h后,在脉络膜可以见到Caspase-1表达增强,生物碱、苷、多糖、苷元可以抑制Caspase-1表达;在海马区、皮质区和髓质区均可见到Caspase-3蛋白表达增强,生物碱、苷、苷元和尼莫地平可以抑制Caspase-3表达。结论:补阳还五汤具有抗大鼠脑缺血再灌注损伤的作用,生物碱、苷、多糖和苷元可能为其抗缺血性脑损伤的主要物质基础,其作用机制可能与抑制Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,拮抗脑缺血后神经元凋亡有关。

桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠TNF-α与RANKL表达的影响

目的:观察桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠血清中TNF-α与关节滑膜组织RANKL表达的影响,并初步探讨其治疗机制。方法:以弗氏完全佐剂诱导产生免疫性关节炎模型,用不同剂量桂枝芍药知母汤(GSZ汤20.6 g/kg、10.3 g/kg)给模型动物灌胃用药,观察用药后动物血清TNF-α水平与致炎对侧膝关节滑膜组织RANKL表达。结果:桂枝芍药知母汤用药4周后,可明显增加模型大鼠体重增长速度,减轻关节肿胀程度(P<0.05 orP<0.01);使模型大鼠血清TNF-α水平降低(P<0.01)以及滑膜组织RANKL表达下降(P<0.01),本实验条件下,GSZ汤20.6g/kg剂量时的疗效与MTX相当。结论:桂枝芍药知母汤对免疫性关节炎大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制TNF-α分泌,降低RANKL表达有关。

补阳还五汤有效部位对脑缺血再灌注大鼠IL-1β和ICAM-1表达的作用

目的探讨补阳还五汤有效部位对大脑局灶性脑缺血后再灌注大鼠脑组织IL—1β和ICAM—1表达的作用。方法采用大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,检测脑组织IL—1β和ICAM—1的表达。结果脑缺血2 h再灌注46 h后,模型组海马及髓质区IL—1β表达阳性细胞数显著增加(P<0.05,P<0.01),海马及皮质区ICAM—1表达阳性细胞数显著增多(P<0.01,P<0.05);补阳还五汤有效部位生物碱可使髓质区IL—1β阳性细胞数显著减少(P<0.01);苷可使皮质区ICAM—1β阳性细胞数显著减少(P<0.01)。结论脑缺血再灌注后,脑组织IL—1β和ICAM—1表达增加,补阳还五汤有效部位生物碱和苷可分别抑制髓质部位IL—1β蛋白表达及皮质区ICAM—1蛋白表达,提示生物碱和苷可能是补阳还五汤抗脑缺血后炎症反应的部分物质基础。

桂枝乌苓方加减内服外熨法治疗中风后痰瘀阻络型肩手综合征的临床观察

目的:观察桂枝乌苓方加减内服外熨法治疗中风后痰瘀阻络型肩手综合征的临床效果。方法:选取60例诊断为中风后痰瘀阻络型肩手综合征的患者为观察对象,随机分成对照组和观察组。2组均接受常规治疗,观察组加用桂枝乌苓方加减内服外熨法治疗,疗程为4周,评估治疗前后2组的疼痛评分量表(VAS)、上肢功能量表(FMA)、日常活动能力量表(MBI)及中医症候积分的变化。结果:观察组和对照组各自前、后VAS、FMA、MBI、中医症候积分比较,P=0.000<0.05,观察组计分均优于对照组,表明2组治疗都趋向好转,而观察组好转程度较对照组明显。2组均治疗有效,观察组总有效率93.33%与对照组总有效率73.33%比较明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在常规治疗的基础上,桂枝乌苓方加减内服外熨法治疗中风后痰瘀阻络型肩手综合征患者能提高疗效,缓解疼痛,改善上肢功能及日常活动能力。

桂枝汤有效部位A对下丘脑热休克蛋白含量的影响

目的 :研究桂枝汤有效部位A(Fr.A)在双向调节体温的同时对下丘脑热休克蛋白 (HSP)的影响。方法 :取高、低体温大鼠下丘脑组织 ,应用蛋白印迹法测定热休克蛋白含量。结果 :Fr.A在双向调节体温的同时 ,可明显拮抗安痛定性低体温大鼠下丘脑HSP70含量的降低 ,对酵母性高体温大鼠下丘脑HSP70含量具有一定的降低作用。结论 :Fr.A对高、低体温大鼠下丘脑HSP70含量的调节作用是其双向调节体温的机理之一。

