用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究不同地理株埃及伊蚊的分化

目的 用RAPD技术对实验室饲养的广东、海南、台湾和印尼Baro等 4个不同地理株的 8只雌蚊进行随机扩增多态DNA分析。方法 随机扩增多态性DNA(RAPD)技术。结果 选用 2 0个随机引物进行扩增 ,有 8个引物表现清晰的RAPD谱带并呈显著多态性。UPGMA法构建的分子系统树表明埃及伊蚊 4个地理株之间存在着一定程度的遗传分化。结论 用RAPD方法可以区分不同地理株埃及伊蚊。

不同地理株埃及伊蚊经口接种登革2型病毒的感染性研究

目的 研究海南、广东、台湾和印尼Baro等 4个地理株埃及伊蚊对登革 2型病毒的感染情况。方法 分别用鼠血和猪血配制不同病毒滴度的病毒混悬液经口接种埃及伊蚊 ,间接免疫荧光检测蚊脑液病毒抗原。结果 用鼠血病毒混悬液时 ,印尼Baro株对登革 2型病毒的感染率与海南株、台湾株的感染率差异有显著性 (海南株 :P =0 .0 0 79<0 .0 1;台湾株 :P =0 .0 116<0 .0 5 ) ,与广东株的感染率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,随着病毒滴度的下降 ,各株埃及伊蚊对病毒的感染率呈明显下降趋势 ;鼠血和猪血各株饱血雌蚊经口接种登革 2型病毒的感染率差异无统计学意义 (χ2 =1.63 2 0 ,P =0 .2 0 14 >0 .0 5 )。结论 不同地理株埃及伊蚊对登革 2型病毒易感性存在差异。

吸血诱导的埃及伊蚊海口株后期胰蛋白酶基因测序及与美国株同源性比较

应用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)技术从吸血后 2 4h埃及伊蚊海口株总RNA中扩增出了后期胰蛋白酶编码区cDNA序列。采用自动DNA分析仪进行序列分析 ,并与已知埃及伊蚊美国株后期胰蛋白酶基因及推导的氨基酸序列进行了同源性比较。结果表明 :埃及伊蚊海口株后期胰蛋白酶基因序列与美国株同源性达 98% ,有 11个碱基发生变异 ;氨基酸同源性达 99% ,仅有 3个氨基酸发生变异 ,但与催化位点密切相关的氨基酸及N末端氨基酸序列完全一致。以上结果显示 ,埃及伊蚊胰蛋白酶不同地理株间存在微小的差异。