益肾通淋排石汤联合体外震波碎石术治疗泌尿系统结石的临床疗效研究

目的研究益肾通淋排石汤与体外震波碎石术在泌尿系统结石治疗中的作用。方法回顾性选取2022年5月-2023年4月泰州市第四人民医院收治的80例泌尿系统结石患者的临床资料,根据治疗方法不同分为对照组(n=40)、研究组(n=40)。两组均行体外震波碎石术,对照组术后口服阿莫西林胶囊,研究组术后服用益肾通淋排石汤。对比两组排石效果,治疗前及治疗后8 d,检测两组血清降钙素原(Procalcitonin,PCT)及C-反应蛋白(C-Reactive Protein,CRP)水平,统计两组并发症发生率,对比生活质量。结果研究组结石排尽率(97.50%)高于对照组(85.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=3.914,P=0.048);研究组排石时间(4.92±0.37)d短于对照组(5.27±0.64)d,差异有统计学意义(t=2.994,P=0.004);治疗后8 d,研究组PCT及CRP水平均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);研究组并发症总发生率低于对照组,生活质量高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论在泌尿系统结石的治疗中,将益肾通淋排石汤应用于体外震波碎石术后,能够提高排石效果,缓解机体炎症,且有助于降低并发症发生风险,从而提高患者生活质量。

外排AdeABC和AdeIJK系统与鲍曼不动杆菌耐药性的相关研究进展

鲍曼不动杆菌是医院感染及免疫缺陷者感染的重要致病菌之一。近年来,临床分离率逐年上升,耐药性日益严重,其耐药性与多种机制有关,其中主动外排AdeABC和AdeIJK系统的结构、功能及表达调节在多重耐药过程中起重要作用,也是研究的热点之一。

鲍曼不动杆菌主动外排系统AdeABC、AdeIJK与多重耐药相关性

了解本地区鲍曼不动杆菌主动外排系统的分布并探讨其在介导细菌多重耐药中的作用。方法琼脂二倍稀释法检测20种抗菌药物对鲍曼不动杆菌临床分离株的MIC;PCR扩增AdeABC-AdeRS、AdeUK两种RND主动外排系统的结构和调节基因。结果112株鲍曼不动杆菌临床分离株对亚胺培南/西司他丁和美罗培南耐药率分别为0.9%和1.8%,对大多数抗菌药物的耐药率均大于60%,但对多黏菌素B和米诺环素均敏感。75.9%的菌株同时检出adeABC-adeRS和adeIJK主动外排基因,6.3%仅检出adeIJK。同时检出adeABC-adeRS和adeIJK的菌株耐药率较高。结论本地区鲍曼不动杆菌临床分离株多重耐药情况严重。adeABC和adeIJK在鲍曼不动杆菌临床分离株有较高检出率。AdeABC主动外排系统在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中起重要作用。

主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

为检测和证实主动外排系统 (外输泵 )在细菌多重耐药机制中的作用 ,用四环素和水杨酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导 ,筛选出多重耐药株 ,再用能量抑制剂 CCCP(Carbongl cyanide m- chloropheyhydrazone)对耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果 :在耐药株 ,其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株 ;多重耐药株在有 CCCP存在时 ,菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增 ,而无 CCCP的抑制时 ,菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢 ;在质控株 ,不论有无 CCCP存在 ,菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势 ,且保持较耐药株明显高的水平。结论 :体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生 。

铜绿假单孢菌多药外排系统研究进展

铜绿假单孢菌是一种重要的院内感染条件致病菌 ,具有先天的和后天获得的多重高度耐药性 ,一旦感染 ,临床治疗十分困难。铜绿假单孢菌的耐药机理十分复杂 ,除常见耐药机制外 ,很重要的就是其拥有可以外排多种药物的主动外排系统 ,使抗菌药物很难发挥应有作用。本文将从近年铜绿假单孢菌中各类外排泵的研究情况 ,特别是其中最重要的外排系统“MexAB -OprM”的分子结构模型、膜定位、该基因的表达与调控等方面的研究进展做一综述。

