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Ad-PTEN增强LY294002对人胶质瘤细胞系U251的生长抑制作用
被引量:
2
1
作者
刘哲
李文良
+3 位作者
康春生
宋云朋
韩磊
张安玲
《实用肿瘤学杂志》
CAS
2010年第1期1-7,44,共8页
目的在体外实验中,利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad—PTEN)和P13K的小分子抑制剂LY294002联合抑制P13K/AKT信号通路,观察两者联合对人胶质瘤细胞系U251生长有无正向协同作用及探讨产生这种作用的机制。方法15251细胞按处理...
目的在体外实验中,利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad—PTEN)和P13K的小分子抑制剂LY294002联合抑制P13K/AKT信号通路,观察两者联合对人胶质瘤细胞系U251生长有无正向协同作用及探讨产生这种作用的机制。方法15251细胞按处理方式不同分为4组:DMSO对照组、空载病毒对照组、LY294002组和联合组(LY294002+Ad—PTEN组)。在U251细胞系中导入LY294002并转染Ad—PTEN病毒后,提取总蛋白,用Westernblotting检测PTEN表达状态及P13K、AKT表达情况;用MTT法检测Ad—PTEN和LY294002对U251生长抑制率、流式细胞仪检测细胞周期、AnnexinV法检测细胞凋亡,观察导人LY294002和转染Ad—PTEN后U251增殖能力的改变;用划痕实验、Transwell实验观察LY294002及Ad—PTEN对U251迁移和侵袭能力的影响;Westernblotting检测P13K/AKT信号通路下游相关蛋白表达水平变化。结果Westernblotting显示:与DMSO组和空载病毒组相比,LY294002组P13K、AKT蛋白表达水平明显降低,联合组(LY294002+Ad—PTEN)的WEN蛋白明显上调,而P13K、AKT蛋白下降水平比LY294002组更为显著。联合组与LY294002组、空载病毒组、DMSO组相比细胞周期阻滞在G0/G1期;联合组凋亡率比其他三组明显增加;自培养第2天起,联合组细胞增殖速率呈下降趋势。联合组侵袭和迁移细胞的相对数少于LY294002组、空载病毒组和DMSO组。Westernblotting结果证明位于P13K/AKT下游的MMP-2、MMP-9、PCNA、Bcl-2、CyclinD1、NF—KB、FAK蛋白表达水平显著下调。结论小分子抑制剂LY294002能够有效抑制U251中P13K、AKT蛋白的表达,联合转染Ad—PTEN后不仅能提高PTEN蛋白的表达水平,对P13K、AKT的抑制更为显著。在体外实验中,联合Ad—PTEN和LY294002能够有效地通过阻滞细胞周期、减少细胞凋亡来抑制U251的增殖能力,并能够抑制细胞的侵袭和迁移能力,两者联合使用具有正向协同作用。联合Ad—PTEN和LY294002对U251的生长与侵袭的抑制作用与P13K/AKT下游的MMP-2、MMP-9、PCNA、Bcl-2、CyclinD1、NF—KB、FAK蛋白表达水平下调有关。联合腺病毒转染技术和小分子抑制剂调控P13K/AKT信号通路是治疗胶质瘤的新途径。
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关键词
携带野生型
pten
的重组腺病毒
P13K抑制剂
LY294002
P13K/AKT
胶质瘤
下载PDF
职称材料
重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN抑制肝癌细胞增殖
2
作者
姚雷
曹婧媛
+4 位作者
吴鹏飞
黄玉洪
王金志
杨吉成
缪竞诚
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011年第9期976-979,共4页
目的用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验其对细胞的作用。方法用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果。用扩增得到的Ad-ING4和Ad...
