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Biological behaviors of two novel syngeneic human osteosarcoma cell lines
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作者 王晋 《外科研究与新技术》 2011年第2期123-124,共2页
Objective To characterize and compare the different biological behaviors of two novel human osteosarcoma cell lines,Zos and Zos-M,established respectively from the primary site and the skip metastasis of an osteosarco... Objective To characterize and compare the different biological behaviors of two novel human osteosarcoma cell lines,Zos and Zos-M,established respectively from the primary site and the skip metastasis of an osteosarcoma patient.Methods Two 展开更多
关键词 cell Biological behaviors of two novel syngeneic human osteosarcoma cell lines
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人成骨肉瘤MG-63细胞分化特性及分化过程中的基因表达 被引量:8
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作者 罗湘杭 廖二元 +1 位作者 周后德 伍贤平 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,共4页
观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质... 观察人成骨肉瘤MG 6 3细胞分化特性及分化过程中的基因表达。在细胞培养的不同时间 ,用α 磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶 (ALP)活性 ;放射免疫法测定骨钙素 (BGP)含量 ;半定量逆转录聚合酶链反应测I型胶原、基质金属蛋白酶 (MMP) 1和基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) 1基因mRNA表达 ;VanGieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果表明MG 6 3细胞接种培养第 7d后I型胶原基因表达较高。MMP 1表达量随时间推移逐渐增加 ,至第 2 4d达到高峰。第 1~ 9dTIMP 1表达量逐渐增加 ,其后基本恒定。ALP活性第 0~ 12d逐渐增高 ,至第 12d达最高 ,其后逐渐下降。第 18d后 ,细胞有许多大小不等的结节形成 ,I型胶原结节染色较无结节处深。MG 6 3细胞具有成骨细胞表型特征。MG 6 3细胞生长分为细胞增殖、骨基质成熟、骨基质矿化阶段 ,且I型胶原 ,MMP 1,TIMP 1基因表达及ALP活性呈时间特异性。 展开更多
关键词 MG-63细胞 细胞分化 骨肿瘤 基因表达 人成骨肉瘤
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LJH-OS人骨肉瘤裸鼠原位移植模型的建立及其生物学特性 被引量:10
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作者 师长宏 施新猷 朱德生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第2期102-106,共5页
用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植... 用人成骨肉瘤细胞系LJH- OS的传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植的潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整的纤维包膜,未见肺转移,观察7 周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7 周时有明显消瘦。原位移植的裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤的浸润及转移表达,裸鼠胫骨原位移植模型的恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者的实际情况,该原位移植模型的建立为骨肉瘤的研究提供了良好的实验模型。 展开更多
关键词 胫骨 原位移植模型 裸鼠 人骨肉瘤 肺转移 皮下移植 纤维包膜 生长 生物学特性 传代
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miR-30a抑制人骨肉瘤细胞143B的迁移、侵袭和活力 被引量:2
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作者 张汝益 何方 +3 位作者 王静 邓芳 李琪英 施琼 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第1期12-16,共5页