主动外排系统acrAB在临床分离肺炎克雷伯菌中的分布和表达

目的:研究临床分离多重耐药肺炎克雷伯菌的耐药机制,检测肺炎克雷伯菌中有无类似大肠埃希菌主动外排系统AcrAB的结构基因acrAB的分布和表达。方法:用聚合酶链反应(PCR)检测acrAB基因在临床分离的肺炎克雷伯菌和肺炎克雷伯菌标准菌株(ATCC 10031)中分布,用逆转录(RT)-PCR测定其 mRNA表达水平,并对 PCR扩增的 ATCC 10031的acsAB基因片段进行序列分析,同大肠埃希菌acrAB基因的相应序列进行同源性比较。结果:在所有被检的临床分离肺炎克雷伯菌和 ATCC 10031的染色体中均发现有类似大肠埃希菌的 acrAB基因;肺炎克雷伯菌多重耐药菌株 acrAB的 mRNA水平显著高于敏感野生株和耐药谱不同的菌株,而耐药谱不同的菌株仅略高于敏感菌株;PCR扩增的 ATCC 10031的 acrAB基因片段同大肠埃希菌acrAB基因相应片段,在核苷 序列上具有很高的同源性。结论:本研究表明在肺炎克雷伯菌中有类似大肠埃希菌的acrAB基因存在,其表达水平决定了多重耐药表型。

AdeABC外排泵系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系

目的:探讨外排泵AdeABC系统与鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的关系。方法:采用美罗培南多步法体外诱导敏感鲍曼不动杆菌获得对碳青霉烯类药物耐药的菌株;采用E-test法定量检测诱导前后菌株的敏感性;羰基氰化物间氯苯腙(carbonylcyanide-m-chlorophenylhydrazone,CCCP)抑制试验筛查外排泵;PCR及测序分析诱导前后AdeABC系统的调控基因adeS,adeR及主要碳青霉烯酶基因的变化;荧光定量PCR检测诱导前后adeA,adeB,adeR和adeS基因m RNA的表达量。结果:亲代敏感菌株S25595和S7257的美罗培南最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为0.38和0.25μg/m L,诱导后MIC均>32μg/m L;与亲代敏感株相比,诱导耐药株adeA,adeB,adeR和adeS基因的m RNA表达量上升2.45~9.44倍,但调控基因adeS和adeR没有基因突变或插入序列。结论:外排泵AdeABC系统高表达与鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药密切相关,其表达水平升高不是由调控基因adeS和adeR序列中基因突变或插入序列引起,可能存在其他机制。

大肠杆菌主动外排系统的研究进展

由于各种抗生素在临床上的广泛应用，导致细菌多重耐药菌株（Multiple-resistant strain，MRS）的不断出现。由主动外排系统介导，阻止药物在菌体内积聚是细菌产生多重耐药性的主要机制之一，主动外排系统在细菌多重耐药性的研究中显得越来越重要。目前大肠杆菌主动外排系统的研究已成为热点，现已发现大肠杆菌中存在多种主动外排系统，如AcrAB、AcrEF、EmrAB、Ecr、QacE等。本文就近年来有关大肠杆菌主动外排系统的研究作以介绍。

鲍曼不动杆菌的多重耐药性与主动外排系统

鲍曼不动杆菌的多重耐药现象日益严重,给临床抗菌药物的应用带来威胁,其多重耐药机制复杂,其中主动外排是主要原因之一。该文系统综述易化子超家族、耐药结节分化超家族和多药及毒物外排家族的5种主动外排系统的结构,外排机制及调节通路,分析多重耐药与主动外排系统的关系,为新型抗菌药物的设计提供新思路。

铜绿假单胞菌主动外排系统研究进展

主动外排系统在铜绿假单胞菌耐药形成过程中起到重要作用,近年来对其的研究也愈来愈多。截止到目前为止,在铜绿假单胞菌中总共发现了13种外排泵,其中12种属于耐药节结细胞分化(resistance nodulation cell division,RND)家族的外排泵,另外1种属于多药和毒物化合物外排家族(multidrug and toxic compound extrusion family,MATE)。本文就铜绿假单胞菌13种外排泵的底物谱、调控机制以及相关的基础研究进展进行综述。

主动外排系统acrAB在临床分离大肠杆菌中的分布和表达

为了研究临床分离多重耐药大肠杆菌的耐药机制，我们采用ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测大肠杆菌主动外排系统ＡｃｒＡＢ结构基因ａｃｒＡＢ在临床分离菌株中的分布并用ＲＴ－ＰＣＲ测定其ｍＲＮＡ表达水平。结果在所有的临床分离大肠杆菌染色体中均发现有ａｃｒＡＢ基因，未发现ａｃｒＡＢ缺失株；大肠杆菌多重耐药株ａｃｒＡＢ的ｍＲＮＡ水平明显高于敏感野生株和其它耐药谱不同的菌株，而敏感野生株和耐药谱不同的菌株间无差别。本研究表明大肠杆菌ａｃｒＡＢ表达水平决定了大肠杆菌多重耐药表型，ｍａｒ可能调控ａｃｒＡＢ的表达。

