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脂肪干细胞向血管平滑肌细胞诱导的实验研究 被引量:20
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作者 杨平 尹烁 +4 位作者 崔磊 李宏 吴莹琛 刘伟 曹谊林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期481-486,共6页
目的研究人脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)在体外单层培养条件下诱导为血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的可行性。方法应用酶消化法消化人脂肪组织获得ADSCs,基础培养液培养传代,取第1代细胞用于诱... 目的研究人脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)在体外单层培养条件下诱导为血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的可行性。方法应用酶消化法消化人脂肪组织获得ADSCs,基础培养液培养传代,取第1代细胞用于诱导分化实验。实验分两组,ADSCs以含5ng/mLTGF-β1及50ng/mLPDGF-BB的M-199诱导液联合诱导,作为诱导组;以含10%FBS的M-199培养液培养ADSCs作为未诱导组。镜下观察细胞生长情况;免疫荧光和RT-PCR方法检测平滑肌细胞特异标记的表达情况;流式细胞仪检测诱导阳性率。结果诱导组细胞形态形成平滑肌细胞特有的"峰-谷"生长模式,未诱导组细胞形态未发生改变,与原代ADSCs相似呈成纤维细胞样生长。诱导培养14d,诱导组细胞体外扩增能力较未诱导组显著降低(P<0.01)。免疫荧光检测:诱导组表达平滑肌特异标记α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle-myosin heavy chain,SM-MHC)和Calponin,未诱导组无表达。细胞诱导前α-SMA、SM-MHC及Calponin阳性表达率分别为3.26%±1.31%、3.55%±1.60%、4.02%±1.81%;诱导组阳性表达率分别为48.13%±8.31%、45.33%±10.68%、39.13%±9.42%;诱导前、后差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR检测:诱导组表达平滑肌特异标记α-SMA、SM-MHC、Calponin和SM-22α,未诱导组无表达。结论脂肪干细胞经体外培养及诱导后,呈明显的VSMCs特性,有可能成为血管组织工程新的种子细胞来源。 展开更多
关键词 组织工程血管 脂肪干细胞 平滑肌细胞 细胞诱导
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绵羊β3肾上腺素能受体基因在脂肪组织中的表达研究 被引量:2
2
作者 武建亮 乔利英 +3 位作者 刘建华 高中元 林婄婄 刘文忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期196-203,共8页
旨在对绵羊β3肾上腺素能受体基因在脂肪组织中的表达进行研究。本研究通过real-time PCR和免疫组化的方法检测了2个绵羊群体皮下脂肪、大网膜、小网膜、腹膜后脂肪、肠系膜和肾周等6种脂肪组织中ADRB3基因mRNA及其蛋白的表达量与分布... 旨在对绵羊β3肾上腺素能受体基因在脂肪组织中的表达进行研究。本研究通过real-time PCR和免疫组化的方法检测了2个绵羊群体皮下脂肪、大网膜、小网膜、腹膜后脂肪、肠系膜和肾周等6种脂肪组织中ADRB3基因mRNA及其蛋白的表达量与分布情况。结果表明:ADRB3蛋白位于脂肪细胞的细胞膜中。ADRB3基因mRNA及其蛋白在皮下脂肪组织的表达丰度最小(0.159和0.139),在腹膜后脂肪组织的表达丰度最大(2.911和2.225),深层脂肪组织中ADRB3基因mRNA表达量要显著高于皮下脂肪组织(P<0.05),表明皮下脂肪组织的脂肪分解率要低于深层脂肪组织。品种对ADRB3基因mRNA的表达没有显著影响,但对于ADRB3蛋白的表达影响显著。不同脂肪组织中ADRB3表达丰度的差异反映了山西肉用绵羊的遗传稳定性较差。本研究的结果与已知的ADRB3调节脂肪分解和产热的功能是一致的,为利用ADRB3基因作为候选基因进行绵羊新品种的培育提供理论依据。 展开更多
关键词 ADRB3基因 绵羊 MRNA表达 免疫组化 脂肪组织
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Adipose-derived mesenchymal stromal/stem cells: An update on their phenotype in vivo and in vitro 被引量:17
3
作者 Patrick C Baer 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2014年第3期256-265,共10页
Adipose tissue is a rich, ubiquitous and easily acces-sible source for multipotent stromal/stem cells and has, therefore, several advantages compared to other sourc-es of mesenchymal stromal/stem cells. Several studie... Adipose tissue is a rich, ubiquitous and easily acces-sible source for multipotent stromal/stem cells and has, therefore, several advantages compared to other sourc-es of mesenchymal stromal/stem cells. Several studies have tried to identify the origin of the