目的用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验其对细胞的作用。方法用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果。用扩增得到的Ad-ING4和Ad-PTEN感染SMMC-7721细胞,流式细胞术及MTT检测作用效果。结果空腺病毒组的凋亡率为3.4%±1.3%,Ad-ING4组和Ad-PTEN组分别为49.7%±4.8%和11.4%±3.2%,均显著高于空腺病毒组(P〈0.01);Ad-ING4组和Ad-PTEN组的细胞增殖在48~96 h时较正常组明显下降(P〈0.05)。结论 Ad-ING4和Ad-PTEN对SMMC-7721细胞均有显著抑制作用,尤其是Ad-ING4。
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关键词
肝癌
ad
-
ING4
ad
-
pten
基因
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职称材料
题名
Ad-PTEN增强LY294002对人胶质瘤细胞系U251的生长抑制作用
被引量:
2
1
作者
刘哲
李文良
康春生
宋云朋
韩磊
张安玲
机构
天津医科大学天津市肿瘤医院脑系科
天津医科大学总医院神经外科
出处
《实用肿瘤学杂志》
CAS
2010年第1期1-7,44,共8页
基金
基金项目:教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-07-0615)
天津市科委应用基础及前沿技术研究计划(09JCZDJC17600)
文摘
目的在体外实验中,利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad—PTEN)和P13K的小分子抑制剂LY294002联合抑制P13K/AKT信号通路,观察两者联合对人胶质瘤细胞系U251生长有无正向协同作用及探讨产生这种作用的机制。方法15251细胞按处理方式不同分为4组:DMSO对照组、空载病毒对照组、LY294002组和联合组(LY294002+Ad—PTEN组)。在U251细胞系中导入LY294002并转染Ad—PTEN病毒后,提取总蛋白,用Westernblotting检测PTEN表达状态及P13K、AKT表达情况;用MTT法检测Ad—PTEN和LY294002对U251生长抑制率、流式细胞仪检测细胞周期、AnnexinV法检测细胞凋亡,观察导人LY294002和转染Ad—PTEN后U251增殖能力的改变;用划痕实验、Transwell实验观察LY294002及Ad—PTEN对U251迁移和侵袭能力的影响;Westernblotting检测P13K/AKT信号通路下游相关蛋白表达水平变化。结果Westernblotting显示:与DMSO组和空载病毒组相比,LY294002组P13K、AKT蛋白表达水平明显降低,联合组(LY294002+Ad—PTEN)的WEN蛋白明显上调,而P13K、AKT蛋白下降水平比LY294002组更为显著。联合组与LY294002组、空载病毒组、DMSO组相比细胞周期阻滞在G0/G1期;联合组凋亡率比其他三组明显增加;自培养第2天起,联合组细胞增殖速率呈下降趋势。联合组侵袭和迁移细胞的相对数少于LY294002组、空载病毒组和DMSO组。Westernblotting结果证明位于P13K/AKT下游的MMP-2、MMP-9、PCNA、Bcl-2、CyclinD1、NF—KB、FAK蛋白表达水平显著下调。结论小分子抑制剂LY294002能够有效抑制U251中P13K、AKT蛋白的表达,联合转染Ad—PTEN后不仅能提高PTEN蛋白的表达水平,对P13K、AKT的抑制更为显著。在体外实验中,联合Ad—PTEN和LY294002能够有效地通过阻滞细胞周期、减少细胞凋亡来抑制U251的增殖能力,并能够抑制细胞的侵袭和迁移能力,两者联合使用具有正向协同作用。联合Ad—PTEN和LY294002对U251的生长与侵袭的抑制作用与P13K/AKT下游的MMP-2、MMP-9、PCNA、Bcl-2、CyclinD1、NF—KB、FAK蛋白表达水平下调有关。联合腺病毒转染技术和小分子抑制剂调控P13K/AKT信号通路是治疗胶质瘤的新途径。
关键词
携带野生型
pten
的重组腺病毒
P13K抑制剂
LY294002
P13K/AKT
胶质瘤
Keywords
ad - pten
PI3 K
-
inhibitor
LY294002
PI3 K/AKT
Glioma
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN抑制肝癌细胞增殖
2
作者
姚雷
曹婧媛
吴鹏飞
黄玉洪
王金志
杨吉成
缪竞诚
机构
苏州大学医学部附属第一医院
苏州大学医学部细胞与分子生物教研室
出处
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011年第9期976-979,共4页
基金
国家级大学生创新性实验计划项目(SG315859)
文摘
目的用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验其对细胞的作用。方法用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果。用扩增得到的Ad-ING4和Ad-PTEN感染SMMC-7721细胞,流式细胞术及MTT检测作用效果。结果空腺病毒组的凋亡率为3.4%±1.3%,Ad-ING4组和Ad-PTEN组分别为49.7%±4.8%和11.4%±3.2%,均显著高于空腺病毒组(P〈0.01);Ad-ING4组和Ad-PTEN组的细胞增殖在48~96 h时较正常组明显下降(P〈0.05)。结论 Ad-ING4和Ad-PTEN对SMMC-7721细胞均有显著抑制作用,尤其是Ad-ING4。
关键词
肝癌
ad
-
ING4
ad
-
pten
基因
Keywords
hepatocarcinoma
ad
-
ING4
ad
-
pten
gene
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ad-PTEN增强LY294002对人胶质瘤细胞系U251的生长抑制作用
刘哲
李文良
康春生
宋云朋
韩磊
张安玲
《实用肿瘤学杂志》
CAS
2010
2
下载PDF
职称材料
2
重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN抑制肝癌细胞增殖
姚雷
曹婧媛
吴鹏飞
黄玉洪
王金志
杨吉成
缪竞诚
《基础医学与临床》
CSCD
北大核心
2011
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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