Ad-ING4抑制裸鼠人肝癌移植瘤生长的体内实验研究

目的研究携带ING4基因的重组腺病毒(Ad-ING4)对人肝癌细胞株SMMC-7721移植瘤生长的抑制作用及其潜在的分子机制。方法将扩增的Ad-ING4感染SMMC-7721细胞,Western blot法检测Ad-ING4在SMMC-7721细胞中的转录。用SMMC-7721细胞建立裸鼠人肝癌移植瘤模型,予Ad-ING4(1×109pfu/ml)50μl对移植瘤瘤体注射治疗,观察肿瘤生长变化;3周后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;免疫组化法检测p21、COX-2、Fas、Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF、CD34等因子的表达。结果 Ad-ING4在SMMC-7721细胞中成功表达;Ad-ING4对裸鼠人肝癌移植瘤有明显的生长抑制作用,Ad-ING4组瘤体显著减小(P<0.01),抑瘤率达41.64%;免疫组化检测显示,Ad-ING4抑癌的分子机制可能与上调p21、Fas、Bax和Caspase-3的表达及下调COX-2、Bcl-2、VEGF和CD34的表达有关。结论 Ad-ING4能有效抑制SMMC-7721裸鼠人肝癌移植瘤的生长,其机制可能通过抑制肿瘤细胞生长、血管形成和激活细胞凋亡等多个途径共同发挥抑癌效应。

重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN抑制肝癌细胞增殖

目的用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染人肝癌SMMC-7721细胞,检验其对细胞的作用。方法用构建好的重组腺病毒Ad-ING4和Ad-PTEN感染QBI-293A细胞,对病毒进行扩增并测定其效价,荧光显微镜下观察感染效果。用扩增得到的Ad-ING4和Ad-PTEN感染SMMC-7721细胞,流式细胞术及MTT检测作用效果。结果空腺病毒组的凋亡率为3.4%±1.3%,Ad-ING4组和Ad-PTEN组分别为49.7%±4.8%和11.4%±3.2%,均显著高于空腺病毒组（P〈0.01）;Ad-ING4组和Ad-PTEN组的细胞增殖在48~96 h时较正常组明显下降（P〈0.05）。结论 Ad-ING4和Ad-PTEN对SMMC-7721细胞均有显著抑制作用,尤其是Ad-ING4。

Ad-ING4对人胃癌AGS细胞凋亡及其p53基因表达的影响

目的探讨腺病毒介导的肿瘤生长抑制因子4(Ad-ING4)在体外对人胃癌AGS细胞凋亡的作用及其p53基因表达的影响。方法不同浓度(80、160、320ng/ml)的Ad-ING4作用人胃癌AGS细胞48h后,用Annexin V-FITC检测细胞凋亡率,RT-PCR检测p53 m RNA的表达,免疫印迹法检测p53蛋白表达水平,并与对照组进行比较。结果凋亡检测发现,不同浓度Ad-ING4可明显诱导人胃癌AGS细胞凋亡,并呈浓度依赖性(P<0.05);Ad-ING4作用前AGS细胞p53 m RNA和p53蛋白表达水平较低,不同浓度Ad-ING4作用后p53 m RNA和p53蛋白表达水平明显上调,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论随Ad-ING4作用浓度增高,人胃癌AGS细胞出现明显凋亡,其机制可能与p53基因转录活性增强有关。

Ad-ING4抑制人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长

目的研究腺病毒介导的ING4基因(Ad-ING4)对肺癌体内外的抑制作用及其潜在的分子机制。方法体外采用50 MOI的Ad-ING4感染A549肺癌细胞,并用MTT法检测Ad-ING4对A549细胞的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡率。采用A549细胞株建立人肺癌裸鼠模型,瘤体局部注射干预用药,每隔5天测量一次肿瘤体积,并计算瘤重抑瘤率;瘤块免疫组化检测ING4、生存素(survivin)、CD34、HIF-1等基因的表达。结果Ad-ING4感染A549细胞抑制率可达47.62%;72 h凋亡率为18.5%;荷瘤裸鼠经治疗后,Ad-ING4组和顺铂(DDP)组的肿瘤体积、瘤重均明显缩小,其抑瘤率分别达到42.43%和46.47%,DDP组出现不良反应;免疫组化检测Ad-ING4组和DDP组与对照组比较,生存素、CD34、HIF-1的表达下调(P<0.01)。结论Ad-ING4对人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用。其抑瘤机制可能与下调生存素、CD34、HIF-1的基因表达进而诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成等有关。

宝马BW 203 AD-4型双钢轮振动压路机

于近期投放中国市场的德国“宝马”4系列双钢轮振动压路机秉承了2系列振动压路机的全部优点．其主要特点如下：

品味经典 宝马格BW203 AD-4型双钢轮振动压路机

作为压实机械的世界领军企业,宝马格公司在国内市场向来比较低调,但＂酒香不怕巷子深＂,多年来,宝马格凭借良好的口碑还是得到了国内广大用户的高度认可。其中,压路机名气最大的恐怕就是BW203 AD-4型双钢轮振动压路机了。

ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响

目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。

腺病毒介导的ING4对裸鼠人骨肉瘤移植瘤的生长抑制作用

目的:研究腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法:将本室构建好的重组腺病毒表达载体Ad-ING4,经QBI-293A细胞感染多轮扩增后获得高效价重组病毒子以用于肿瘤基因治疗试验,首先建立MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤裸鼠模型,然后将15只荷瘤裸鼠随机分为阴性对照组(PBS组)、空载体对照组(Ad-GFP组)、Ad-ING4实验组(Ad-ING4组),3组均使用瘤体内注射干预用药,隔日一次,共5次。分别于用药前和用药后测量皮下瘤的体积,治疗开始后的第15天将裸鼠脱颈处死,摘取瘤体称重,计算抑瘤率。HE染色观察移植瘤细胞形态,免疫组化法检测瘤体中Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF、CD34细胞因子的表达。结果:获得了高滴度(109pfu/ml)的重组腺病毒Ad-ING4;经瘤体基因治疗后,Ad-ING4组与PBS组及Ad-GFP组相比,可以明显抑制裸鼠MG-63人骨肉瘤细胞移植瘤生长,瘤重抑制率可达59.3%,移植瘤组织中可出现典型的细胞凋亡、坏死现象,其分子机制可能与Ad-ING4明显上调瘤体中促进凋亡的细胞因子Bax、Caspase-3的表达,下调抑制凋亡因子Bcl-2及血管形成细胞因子VEGF、CD34的表达有关。结论:Ad-ING4可以显著抑制MG-63人骨肉瘤细胞荷瘤生长,其机制可能通过激活细胞凋亡和抑制血管形成等途径来发挥抑瘤作用。

RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响

目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(Ad.RGD-ING4)及腺病毒空载体(Ad.RGD-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平。采用CNE细胞株来建立15只人鼻咽癌裸鼠模型,分为PBS组、Ad.RGD-GFP及Ad.RGD-ING4组,每组5只。分别对瘤体内局部注射相应的干预用药,动态测量肿瘤体积,免疫组化检测Caspase-3基因的表达。结果 CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72 h后,ING4在CNE细胞中过表达,Ad.RGD-ING4组肿瘤体积明显小于PBS组及Ad.RGD-GFP组(P<0.01),免疫组化结果显示Ad.RGD-ING4组比其余两组Caspase-3基因的表达明显上调(P<0.01)。结论 Ad.RGD-ING4抑制人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,可能的机制是通过上调Caspase-3基因促进肿瘤细胞凋亡。

浅谈钻井液包被抑制剂(PLUS-L)在伊拉克AHDEB项目中的应用

艾哈代布油田项目是伊拉克战后第一个对外石油合作项目,在项目开发的过程中,对于钻井液施工的难点有很多,艾哈代布油田采用的是聚磺混油钻井液体系,只对钻井液中的包被抑制剂(PLUS-L)在施工过程中的应用进行赘述。钻井施工的过程中,先后钻遇Upper Fars、Lower Fars、Dammam、Aliji等疑难地层,其中Upper Fars层位在1100m之前,主要以大段的软泥岩为主,Lower Fars主要以石膏岩为主,Dammam和Aliji均含有大量的黑燧石夹层,以上几个地层对钻井液的包被抑制性、抗盐抗钙性以及携屑性都有很大的要求,下面将AD2-13-4H(AD-119)与AD2-15-3H(AD-130)井进行对比分析,详细说明包被抑制剂(PLUS-L)在施工中的具体应用。

腺病毒介导的ING4基因对SMMC-7721人肝癌细胞生长的抑制效应

目的研究腺病毒介导的ING4(Ad-ING4)基因对体外SMMC-7721人肝癌细胞的生长抑制作用。方法将腺病毒空载体Ad-GFP及重组腺病毒Ad-ING4分别感染SMMC-7721细胞,采用RT-PCR法及间接免疫荧光检测ING4基因的转录和表达;荧光显微镜观察Ad-ING4对SMMC-7721细胞的细胞毒作用;MTT比色法绘制细胞生长曲线,计算生长抑制率;流式细胞术(FCM)检测Ad-ING4对细胞凋亡的影响;DAPI核荧光染色检测细胞凋亡的核形态学变化。结果 RT-PCR及间接免疫荧光显示Ad-ING4能在SMMC-7721细胞内稳定表达;Ad-ING4感染72h和96h后对细胞的生长抑制率达33.82%和50.70%;FCM检测有明显的凋亡峰,凋亡率可达46.7%;DAPI染色结果显示SMMC-7721细胞胞核呈现核深染、固缩、断裂等细胞核凋亡的形态改变。结论 Ad-ING4能够明显抑制SMMC-7721细胞的增殖,并诱导其凋亡。