stromal/stem cell population within adipose tissue in situ. This is a complicated attempt because no marker has currently been described which unambiguously identifies native adipose-derived stromal/stem cells(ASCs). Isolated and cultured ASCs are a non-uniform preparation consisting of several subsets of stem and precursor cells. Cultured ASCs are characterized by their expression of a panel of markers(and the absence of others), whereas their in vitro phenotype is dynamic. Some markers were ex-pressed de novo during culture, the expression of some markers is lost. For a long time, CD34 expression was solely used to characterize haematopoietic stem and progenitor cells, but now it has become evident that it is also a potential marker to identify an ASC subpopula-tion in situ and after a short culture time. Nevertheless, long-term cultured ASCs do not express CD34, perhaps due to the artificial environment. This review gives an update of the recently published data on the origin and phenotype of ASCs both in vivo and in vitro. In addition, the composition of ASCs(or their subpopula-tions) seems to vary between different laboratories andpreparations. This heterogeneity of ASC preparationsmay result from different reasons. One of the main problems in comparing results from different laborato-ries is the lack of a standardized isolation and culture protocol for ASCs. Since many aspects of ASCs, suchas the differential potential or the current use in clinical trials, are fully described in other recent reviews, this review further updates the more basic research issues concerning ASCs' subpopulations, heterogeneity andculture standardization. 展开更多
关键词 Adipose-derived stromal/stem cells adi-pose tissue Subpopulation Heterogeneity PHENOTYPE CD34 MESENCHYMAL STEM cells
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脂肪染色法在临床专业病理实验教学中的应用 被引量:1
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作者 周剑莉 胡检生 《山东医学高等专科学校学报》 2011年第1期55-56,共2页
目的探讨脂肪染色法在临床专业病理实验教学中的应用。方法对肝脂肪变性组织和肝水样变性组织分别进行脂肪染色法和H-E法染色。然后让学生镜下观察。结果脂肪染色法把肝脂变组织中肝细胞内的脂滴保存下来并染上特定的颜色,使学生能够很... 目的探讨脂肪染色法在临床专业病理实验教学中的应用。方法对肝脂肪变性组织和肝水样变性组织分别进行脂肪染色法和H-E法染色。然后让学生镜下观察。结果脂肪染色法把肝脂变组织中肝细胞内的脂滴保存下来并染上特定的颜色,使学生能够很好地区分两种病变。结论脂肪染色法的应用,使病理学实习形象,生动,提高了实验教学质量。 展开更多
关键词 病理学实验教学 肝脂变 肝细胞水样变 脂肪染色 苏丹Ⅲ
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Retrospective Analysis of Treatment Results by Non-Invasive Radiofrequency (RF) Device with Standard and High Voltage RF Electrical Pulses Coupled with Suction for Fat Reduction and Cellulite Improvement
5
作者 Judith Hellman R. Stephen Mulholland 《Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications》 2021年第4期279-292,共14页
