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Bcl-XL小发夹RNA腺病毒载体的构建及其抗肿瘤作用
被引量:
1
1
作者
胡静姿
周玮
+1 位作者
王晓炜
戴胜
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期61-65,共5页
目的:构建表达Bcl-XL小发夹RNA的腺病毒载体(Ad/Bcl-XL shRNA)并探讨其抗肿瘤作用。方法:构建、纯化重组腺病毒Ad/Bcl-XL shRNA。通过Western blotting、MTT分析验证它对Bcl-XL的下调及其杀伤肿瘤细胞的作用,并检测其处理后细胞凋亡信...
目的:构建表达Bcl-XL小发夹RNA的腺病毒载体(Ad/Bcl-XL shRNA)并探讨其抗肿瘤作用。方法:构建、纯化重组腺病毒Ad/Bcl-XL shRNA。通过Western blotting、MTT分析验证它对Bcl-XL的下调及其杀伤肿瘤细胞的作用,并检测其处理后细胞凋亡信号的活化情况;在裸鼠皮下荷瘤模型中验证其体内抗肿瘤作用。结果:成功构建和纯化了Ad/Bcl-XLshRNA,它能显著下调结肠癌DLD1细胞Bcl-XL蛋白的表达;与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组明显抑制人结肠癌细胞DLD1的生长[1 000 MOI时(60.6±4.8)%vs(99.0±2.6)%、100%;2 000 MOI时,(37.3±6.9)%vs(99.0±2.1)%、100%,P<0.01],但对正常人成纤维细胞无明显抑制作用(P>0.05);Ad/Bcl-XL shRNA组能有效诱导结肠癌细胞中凋亡信号casepase-9、casepase-3、PARP的活化。在裸鼠荷瘤模型中,与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组显著抑制DLD1来源皮下肿瘤的生长[第29天时,(250.1±185.7)vs(880.0±286.1)、(911.0±389.1)mm3;P<0.01]。结论:Ad/Bcl-XLshRNA能显著抑制结肠癌细胞在体内外的生长,其在结肠癌治疗中具有潜在的应用价值。
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关键词
重组腺病毒
BCL-XL
RNA干扰
小发夹RNA
结肠癌
下载PDF
职称材料
不同基因转染方法对小鼠内耳毛细胞转染效率的比较
被引量:
3
2
作者
陈岩
赖垂金
+1 位作者
李雯
李华伟
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期166-169,共4页
目的对比不同的基因转染方法对小鼠内耳毛细胞的转染效率,以探寻简便、高效转染耳蜗毛细胞的方法。方法分离111只新生昆明小鼠(P2)耳蜗螺旋韧带及感染上皮,分别采用电穿孔法介导质粒载体(pGPHI/GFP/Neo)、腺病毒载体(Ad5/CMV/GFP)和慢...
目的对比不同的基因转染方法对小鼠内耳毛细胞的转染效率,以探寻简便、高效转染耳蜗毛细胞的方法。方法分离111只新生昆明小鼠(P2)耳蜗螺旋韧带及感染上皮,分别采用电穿孔法介导质粒载体(pGPHI/GFP/Neo)、腺病毒载体(Ad5/CMV/GFP)和慢病毒载体(LV/CMV/GFP)3种方法转染小鼠内耳毛细胞,于转染48小时后在荧光显微镜下观察并比较三种方法基因转染后小鼠内耳毛细胞绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达。结果电穿孔法介导质粒载体转染组和慢病毒载体转染组GFP阳性细胞极少;腺病毒载体转染组效率最高,耳蜗中回外毛细胞GFP阳性率为90.0%±4.1%,内毛细胞GFP阳性率为5%±0.4%。结论腺病毒载体能更有效地将外源基因导入耳蜗毛细胞内表达,是基因转染耳蜗毛细胞的理想载体。
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关键词
腺病毒载体
慢病毒载体
电穿孔法
基因转染
内耳毛细胞
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职称材料
题名
Bcl-XL小发夹RNA腺病毒载体的构建及其抗肿瘤作用
被引量:
1
1
作者
胡静姿
周玮
王晓炜
戴胜
机构
空军杭州航空医学鉴定训练中心内科
浙江大学医学院附属邵逸夫医院肛肠外科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期61-65,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30700970)~~
