β-肾上腺能受体配基^(125)碘氰心得静的标记和鉴定

由于进口昂贵,我们自行标记β受体放射性配基^(125)ICYP,并与进口Amersham产品作比较。结果表明两者的比活性、放射化学纯度(％),游离碘百分比均接近。自标^(125)ICYP测得大鼠肺组织β受体Bmax为662.5fmol/mg蛋白,Kd为1.47nM,进口产品测得的为Bmax603.9fmol/mg蛋白,Kd为1.83nM。两者数值接近,与文献资料也相似。薄板层析结果表明层析后^(125)ICYP显示的园点位置一致。放射自显影结果表明所得肺组织β受体图像中,各种结构分布特点也相同,肺实质最多,气道的β受体又多于血管。说明自标的^(125)ICYP可用于受体研究,特别作为放射自显影,曝光3～5天即可得清晰的β受体分布图像,与~3H标记配体相比,大大缩短了实验周期。

ADRB2和FCER1B基因多态性与壮族咳嗽变异性哮喘患儿治疗效果及肺功能改善情况的相关性

目的探讨肾上腺素能受体β2(ADRB2)和Ⅰ型Fcε受体β(FCER1B)基因多态性与壮族咳嗽变异性哮喘(CVA)患儿治疗效果及肺功能改善情况的相关性。方法纳入88例壮族CVA患儿,检测其ADRB2基因rs1042713位点、FCER1B基因rs569108位点的基因型。随访患儿使用吸入性糖皮质激素治疗3个月后的疗效及肺功能改善情况。分析上述两个基因位点多态性与患儿治疗效果及治疗后肺功能改善情况的相关性。结果88例CVA患儿中,治疗好转67例(好转组)、无效21例(无效组),肺功能正常52例(肺功能正常组)、肺功能异常36例(肺功能异常组)。好转组与无效组之间、肺功能正常组与肺功能异常组之间ADRB2基因rs1042713位点基因型分布的差异均有统计学意义(均P<0.05),携带GG基因型患儿治疗后出现无效、肺功能异常的风险分别是携带AA/AG基因型患儿的4.833倍、7.636倍(均P<0.05)。好转组与无效组之间、肺功能正常组与肺功能异常组之间FCER1B基因rs569108位点基因型分布的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论壮族CVA患儿的吸入性糖皮质激素治疗效果及治疗后肺功能改善情况可能与ADRB2基因rs1042713位点多态性密切相关,而与FCER1B基因rs569108位点多态性可能无关。

等位基因特异性引物PCR技术及其应用研究

目的 :研究建立等位基因特异性引物PCR技术体系 ,并将其应用于基因单核苷酸多态性研究工作。方法 :通过美国国家生物信息中心 (NCBI)的genBank获取基因序列及其相应位点的SNP信息。利用Primer5 .0软件设计引物 ,并经NCBI的Blast2 .0软件检验其特异性。结果 :建立了单一等位基因特异性引物PCR(SASP -PCR)与嵌套式等位基因特异性引物PCR(NASP—PCR)两种技术 ,并应用于 β2 肾上腺素受体及内皮源性一氧化氮合酶基因单核苷酸多态性的研究 ,证实该技术的稳定性和优越性。结论 :等位基因特异性引物PCR技术是一种更为简便、特异性较高、费用少的、便于推广的SNP检测方法 。

高血压病患者β_2-肾上腺素能受体基因编码区三个单核苷酸多态性研究

目的 检测 β2 肾上腺素能受体 ( β2 adrenoceptor ,β2 AR)基因编码区部分序列单核苷酸多态性 (singlenucleotidepolymorphism ,SNP) ,并探讨这些SNP与中国大别山区汉族人群高血压病(essentialhypertension ,EH)的关系。方法 应用荧光标记自动测序法测定 β2 AR基因编码区序列 ,确定SNP位置及类型 ;通过PCR RFLP法对正常血压和EH人群进行SNP基因分型。结果 1175bp范围内共发现 3个SNP ,分别为 + 4 6位A→G、+ 2 5 2位G→A、+ 5 2 3位C→T碱基多态 ,其中 + 4 6位碱基变异导致所编码的第 16位氨基酸由精氨酸变为甘氨酸。 + 2 5 2位SNP各基因型AA、GA、GG频率在正常血压和EH人群中的分布有显著性差异 ( χ2 =6.0 2 ,P <0 .0 5 ) ,位于 + 4 6bp和 + 5 2 3bp处的SNP各基因型在两组人群中的分布差异无显著性。结论 β2 AR基因 + 2 5 2位SNP与大别山区人群EH相关 ,+ 4 6和 + 5 2 3位SNP可能仅是基因多态性标志。