<strong>Introduction:</strong> The growing demand for non-surgical, non-invasive procedures for fat and circumference reduction and for cellulite treatments has led to the development of various energy-bas... <strong>Introduction:</strong> The growing demand for non-surgical, non-invasive procedures for fat and circumference reduction and for cellulite treatments has led to the development of various energy-based technologies. Bi-polar radiofrequency (RF) technology combined with additional technologies, such as vacuum, massage or infrared (IR) light is widely used in various body contouring treatments in the medical aesthetic market. The current study is based on a retrospective efficacy analysis of an RF device, combining two RF modalities, coupled with suction. <strong>Methods:</strong> Representative treatment outcomes, documented in photographs taken at baseline and post-treatment were gathered from several clinics. Photos of the various treatment areas were evaluated by independent evaluators for cellulite and contour improvement. <strong>Results:</strong> Before and after photographs were gathered from 31 patients treated in different clinics. Analysis was carried out on different body areas such as thighs, abdomen, back, buttocks and arms and analyzed by two independent evaluators. Scoring was performed according to the Global Aesthetic Improvement Scale (GAIS) scale and indicated an overall improvement in the contour of all treated body areas. In cellulite cases, improved appearance according to the cellulite grading scale was noted. <strong>Conclusion:</strong> This retrospective analysis supports the device’s efficacy for fat and circumferences reduction and cellulite improvement. The device’s unique specifications contribute to treatment safety and efficacy which is highly tolerable by the patients. 展开更多
关键词 Noninvasive Radiofrequency RF Fat Reduction Adipocytes Apoptosis adi-pose Tissue Fat Reduction Cellulite Improvement ELECTROPORATION
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细胞共培养法诱导兔脂肪来源干细胞向软骨细胞分化的实验研究 被引量:8
6
作者 许海委 徐宝山 +5 位作者 杨强 李秀兰 张杨 张春秋 伍耀宏 崔丽 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期193-198,共6页
目的利用软骨细胞与脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)共培养,观察ADSCs是否能向软骨细胞定向分化。方法 4月龄健康新西兰大白兔8只,雌雄不限,体重2.2~2.7 kg,分离、培养兔软骨细胞和ADSCs,取第2代细胞用于实验。将实... 目的利用软骨细胞与脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)共培养,观察ADSCs是否能向软骨细胞定向分化。方法 4月龄健康新西兰大白兔8只,雌雄不限,体重2.2~2.7 kg,分离、培养兔软骨细胞和ADSCs,取第2代细胞用于实验。将实验分为两组,实验组各取将1 mL细胞密度为2×104个/mL的软骨细胞和ADSCs分别接种至Transwell小室6孔板上、下层共同培养,对照组单独培养ADSCs。倒置相差显微镜观察两组ADSCs形态变化;培养14 d后行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,实时荧光定量PCR检测两组ADSCsⅡ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA表达。结果倒置相差显微镜观察示,随培养时间延长,实验组ADSCs逐渐变为软骨样细胞形态,呈圆形;对照组ADSCs仍以梭形为主,呈束状或漩涡状生长。培养14 d,实验组甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均为阳性;对照组均为阴性;实时荧光定量PCR检测示,实验组Ⅱ型胶原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA相对表达量分别为1.43±0.07、2.13±0.08、1.08±0.08,显著高于对照组(0.04±0.03、0.13±0.04、0.10±0.02),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过与软骨细胞共同培养,ADSCs可定向分化为软骨细胞。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 软骨细胞 共培养 诱导分化