目的探讨miR-30a对人骨肉瘤细胞143B侵袭、迁移和细胞活力的影响。方法过表达或抑制miR-30a分别处理人骨肉瘤细胞143B。划痕实验观察细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测143B细胞迁移和侵袭能力;MTT实验检测细胞活力;定量PCR实验确认过... 目的探讨miR-30a对人骨肉瘤细胞143B侵袭、迁移和细胞活力的影响。方法过表达或抑制miR-30a分别处理人骨肉瘤细胞143B。划痕实验观察细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测143B细胞迁移和侵袭能力;MTT实验检测细胞活力;定量PCR实验确认过表达miR-30a腺病毒有效性并且检测RUNX2 mRNA表达;Western blot检测细胞中RUNX2总蛋白表达。结果过表达miR-30a抑制了骨肉瘤细胞143B迁移和侵袭(P<0.05),在72 h时,miR-30a明显抑制细胞活力(P<0.01);抑制miR-30a的内源性表达后,143B细胞的迁移和侵袭能力增加(P<0.05),细胞活力也表现出上升水平(P<0.01);同时过表达miR-30a可以抑制RUNX2的蛋白表达,抑制内源性miR-30a后RUNX2蛋白水平表达增加(P<0.05)。荧光素酶活性检测,miR-30a可以靶向于RUNX2(P<0.01)。结论 miR-30a抑制骨肉瘤细胞143B的迁移、侵袭和活力,其作用可以能是通过抑制RUNX2的表达来实现。 展开更多
关键词 miR-30a 人骨肉瘤细胞 RUNX2
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Aurora-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用 被引量:2
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作者 刘志礼 王高 +3 位作者 舒勇 邹平安 周扬 黄山虎 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2010年第10期30-32,36,共4页
目的探讨激光(Aurora)-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用。方法用不同浓度的AZD1152-HQPA(0、10、50、100、500 nmol.L-1)体外作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS24、48、72 h,采用噻唑蓝(MTT)检测AZD1152-HQP... 目的探讨激光(Aurora)-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用。方法用不同浓度的AZD1152-HQPA(0、10、50、100、500 nmol.L-1)体外作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS24、48、72 h,采用噻唑蓝(MTT)检测AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用;采用Western Blotting检测AZD1152-HQPA作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞前后Aurora-B激酶的表达情况。结果 AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞生长抑制作用明显,且抑制呈时间-浓度依赖性。50 nmol.L-1AZD1152-HQPA作用24、48、72 h,人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞中Aurora-B激酶的表达随作用时间的延长而降低。结论 AZD1152-HQ-PA能抑制U2-OS细胞生长,并且抑制作用呈时间-浓度依赖性。 展开更多
关键词 人骨肉瘤细胞株U2-OS AZD1152-HQPA Aurora-B激酶 细胞增殖抑制率
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二膦酸盐对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞中OPG/RANKL表达的影响 被引量:1
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作者 徐万龙 孙治国 +1 位作者 王浩 袁宏 《食品与药品》 CAS 2011年第9期315-318,共4页
目的研究二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,对细胞中成骨细胞护骨素(OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法人骨肉瘤细胞株MG-63细胞培养、传代后分为:二膦酸盐10μmol/L组、二膦酸盐50μmol/L组和阴性... 目的研究二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,对细胞中成骨细胞护骨素(OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法人骨肉瘤细胞株MG-63细胞培养、传代后分为:二膦酸盐10μmol/L组、二膦酸盐50μmol/L组和阴性对照组3组,保温72 h后,应用RT-PCR和Western blot检测干预后OPG和RANKL mRNA和蛋白水平的表达。结果二膦酸盐作用于人骨肉瘤细胞株MG-63细胞后,细胞中OPG mRNA和蛋白水平表达升高,RANKL mRNA及蛋白水平则降低(均P<0.05)。结论二膦酸盐可能通过调节人骨肉瘤细胞株MG-63细胞OPG/RANKL轴的表达,抑制骨肉瘤的溶骨性破坏,对治疗人骨肉瘤有潜在价值。 展开更多
关键词 二膦酸盐 人骨肉瘤细胞株MG-63细胞 护骨素 破骨细胞分化因子