文摘
目的:构建表达Bcl-XL小发夹RNA的腺病毒载体(Ad/Bcl-XL shRNA)并探讨其抗肿瘤作用。方法:构建、纯化重组腺病毒Ad/Bcl-XL shRNA。通过Western blotting、MTT分析验证它对Bcl-XL的下调及其杀伤肿瘤细胞的作用,并检测其处理后细胞凋亡信号的活化情况;在裸鼠皮下荷瘤模型中验证其体内抗肿瘤作用。结果:成功构建和纯化了Ad/Bcl-XLshRNA,它能显著下调结肠癌DLD1细胞Bcl-XL蛋白的表达;与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组明显抑制人结肠癌细胞DLD1的生长[1 000 MOI时(60.6±4.8)%vs(99.0±2.6)%、100%;2 000 MOI时,(37.3±6.9)%vs(99.0±2.1)%、100%,P<0.01],但对正常人成纤维细胞无明显抑制作用(P>0.05);Ad/Bcl-XL shRNA组能有效诱导结肠癌细胞中凋亡信号casepase-9、casepase-3、PARP的活化。在裸鼠荷瘤模型中,与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组显著抑制DLD1来源皮下肿瘤的生长[第29天时,(250.1±185.7)vs(880.0±286.1)、(911.0±389.1)mm3;P<0.01]。结论:Ad/Bcl-XLshRNA能显著抑制结肠癌细胞在体内外的生长,其在结肠癌治疗中具有潜在的应用价值。
关键词
重组腺病毒
BCL-XL
RNA干扰
小发夹RNA
结肠癌
Keywords
recombinant
adenovector
Bcl-XL
RNA interfering
small hairpin RNA
colon cancer
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
不同基因转染方法对小鼠内耳毛细胞转染效率的比较
被引量:
3
2
作者
陈岩
赖垂金
李雯
李华伟
机构
复旦大学附属眼耳鼻喉科医院
出处
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第2期166-169,共4页
基金
973及国家重大研究计划(2011CB504506)
国家自然科学基金(81100709)
教育部博士点基金博导类计划(20120071110077)联合资助
文摘
目的对比不同的基因转染方法对小鼠内耳毛细胞的转染效率,以探寻简便、高效转染耳蜗毛细胞的方法。方法分离111只新生昆明小鼠(P2)耳蜗螺旋韧带及感染上皮,分别采用电穿孔法介导质粒载体(pGPHI/GFP/Neo)、腺病毒载体(Ad5/CMV/GFP)和慢病毒载体(LV/CMV/GFP)3种方法转染小鼠内耳毛细胞,于转染48小时后在荧光显微镜下观察并比较三种方法基因转染后小鼠内耳毛细胞绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达。结果电穿孔法介导质粒载体转染组和慢病毒载体转染组GFP阳性细胞极少;腺病毒载体转染组效率最高,耳蜗中回外毛细胞GFP阳性率为90.0%±4.1%,内毛细胞GFP阳性率为5%±0.4%。结论腺病毒载体能更有效地将外源基因导入耳蜗毛细胞内表达,是基因转染耳蜗毛细胞的理想载体。
关键词
腺病毒载体
慢病毒载体
电穿孔法
基因转染
内耳毛细胞
Keywords
Inner ear
Cochlear hair cells
Gene transfer
Electroporation
adenovector
Lentivirus vector
分类号
R764.35 [医药卫生—耳鼻咽喉科]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Bcl-XL小发夹RNA腺病毒载体的构建及其抗肿瘤作用
胡静姿
周玮
王晓炜
戴胜
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
2
不同基因转染方法对小鼠内耳毛细胞转染效率的比较
陈岩
赖垂金
李雯
李华伟
《听力学及言语疾病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
下载PDF
职称材料
已选择
0
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引证文献
统计分析
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