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低温冻存对人脂肪来源干细胞成骨能力影响的实验研究 被引量:6
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作者 刘广鹏 李宇琳 +2 位作者 孙剑 周恒 崔磊 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1224-1227,共4页
目的脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是组织工程种子细胞的重要来源之一。探讨低温保存对hADSCs体外生长特性及成骨分化潜能的影响,验证冻存后的ADSCs作为组织工程骨种子细胞的可行性。方法取自愿捐献的经脂肪抽吸术... 目的脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是组织工程种子细胞的重要来源之一。探讨低温保存对hADSCs体外生长特性及成骨分化潜能的影响,验证冻存后的ADSCs作为组织工程骨种子细胞的可行性。方法取自愿捐献的经脂肪抽吸术获取人脂肪组织,采用胶原酶消化法分离hADSCs。取第2代hADSCs置于-196℃液氮保存4周后,37℃复苏并测定细胞存活率。实验分为两组,实验组为低温保存的hADSCs,对照组为未经低温保存的hADSCs;均用成骨诱导液诱导培养。采用DNA定量(Hoechst33258荧光比色法)测定细胞体外增殖活性,ALP染色及茜素红染色法测定ALP活性和Ca2+含量,观察低温冻存对细胞成骨能力的影响。结果低温冻存复苏后的hADSCs存活率为90.44%±2.62%。两组细胞数量随成骨诱导时间延长不断增加,7d达平台期;ALP表达活性也不断增加,于成骨诱导11d达平台期,且2周时ALP染色均呈阳性;成骨诱导3周时两组茜素红染色均呈强阳性反应。两组各时间点细胞数量、ALP活性和Ca2+含量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论低温保存的hADSCs体外生长及成骨能力未发生显著变化,可以作为组织工程骨的种子细胞。 展开更多
关键词 组织工程 低温冻存 脂肪来源干细胞 成骨分化
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促进脂肪组织工程再血管化的相关研究进展 被引量:7
8
作者 常强 潘世杰 鲁峰 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1008-1013,共6页
目的对脂肪组织工程中再血管化的研究现状进行分析,为组织工程脂肪再血管化提供理论参考。方法广泛查阅近年有关脂肪组织工程中关于再血管化研究的相关文献,围绕促血管化的5个方面,包括脂肪细胞组织结构及血供系统的特殊性、血管化的机... 目的对脂肪组织工程中再血管化的研究现状进行分析,为组织工程脂肪再血管化提供理论参考。方法广泛查阅近年有关脂肪组织工程中关于再血管化研究的相关文献,围绕促血管化的5个方面,包括脂肪细胞组织结构及血供系统的特殊性、血管化的机制、种子细胞的复合、支架材料的修饰、微环境的改善,进行相关文献复习和综述。结果脂肪组织工程技术为修复软组织缺损提供了一条新思路,但目前构建成功的组织工程脂肪体积均未超过1 mL,主要与构建物内血管化程度有关,因此构建物内血供的快速重建是脂肪组织工程由基础向临床应用的关键性环节。结论促进脂肪组织工程移植物尽快再血管化,能使支架上种子细胞及时获得营养,为制备大体积组织工程脂肪提供可能,从而满足临床修复大范围软组织缺损的需要。 展开更多
关键词 脂肪组织工程 再血管化 种子细胞 支架材料
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脂肪来源干细胞促进颗粒脂肪游离移植后再血管化的机制 被引量:2
9
作者 袁艺 鲁峰 高建华 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1125-1129,共5页
目的对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)促进颗粒脂肪游离移植后再血管化的机制进行综述。方法查阅近年有关ADSCs在游离脂肪移植和血管形成中的基础研究文献并进行综述。结果血管形成在时间和空间是一个序惯发生的过程... 目的对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)促进颗粒脂肪游离移植后再血管化的机制进行综述。方法查阅近年有关ADSCs在游离脂肪移植和血管形成中的基础研究文献并进行综述。结果血管形成在时间和空间是一个序惯发生的过程,受到多种因素调控。ADSCs能分泌多种促血管生成因子,并且具有多向分化的潜能。结论 ADSCs作用于血管生成过程的每个部分,具有明确的促血管生成作用,但具体机制仍需要进一步研究。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 脂肪游离移植 再血管化 机制
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人高活性血管基质层细胞快速分离及荧光标记的实验研究
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作者 李力群 高建华 +1 位作者 潘盛盛 倪彬婷 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期861-864,共4页