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靶向Bak1的shRNA表达腺病毒构建及其对人骨肉瘤细胞的影响 被引量:1
7
作者 黄红 柴爽 +2 位作者 万雷 王吉利 黄宏兴 《江西医药》 CAS 2018年第4期310-314,共5页
目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western b... 目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western blot检测Bak1基因沉默后的MG63细胞Bak1 m RNA及蛋白的表达,筛选出能高效沉默目标基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行包装扩繁,荧光显微镜观察计算病毒滴度,利用MTT法检测高效沉默的重组腺病毒感染MG63细胞后的细胞活性。结果 (1)测序列结果表明,sh RNA序列已成功克隆入到p Ad-GFP载体上;(2)sh RNA-3的沉默效率最高,扩增纯化后腺病毒滴度达到7.7×108GFU/ml;(3)MTT检测显示与NC对照组相比,sh RNA-3组MG63细胞活性增强(P<0.5)。结论成功构建了沉默Bak1的重组腺病毒,为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 组织构建 Bcl-2拮抗1 基因沉默 人骨肉瘤细胞 细胞活性
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重组人γ干扰素对人骨肉瘤细胞糖皮质激素受体的下调作用及其生物学意义 被引量:1
8
作者 宋亮年 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期115-120,共6页
以人骨肉瘤细胞系(HOS-8603)为模型,研究重组人γ干扰素(rhIFN-γ)对糖皮质激素受体(GR)的调节作用及其生物学意义。方法:GR结合活性的测定采用放射配体结合分析法;GRmRNA的测定用分子杂交法。结果:... 以人骨肉瘤细胞系(HOS-8603)为模型,研究重组人γ干扰素(rhIFN-γ)对糖皮质激素受体(GR)的调节作用及其生物学意义。方法:GR结合活性的测定采用放射配体结合分析法;GRmRNA的测定用分子杂交法。结果:极低浓度的rhIFN-γ对GR具有下调作用,但对受体亲和力无明显影响;量效关系研究表明,当rhIFN-γ浓度为10IU/ml时,GR浓度已降至最低水平;时效关系研究表明,rhIFN-γ作用36h后对GR的下调作用达到最大效应。用分子杂交方法研究表明,rhIFNγ下调GR的同时,伴有GRmRNA水平的相应降低;rhIFN-γ本身虽然对HOS-8603细胞的增殖分化过程无明显影响,但却可明显削弱糖皮质激素对该细胞系的增殖抑制作用和对碱性磷酸酶活性的诱导作用。结论:rhIFN-γ对HOS-8603细胞GR有非常明显的下调作用,且主要由GRmRNA表达减弱引起;rhIFN-γ对GR的调节作用伴有受体功能活性的相应降低,表现为细胞对糖皮质激素的反应性明显减弱。 展开更多
关键词 糖皮质激素 受体 骨肉瘤细胞 rhIFN-r
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快中子及光子照射人成骨肉瘤OS-732细胞系的实验研究
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作者 冯林春 马林 +6 位作者 黄靖香 杨东 王迎选 孙明学 唐锦华 常葳克 刘成祥 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期841-843,共3页
目的:观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法:用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系,检测各组细胞受照射后的活细胞率、死细胞率及集落形成率。结果:单次照射后24、48及72h单纯快中子及高比例快中子混合线组... 目的:观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法:用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系,检测各组细胞受照射后的活细胞率、死细胞率及集落形成率。结果:单次照射后24、48及72h单纯快中子及高比例快中子混合线组对该细胞系的杀伤力强。结论:快中子及高比例快中子混合线对OS-732细胞系有较强的杀伤作用,对临床上应用快中子治疗骨肉瘤有一定指导意义。 展开更多
关键词 人成骨肉瘤 OS-732细胞系 快中子 光子 放射治疗
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17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物家族的作用
10
作者 黄秋霞 周后德 +1 位作者 廖二元 杜巍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期140-145,共6页