碳青霉烯类抗生素诱导铜绿假单胞菌外膜蛋白及外排系统突变的机制研究

目的探讨临床分离的因外膜蛋白突变导致的铜绿假单胞菌(Pa)碳青霉烯类耐药机制是否与药物诱导相关。方法在M-H平板上用亚胺培南(IPM)和美罗培南(MEM)药敏纸片分别诱导3株Pa(Pa标、Pa1和Pa2)。琼脂稀释法测定诱导前后Pa对IPM、MEM、头孢他啶和头孢吡肟4种药物的最低抑菌浓度(MIC)。改良三维试验检测诱导后产碳青霉烯酶变化。SDS-PAGE观察Pa外膜蛋白OprD的改变。PCR扩增oprD基因并进行序列分析。实时荧光定量PCR检测Pa外排系统表达情况。并对诱导耐药菌株进行稳定性分析。结果诱导第5天出现对IPM和MEM耐药(MIC≥8μg/mL),且MEM诱导株对2种药物敏感性降低速度明显快于IPM诱导株。诱导株未检出耐药酶,外膜蛋白OprD出现缺失或者减少。oprD基因测序发现Pa标(I)、Pa标(M)和Pa1(M)分别在831(TGG→TGA)、1 017(TGG→TGA)和1 014(TGG→TAG)有碱基突变产生终止密码子,Pa2(I)在1 206处有新的碱基插入导致移码突变。外排基因以MexA过度表达为主,同时伴有其他外排系统的过度表达。稳定性分析发现5株诱导株的耐药表型稳定,另1株外排系统表达量呈现持续升高,导致MIC值的右移。结论在碳青霉烯类药物环境中,外膜蛋白OprD表达减少和基因的突变以及外排系统的过度表达是引起诱导株对IPM和MEM耐药的主要原因。此型耐药株不仅耐药表型稳定,甚至可能由于某种机制导致脱离药物后MIC值仍持续升高。

鲍曼不动杆菌主动外排系统和NDM-1基因分布特征及与耐药表型的关系

目的了解鲍曼不动杆菌主动外排系统(外排泵)基因和新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因的分布情况,并分析其与细菌耐药表型的关系。方法采用琼脂二倍稀释法检测13种抗生素对81株鲍曼不动杆菌临床分离株的最低抑菌浓度(MICs),根据外排泵抑制剂PAβN处理前后MICs的变化判定外排泵表型。利用PCR扩增技术检测外排泵基因adeABC、adeIJK和adeFGH以及NDM-1基因blaNDM-1在临床分离株中的分布特征,根据外排泵基因的检出情况将临床分离株进行分组并比较耐药率。结果 81株鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素普遍耐药,43株(53%)外排泵表型试验阳性,对米诺环素的耐药率最低(30.9%),其次为亚胺培南,对其余抗生素的耐药率均超过60%,对头孢西丁和复方新诺明的耐药率较高,分别为97.5%和93.8%。在AdeABC外排泵基因阳性的菌株中,adeB、adeS和adeR的检出率分别为78%、78%和74%;在AdeIJK和AdeFGH外排泵基因中,adeJ、adeL、adeF、adeG和adeH的检出率均>90%;外排泵基因adeB、adeJ和adeG全部阳性的60株鲍曼不动杆菌的多重耐药最为严重,耐药基因阳性组的耐药率明显高于相对基因阴性组。32株鲍曼不动杆菌被检测出携带blaNDM-1基因。结论本地区鲍曼不动杆菌临床分离株多重耐药情况严重,存在blaNDM-1基因的克隆传播。AdeABC、AdeIJK和adeFGH外排泵基因在鲍曼不动杆菌临床分离株中的检出率较高。主动外排系统和NDM-1在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中起重要作用。

