脂联素受体AdipoR1对肺癌细胞PC9增殖和迁移的影响

目的:观察过表达或敲低人脂联素受体1(AdipoR1)对肺癌细胞PC9增殖和迁移的影响,阐明AdipoR1对肺癌的调控作用。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测AdipoR1在PC9细胞及正常人支气管上皮细胞HBEC中的表达量;利用分子克隆的方法构建AdipoR1过表达和shRNA干扰载体,转染至PC9细胞中并采用RT-PCR和Western blot方法检测AdipoR1的表达情况。运用CCK8方法和划痕愈合实验检测AdipoR1激动剂AdipoRon、AdipoR1过表达及AdipoR1敲低对PC9细胞的增殖和迁移活性的影响。结果:RT-PCR结果显示AdipoR1在PC9细胞中的表达量明显降低(P <0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示AdipoR1过表达的PC9细胞中AdipoR1 mRNA和蛋白的表达量明显高于空载体细胞(P均<0.05),AdipoR1干扰组AdipoR1表达量明显低于阴性对照细胞(P均<0.05)。CCK8和划痕愈合实验结果显示,在24 h和48 h时,与溶剂对照组相比,AdipoRon能显著降低PC9细胞的增殖和划痕愈合率,过表达AdipoR1的PC9细胞增殖和划痕愈合率明显低于空载体细胞,而AdipoR1敲低能明显促进PC9细胞的增殖和划痕愈合率(P均<0.05)。结论:AdipoR1激动剂AdipoRon或AdipoR1过表达能抑制肺癌细胞PC9的增殖和迁移活性,而AdipoR1敲低则能明显促进肺癌细胞PC9的增殖和迁移。

脂联素对钙化大鼠血管组织的影响

目的观察脂联素及其受体在钙化大鼠血管组织中的变化,探讨脂联素(adiponectin,APN)对钙化组织的作用。方法大鼠随机分为正常对照组、钙化组和脂联素组。制备大鼠血管钙化模型。用ELISA法测定血浆和血管组织中脂联素的含量,用real-time PCR方法检测组织中脂联素与其受体adipo R1的mRNA水平,用Western blot方法检测组织中受体adipo R1蛋白含量,测定血管中钙含量及碱性磷酸酶活性。结果与对照组相比,钙化大鼠血浆和血管组织中脂联素的含量明显降低,分别降低了47.1%和57.1%;钙化组大鼠血管组织中APN和adipo R1 mRNA水平较对照组有显著降低,分别降低了65.0%和72.0%;钙化大鼠的血管组织中adipo R1蛋白降低了77.2%(均P<0.01)。给予脂联素的大鼠血管组织中钙含量和碱性磷酸酶活性分别降低68.5%和34.8%(P<0.01)。结论钙化的血管组织中APN与其受体adipoR1系统是明显下调,APN可明显抑制钙化大鼠血管组织中钙含量和碱性磷酸酶的活性,提示APN可抑制维生素D3和尼古丁引起的血管钙化。