目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van ... 目的观察17β-雌二醇和孕酮对人成骨细胞和人成骨肉瘤MG-63细胞胰岛素受体底物家族 (insulin receptor substrate IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对骨的作用机制。方法从正常骨折病人骨组织中分离正常人成骨细胞,经纯化和培养后,用Van Gieson行Ⅰ型胶原染色、钙钴法行碱性磷酸酶染色、茜素红行钙化结节染色进行成骨细胞鉴定。用半定量RT-PCR检测细胞IRS-1、- 2、-3 mRNA表达量。结果分离和培养的细胞具有正常人成骨细胞的形态,能分泌Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶并形成钙化结节。17β-雌二醇和/或孕酮均不影响人成骨细胞和MG-63细胞IRS-1mRNA 的表达(P>0.05),可诱导人成骨细胞和MG-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调(P<0.05),IRS- 3 mRNA的表达下调(P<0.05)。二者联合干预时作用明显加强(P<0.01)。结论 17β-雌二醇和孕酮均不影响IRS-1 mRNA的表达,但可使人成骨细胞和MC-63细胞IRS-2 mRNA的表达上调, IRS-3mRNA的表达下调,二者联合干预具有正性协同效应。不同的IRS家族成员对同一细胞具有效应的多样性。 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 胰岛素受体底物 人成骨细胞 孕酮 MG-63细胞 receptor IRS-1 碱性磷酸酶染色 mRNA表达量 IRS-2 钙化结节 表达上调 表达下调 人成骨肉瘤 PCR检测 培养的细胞 作用机制 骨折病人 胶原染色 细胞鉴定 Ⅰ型胶原
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不同浓度葡萄糖对人成骨肉瘤细胞株MG63活性的影响 被引量:6
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作者 程萌 陈德才 卢春燕 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期239-242,共4页
目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨肉瘤细胞株MG63的影响,探讨糖尿病导致骨质疏松症可能的发病机制。方法采用4种不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L),培养基连续培养人成骨肉瘤细胞株MG63,观察葡萄... 目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养的人成骨肉瘤细胞株MG63的影响,探讨糖尿病导致骨质疏松症可能的发病机制。方法采用4种不同浓度葡萄糖(5.5 mmol/L、10 mmol/L、20 mmol/L、40 mmol/L),培养基连续培养人成骨肉瘤细胞株MG63,观察葡萄糖对细胞增殖、分泌活性产物的能力、凋亡以及矿化能力等各个方面的影响。结果升高的葡萄糖浓度对细胞的增殖具有一定的促进作用,但增多的细胞数量并没有带来相应细胞活性的增加。相反,细胞分泌碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的能力以及矿化能力不同程度的出现了下降,且在不考虑渗透压因素情况下,细胞凋亡比率增加。结论本实验证实了高糖环境对细胞活性,特别是矿化能力的抑制作用,为临床工作中严格控制血糖防止骨质疏松症的发生提供了理论依据。 展开更多
关键词 葡萄糖 糖尿病 骨质疏松症 人成骨肉瘤细胞株MG63
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Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS存活率的影响 被引量:3
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作者 齐磊 段永刚 +4 位作者 丁英奇 张龙 刘玉章 唐晓龙 伍骥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2120-2125,共6页
目的:探讨Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS细胞存活率的影响及其作用机制。方法:双氢青蒿素(5、10、15和20μmol/L)孵育U-2OS细胞后,采用免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP... 目的:探讨Notch-1下调对双氢青蒿素抗人骨肉瘤细胞株U-2OS细胞存活率的影响及其作用机制。方法:双氢青蒿素(5、10、15和20μmol/L)孵育U-2OS细胞后,采用免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测骨肉瘤细胞中Notch-1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和Notch-1通路下游基因Hes-1的蛋白和mRNA的表达水平。下调Notch-1表达后,采用MTT法、免疫印迹法和细胞迁移实验检测在双氢青蒿素作用下U-2OS细胞的存活率,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达以及U-2OS细胞的迁移能力。结果:免疫印迹法与逆转录聚合酶链反应结果显示双氢青蒿素呈剂量依赖性降低U-2OS细胞中Notch-1、MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05);下调Notch-1表达后,增强了双氢青蒿素抑制U-2OS细胞生长的作用,MMP-2、MMP-9和Hes-1的蛋白表达及细胞迁移能力进一步降低,显著低于加药组(P<0.05)。结论:双氢青蒿素可抑制U-2OS细胞中Notch-1通路的活性;下调Notch-1的表达可增强双氢青蒿素抗骨肉瘤的作用。 展开更多
关键词 NOTCH-1 双氢青蒿素 人骨肉瘤细胞株U-2OS 细胞存活率
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直接原位RT-PCR检测人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型表达 被引量:3