淋病流行株多重耐药性与mtrRCDE外排系统的关系

为了探讨mtrRCDE外排系统与淋病流行株多重耐药性的关系 ,应用K B法和琼脂稀释法从湛江地区分离出 6 2株淋球菌多重耐药株。利用煮沸法提取细菌DNA ,PCR扩增mtrR基因 ,并对扩增产物测序 ,比较敏感株与多重耐药株的差异。结果显示 :5株敏感株和 2株耐青霉素淋球菌无mtrR的突变 ,10株多重耐药株均有mtrR基因的突变 ,表现为第 12 4位和第 139位G→A。从而提示 ,mtrRCDE外排系统与淋病流行株的多重耐药性密切相关。

伤寒沙门菌多重耐药主动外排系统基因检测与序列分析

目的 :以聚合酶链反应 (PCR)检测伤寒沙门菌敏感株 2 75及其第 2代诱导耐药菌OM 2、182acrB主动外排基因并分析序列。方法 :参考伤寒沙门菌基因库序列 (No .AL6 2 72 6 7)设计引物 ,对伤寒沙门菌 2 75、OM 2、182PCR扩增acrB基因 ,以证实acrAB外排系统的存在 ,并对 3株伤寒沙门菌扩增所得的acrB测序并分析其序列。结果 :伤寒沙门菌 2 75、OM 2、182PCR均扩增出 4 4 9bp的产物带 ,序列分析示伤寒沙门菌 2 75、OM 2仅 2处碱基与参考序列不同 (同源性 99.5 5 % ) ,推定编码的氨基酸相同 (同源性 10 0 % ) ,伤寒沙门菌 182除 2处碱基不同外 ,另有 2处存在碱基插入 ,因其序列已被打乱 ,无法进行氨基酸推测。结论 :伤寒沙门菌存在主动外排系统 ,是产生高水平耐药及多重耐药的基础。

铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM的研究进展

医院感染在感染性疾病中占有相当比例。院内感染的病原菌中,铜绿假单胞菌的感染高居榜首,且耐药状况十分严重。主动外排系统是细菌存在耐药性并发生获得性多重耐药的主要原因。M exAB-OprM型外排系统因具有广谱的外排活性成为铜绿假单胞菌最具临床意义的药物外排系统。本文对细菌主动外排系统的分类,PA M exAB-OprM外排系统的组成、结构、重要作用及表达调控予以综述,并对其治疗研究作出展望。

外排屑深孔钻削DF系统的设计与研究

对外排屑深孔钻削DF系统的原理及装置进行了研究,对外排屑深孔钻削DF系统的参数选择及使用时注意事项进行系统地阐述。并设计制造出外排屑深孔钻削DF装置。经实验研究证明可有效的解决枪钻钻削过程中排屑等问题。

外排体作为新型给药系统的研究进展

外排体是由多泡体或称为多囊体与细胞膜融合并分泌到胞外的一种膜性小囊泡,具有多种免疫功能,其表面含有大量的与其来源和功能密切相关的蛋白质和脂质成分,具有去除细胞生长过程中的废弃蛋白、信号传导、提呈抗原激活T细胞以及诱发和增强机体免疫反应等功能。近年来,有研究者利用外排体负载药物,将其发展成为一种纳米给药体系,以避免某些外源性纳米载体可能发生的不良反应以及免疫排斥反应。本文综述了对这种新型纳米载体的发现、功能以及作为给药载体的研究进展,以丰富药剂学的载药系统,并为纳米给药系统的研究提供新的思路。

阴沟肠杆菌AcrAB-TolC外排系统基因研究

目的研究临床分离的阴沟肠杆菌AcrAB-TolC外排系统基因的携带情况及其与抗菌药物耐药性的关系。方法对临床分离的141株阴沟肠杆菌用MicroScanWalkAway40全自动细菌分析仪进行鉴定和药敏试验;聚合酶链式反应(PCR)检测AcrAB-TolC外排系统acrA,acrB,tolC和acrR 4种基因在阴沟肠杆菌中的分布,并对PCR产物进行纯化、克隆、测序。结果 acrA,acrB,tolC和acrR 4种基因在141株阴沟肠杆菌中的检出率分别为98.5%、51.06%、82.27%、78.72%,且4种基因检出率有显著性差异(P<0.01);acrA基因和acrB基因在不同组的阳性率有显著性差异(P<0.01),各耐药组高于敏感组,且多重耐药组阳性率最高;acrR基因和tolC基因在不同组的阳性率无显著性差异。结论我院分离的阴沟肠杆菌高水平携带AcrAB-TolC外排系统基因,且与抗菌药物耐药性具有相关性。