六味地黄汤免疫调节活性成分化学分离的药理学导向评价

目的 :为定向追踪分离六味地黄汤发挥免疫调节作用的活性成分进行导向评价。方法 :运用化学与药理学密切合作的研究方法 ,以环磷酰胺 (Cy)处理小鼠为模型 ,抗体生成反应为活性评价指标 ,对每一步化学分离所得组分进行活性评价 ,确定活性部位。结果 :六味地黄汤及其醇溶、醇沉部分对Cy所致抗体生成反应低下具有明显的改善作用 ;后二者活性均高于其母体水煎剂 ;其中醇沉部分活性较醇溶部分强。醇沉部分又以活性炭柱层析所得组分CA4活性最强。结论 :六味地黄汤醇沉部分发挥免疫调节作用的主要活性成分来源于CA4,其主要由酸性多糖组成。

四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤作用

目的 考察四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤的作用。方法 实验动物随机分为正常组、模型组、四逆汤组、四逆汤有效部位组。大鼠心脏进行Langendorff灌流，通过控制灌流液流量建立心肌缺血-再灌注损伤模型，用药组在灌流液中加入相应药液，测定再灌注后50rain的冠脉流量、心肌收缩力和再灌注1min内心律失常发生率。小鼠ig给药3d后ip垂体后叶素（20U／kg）造模，记录0～8min的心电图，并取心肌测SOD活性、MDA及LA水平。结果 四逆汤和四逆汤有效部位均可不同程度地提高大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌收缩力恢复率、降低再灌注1min心律失常发生率，四逆汤有效部位对心肌收缩力的恢复作用较好，四逆汤对心律失常发生的抑制较好；四逆汤和四逆汤有效部位均可明显地降低小鼠心肌缺血-再灌注损伤过程中的心电图J点抬高，明显提高心肌组织SOD活性，降低MDA和LA水平，四逆汤和四逆汤有效部位作用无明显差异。结论 四逆汤有效部位可以显著地改善心肌缺血-再灌注损伤过程中的氧化损伤和抑制无氧酵解，改善心肌收缩功能和心律失常。

HPLC法测定桂枝茯苓丸有效部位中苦杏仁苷、芍药苷的含量

目的建立测定桂枝茯苓丸有效部位中苦杏仁苷、芍药苷质量分数的方法。方法采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-水（体积比35∶65）;流速为1.0 m L·min^-1;检测波长为215 nm;柱温为30℃。结果苦杏仁苷和芍药苷的线性范围分别为0.354～7.088μg·m L^-1（r=0.999 5）和0.356～7.128μg·m L^-1（r=0.999 7）,平均回收率分别为98.48%（RSD=1.47%）和99.06%（RSD=1.49%）。结论本方法专属性强、操作简便,适用于桂枝茯苓丸中有效部位的质量控制。

补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影响

目的研究补阳还五汤(BYHWD)中生物碱、多糖、苷、苷元4类有效部位对大脑中动脉闭塞(MCAO)后局灶性脑缺血大鼠脑梗死的作用。方法用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,检测脑梗死体积,并比较其神经功能行为评分。结果脑缺血6h,模型组脑梗死体积显著增大(P<0.01),神经功能行为评分显著升高(P<0.01);生物碱、多糖、苷、苷元各组脑梗死体积较模型组缩小(P<0.05、0.01);生物碱、苷、苷元和多糖可使MCAO大鼠神经功能行为评分下降(P<0.05、0.01),其中以生物碱和苷的作用较强。结论MCAO后,大鼠脑组织出现梗死,补阳还五汤4类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元能减少脑梗死体积,改善脑缺血后神经行为症状。生物碱和苷的抗脑缺血作用较强,这可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的部分物质基础。

桂枝汤方剂不同提取部位免疫抑制活性的考察

目的筛选桂枝汤方剂免疫抑制活性部位。方法处方药材分别水煎浓缩为水提部位,乙醇提取为乙醇提取部位。同时将乙醇部位分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取得石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部和正丁醇部位。CCK-8法考察桂枝汤不同提取物对Con A激活T细胞和LPS激活B细胞增殖的抑制作用。同时用二硝基氯苯对昆明种小鼠皮肤致敏和诱发,制成迟发型超敏反应模型,观察桂枝汤方剂不同部位对迟发型超敏反应的干预作用。结果桂枝汤方剂水提物、乙醇提取物、石油醚萃取部位有显著免疫抑制功效,乙醇和石油醚提取物效果最佳。浓度200 mg·L-1时T细胞增殖抑制率分别为48.3%、45.9%,B细胞抑制率大于30%。乙醇提取物、石油醚萃取部位对迟发型超敏反应小鼠耳廓肿胀有显著抑制作用,对胸腺和脾脏无明显影响。结论桂枝汤方剂乙醇提取物和石油醚萃取物为免疫抑制活性部位,能显著抑制T细胞和B细胞的增殖,抑制小鼠耳廓肿胀,对正常细胞、胸腺、脾脏无毒性。