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作者 杨开初 廖二元 +1 位作者 罗湘杭 周后德 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期440-444,共5页
目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性... 目的观察人成骨肉瘤MG63细胞株雌激素受体亚型mRNA表达特征。方法用直接原位RTPCR及激光共聚焦显微镜观察MG63细胞株在培养第6及第9天ERα、ERβmRNA表达。结果各检测点均见一定量的荧光弥散于细胞内。阳性对照点荧光较其他两点强,阴性对照点荧光明显减弱,仅见少量背景荧光。ERα的荧光强度强于ERβ。结论(1)MG63细胞株作为成骨细胞模型,存在ERα和ERβ基因的mRNA表达。(2)骨基质成熟早期阶段MG63细胞株的ERα表达比ERβ丰富,这表明两者在功能上存在差异。 展开更多
关键词 成骨肉瘤 MG-63细胞株 雌激素受体亚型 原位RT-PCR 激光共聚焦显微镜 检测
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雷公藤甲素对人骨肉瘤细胞阿霉素耐药株的逆转作用及机制研究 被引量:4
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作者 高峰 王秀会 +5 位作者 夏胜利 周小小 易存国 付备刚 沈超 王明辉 《陕西医学杂志》 CAS 2021年第6期648-651,656,共5页
目的:探讨雷公藤甲素(TPL)体外给药对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADR)耐药株(U2OS/ADR)多药耐药(MDR)的逆转作用及可能机制。方法:使用人骨肉瘤细胞株U2OS,利用浓度递增法建立耐药骨肉瘤细胞U2OS/ADR模型。设置空白组、对照组、TPL组和维拉帕... 目的:探讨雷公藤甲素(TPL)体外给药对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADR)耐药株(U2OS/ADR)多药耐药(MDR)的逆转作用及可能机制。方法:使用人骨肉瘤细胞株U2OS,利用浓度递增法建立耐药骨肉瘤细胞U2OS/ADR模型。设置空白组、对照组、TPL组和维拉帕米阳性对照组(VER组)。CCK-8法测定TPL处理对U2OS/ADR细胞增殖和ADR敏感性的影响。以罗丹明123(Rh123)作为内标,采用流式细胞术评估细胞P-糖蛋白(P-gp)外排作用。实时定量PCR(qRT-PCR)检测TPL对MDR1基因转录的影响。Western blot检测TPL对磷酸化磷酸肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、MDR1和肺耐药相关蛋白(LRP)表达的影响。结果:与对照组相比,TPL组使ADR对U2OS/ADR细胞生长的抑制作用提高(P<0.05)。TPL组Rh123阳性信号计数高于对照组(P<0.001)。与对照组相比,TPL组MDR1、LRP、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平及MDR1基因mRNA水平下降(均P<0.05)。结论:TPL具有抑制U2OS/ADR细胞生长、提高U2OS对ADR敏感性的作用,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化、下调U2OS/ADR细胞MDR1和LRP基因表达、抑制P-gp对细胞毒物质的外排有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 多药耐药基因 人骨肉瘤细胞阿霉素耐药株 PI3K通路 P-糖蛋白 肺耐药相关蛋白
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人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响 被引量:2
15
作者 王立民 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1715-1719,共5页
目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细... 目的:探讨人参皂苷Rh2对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:采用流式细胞术Annexin V-PI双染法和MTT法检测MG-63细胞的凋亡变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Cyt C和激活型caspase-3的蛋白水平。结果:流式细胞术和MTT法结果显示人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡。免疫印迹法结果表明,与空白对照组相比,给药组细胞Bax的蛋白表达显著增加,Bcl-2的蛋白表达显著减少,Bcl-2/Bax比值减少;线粒体中Cyt C蛋白表达显著减少,而胞浆中表达显著增加;激活型caspase-3蛋白水平显著增加(P<0.05)。结论:人参皂苷Rh2呈浓度依赖性促进MG-63细胞的凋亡,其凋亡过程可能与调控线粒体凋亡通路相关蛋白有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RH2 人骨肉瘤细胞MG-63 细胞凋亡
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Tumor blood vessels formation in osteosarcoma:vasculogenesis mimicry 被引量:45
16
作者 蔡宣松 贾永伟 +1 位作者 梅炯 汤如勇 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期94-98,共5页
BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarco... BACKGROUND: Osteosarcoma is characterized by high neovascularization and a high propensity for metastasis through bloodstream. This study was to examine whether there is evidence for vasculogenic mimicry in osteosarcoma and to illustrate mechanism of tumor blood vessels formation in osteosarcoma. METHODS: Osteosarcoma cell lines (U-2OS) were tested for their ability to form tubular networks in three-dimensional culture containing type I collagen. The structures of the tubular networks were observed with phase contrast microscope and transmission electron microscope (TEM). Morphometric studies using hematoxylin and eosin (HE) stain and CD31 immunohistochemical stain to show tumor-lined channels in human osteosarcoma were also performed. RESULTS: Observation with light microscope and TEM showed that highly aggressive osteosarcoma cell lines (U-2OS) formed networks containing channels when grown in three-dimensional culture containing type I collagen, in the absence of endothelial cells or fibroblasts. Morphometric observation using HE stain and CD31 immunohistochemical stain showed that tumor cell-lined channels were also detected in vivo in osteosarcoma; by comparison, all vascular areas in the pedicle of osteochondroma or outside osteochondroma were endothelial-lined. CONCLUSION: These observations strongly suggest that aggressive osteosarcoma cells may generate vascular channels that facilitate tumor perfusion independent of tumor angiogenesis and have the ability of vasculogenic mimicry. 展开更多
关键词 Bone Neoplasms cell line Tumor Collagen humans IMMUNOHISTOCHEMISTRY Neovascularization Pathologic osteosarcoma Research Support Non-U.S. Gov't
原文传递
细胞骨架染色中不同固定方法的探讨 被引量:9
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作者 张维 骞爱荣 +4 位作者 高翔 胡丽芳 瓮媛媛 韩晶 商澎 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第1期149-153,共5页
探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定,然后分别对微丝和微管进行染色、封片,... 探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响,以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定,然后分别对微丝和微管进行染色、封片,采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明,0.5%戊二醛固定的细胞,微丝呈清晰的束状纤维,微管呈有规律的束状纤维;95%乙醇固定的细胞,微丝纤维连贯性差,微管纤维非常清晰;4%甲醛固定的细胞,微丝纤维之间比较模糊,微管纤维呈圆弧状,联贯性较差;无水冷丙酮固定的细胞,微丝明显皱缩,呈模糊状,微管清晰可见,连贯性较好。因此,不同固定液固定的原理不同,要根据实验目的,选择合适的固定方法。 展开更多
关键词 细胞骨架 固定方法 激光共聚焦显微术 人骨肉瘤细胞
原文传递
工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响 被引量:1
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作者 赵文春 吴华 +3 位作者 马伟明 郝海虎 张海军 胡安 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期300-302,共3页