目的探讨一种人高活性血管基质层细胞(stromal vascular fraction cells,SVFs)快速分离及荧光标记的有效方法,为SVFs用于临床奠定理论基础。方法取植皮手术患者自愿捐赠的腹部皮下脂肪组织,分别用0.065%、0.125%、0.185%3种浓度的Ⅰ型... 目的探讨一种人高活性血管基质层细胞(stromal vascular fraction cells,SVFs)快速分离及荧光标记的有效方法,为SVFs用于临床奠定理论基础。方法取植皮手术患者自愿捐赠的腹部皮下脂肪组织,分别用0.065%、0.125%、0.185%3种浓度的Ⅰ型胶原酶消化,提取SVFs。收集细胞悬液进行细胞计数,锥虫蓝染色计算细胞成活率。用1’双十八烷-3,3,3’,3’-四甲基吲哚羧化青-高氯酸盐(1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-2-tetramethy-lindocyanine perchlorate,DiI)荧光标记0.125%浓度组SVFs,倒置荧光显微镜下观察标记情况;将DiI标记的SVFs接种培养,倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT法检测DiI标记前后细胞增殖能力。结果 0.065%、0.125%及0.185%浓度组SVFs细胞总数分别为(138.68±11.64)×104、(183.80±10.16)×104、(293.07±8.31)×104个,组间比较差异均有统计学意义(P<0.01);细胞成活率分别为91%±2%、90%±2%、81%±2%,0.065%浓度组和0.125%浓度组均显著高于0.185%浓度组(P<0.01),0.065%浓度组和0.125%浓度组比较差异无统计学意义(P=0.881)。倒置荧光显微镜观察示,0.125%浓度组细胞均可被DiI荧光标记,标记后的细胞膜完整,细胞质丰富,细胞形态正常,细胞核未染荧光;DiI标记的SVFs细胞悬液接种培养后,细胞能顺利贴壁及传代。MTT法检测示DiI标记前后SVFs细胞生长曲线相似,生长趋势吻合。结论 0.125%浓度的Ⅰ型胶原酶可有效消化脂肪中的胶原组织,获取大量SVFs,同时对细胞损伤较小,是理想的工作浓度;DiI可有效标记SVFs。 展开更多
关键词 血管基质层细胞 脂肪来源干细胞 荧光标记
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Cordycepin promotes browning of white adipose tissue through an AMP-activated protein kinase(AMPK)-dependent pathway 被引量:11
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作者 Guihong Qi Yue Zhou +5 位作者 Xiaopo Zhang Jiaqi Yu Xin Li Xiaoxue Cao Chongming Wu Peng Guo 《Acta Pharmaceutica Sinica B》 SCIE CSCD 2019年第1期135-143,共9页
Obesity is a worldwide epidemic. Promoting browning of white adipose tissue(WAT)contributes to increased energy expenditure and hence counteracts obesity. Here we show that cordycepin(Cpn), a natural derivative of ade... Obesity is a worldwide epidemic. Promoting browning of white adipose tissue(WAT)contributes to increased energy expenditure and hence counteracts obesity. Here we show that cordycepin(Cpn), a natural derivative of adenosine, increases energy expenditure, inhibits weight gain, improves metabolic profile and glucose tolerance, decreases WAT mass and adipocyte size, and enhances cold tolerance in normal and high-fat diet-fed mice. Cpn markedly increases the surface temperature around the inguinal WAT and turns the inguinal fat browner. Further investigations show that Cpn induces the development of brown-like adipocytes in inguinal and, to a less degree, epididymal WAT depots. Cpn also increases the expression of uncoupling protein 1(UCP1) and other thermogenic genes in WAT and3T3-L1 differentiated adipocytes, in which AMP-activated protein kinase(AMPK) plays an important role. Our results provide novel insights into the function of Cpn in regulating energy balance, and suggest a potential utility of Cpn in the treatment of obesity. 展开更多
关键词 CORDYCEPIN BROWNING of white adi POSE tissue(WAT) THERMOGENESIS AMP-activated protein kinase(AMPK) Obesity
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