目的研究工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法在某一细胞密度下(0.90×10^4个/m1),用不同磁感应强度(1mT、2mT、3mT、4mT)的工频磁场对MG-63细... 目的研究工频磁场对不同细胞密度人骨肉瘤细胞MG-63体外增殖的影响,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法在某一细胞密度下(0.90×10^4个/m1),用不同磁感应强度(1mT、2mT、3mT、4mT)的工频磁场对MG-63细胞进行体外辐射,然后改变细胞密度进行重复实验(细胞接种密度分别为0.95×10^4个/ml、1.00×10^4个/ml、1.10×10^4个/ml和1.50×10^4个/m1)。完成磁场辐射处理后,采用四唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖水平。结果磁场对MG-63细胞的增殖有明显的诱导效应,不同细胞密度所对应的磁效应明显不同,其中2mT磁刺激组的增值诱导效应最显著。结论工频磁场对MG-63细胞体外增殖的影响不仅与磁场强度有关,也与细胞密度密切相关。 展开更多
关键词 工频磁场 人骨肉瘤细胞MG-63 增殖 细胞密度
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白花蛇舌草注射液对人骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用的实验研究 被引量:1
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作者 谢克恭 唐毓金 +2 位作者 黄煜朗 曾文容 黄可 《中国基层医药》 CAS 2015年第5期663-665,共3页
目的:探讨白花蛇舌草注射液体外对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法通过培养人骨肉瘤MG-63细胞株,以50μL/mL、100μL/mL、200μL/mL、400μL/mL 4个不同浓度的白花蛇舌草注射液作用于该细胞,在12 h、24 h和48 h后通过3... 目的:探讨白花蛇舌草注射液体外对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用。方法通过培养人骨肉瘤MG-63细胞株,以50μL/mL、100μL/mL、200μL/mL、400μL/mL 4个不同浓度的白花蛇舌草注射液作用于该细胞,在12 h、24 h和48 h后通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞的活性及数量。结果50μL/mL白花蛇舌草注射液作用12 h、24 h及48 h后,对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为(2.87±2.22)%、(13.42±2.14)%、(30.8±3.67)%;100μL/mL白花蛇舌草注射液作用12 h、24 h及48 h后,对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为(22.25±1.58)%、(43.34±2.84)%、(66.46±2.64)%,抑制率逐渐增加,差异有统计学意义( t12 h =12.319,t24 h =14.573,t48 h =12.319,均 P<0.05);加药组200μL/mL与400μL/mL浓度作用24 h后细胞完全死亡,镜下观察可见细胞变圆、漂浮,核质比例减少,细胞碎片较多。结论白花蛇舌草注射液对人骨肉瘤MG-63细胞增殖有一定的抑制作用,且抑制作用在一定的剂量范围内呈浓度、时间依赖性,其机制值得进一步研究。 展开更多
关键词 人骨肉瘤MG-63细胞 细胞增殖 白花蛇舌草注射液
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M007介导的光动力疗法对人成骨肉瘤MG63细胞增殖的影响
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作者 周裕凯 吴文知 +2 位作者 张兰 杨春晖 王艳萍 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期41-45,共5页
目的观察新型光敏剂M007介导的光动力疗法(PDT)对体外培养人成骨肉瘤MG63细胞增殖能力的影响。方法取1mL含人成骨肉瘤MG63细胞1×106/mL的单细胞悬液加至培养皿中,分为实验组(M007-PDT组)、空白对照组(B组)、光照对照组(L组)和光敏... 目的观察新型光敏剂M007介导的光动力疗法(PDT)对体外培养人成骨肉瘤MG63细胞增殖能力的影响。方法取1mL含人成骨肉瘤MG63细胞1×106/mL的单细胞悬液加至培养皿中,分为实验组(M007-PDT组)、空白对照组(B组)、光照对照组(L组)和光敏剂对照组(M007组),按分组加入不同浓度M007(0,2,4,8,16μmol/L),分别用多光源红光光照系统或暗反应处理10min。采用AnnexinⅤ-FITC/PI染色的流式细胞分析法,检测各组的细胞残存率及死亡方式;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验和细胞集落形成实验评估不同组残存细胞的增殖能力。实验组和对照组同步进行,每组重复6次。结果 M007浓度为2~16μmol/L时,其介导的光动力疗法能使超过90%的MG63细胞以晚期凋亡/坏死,或成为裸核的方式被灭活,在4~16μmol/L时,维持残存率小于1%;2~8μmol/L M007-PDT组中的残存细胞生长曲线低平,其光吸收值未随培养时间延长而增加(P>0.05),并且不能形成细胞集落,但2μmol/L M007-PDT组偶见一次16个活细胞。结论 M007浓度大于4μmol/L后,其介导的光动力疗法能完全灭活人成骨肉瘤MG63细胞,该技术应用于肿瘤术野血液回收有着良好的前景。 展开更多
关键词 光敏剂 光动力疗法 人成骨肉瘤 MG63细胞 增殖
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