中华鳖爆发性传染病研究 Ⅳ.不同生化类型嗜水气单胞菌aer基因的PCR比较

用PCR技术对 5 2株不同来源和不同毒力的鳖源嗜水气单胞菌的aer基因进行了比较和分析。结果表明 ,b、d、e和 g四种生化型的嗜水气单胞菌含有特异的 2 0 9bp片段 ,而c和f两种生化型和其他鳖源致病菌却呈阴性反应 ,显示并非所有的嗜水气单孢菌都有aer基因 (产生气溶素 )。

嗜水气单胞菌aer毒素基因的克隆及核苷酸序列分析

以自行分离的嗜水单胞菌分离株AHCS02为研究对象,分析其产生的aer毒素基因结构。根据G enB ank中aer毒素的基因序列(M 16495),设计扩增编码aer毒素成熟蛋白基因的引物,以AHCS02的基因组DNA为模板,PCR扩增出长度为1 332 bp的核苷酸片段,进行pM D 18-T载体克隆。酶切鉴定后进行序列测定和分析,结果表明扩增的片段与M 16495的同源性达92%,将测得的序列登录G enB ank数据库,所得的序列编号为AY 136943。分析推导其核苷酸编码的氨基酸序列显示:其编码443个氨基酸,为aer毒素成熟蛋白的基因,与M 16495相比,氨基酸差异主要集中在422氨基酸残基至436氨基酸残基的位置上,在这个位置上共有8个氨基酸残基发生变化,其中在435和437氨基酸残基之间有一个氨基酸密码子丢失,氨基酸的同源性达95.5%。证明aer毒素基因的5′端保守,3′端变异较大。

临床嗜水气单胞菌耐药性及 Aer 气胞溶素基因研究

目的：研究嗜水气单胞菌临床感染现状及其主要致病因子 Aer 气胞溶素基因的存在形式。方法收集深圳市人民医院龙华分院2012年～2013年间临床分离到的嗜水气单胞菌，VITEK 2 compact 对其进行鉴定与抗生素药物敏感性试验。数据录入 WHONET5.6软件进行临床分布与耐药率分析。提取染色体与质粒基因组，采用聚合酶链反应（PCR）法检测毒力基因 Aer 气胞溶素的存在形式。结果临床共分离到48株嗜水气单胞菌，分布于临床标本痰液16株、血液11株、分泌物10株、尿液7株与粪便4株。病区分布分散化，无集中趋势。耐药率显示对氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦与头孢唑啉耐药率达80％以上，而对阿米卡星、头孢吡肟、左旋氧氟沙星、哌拉西林／他唑巴坦与亚胺培南处于10％以下的低水平。43.7％菌株携带 Aer 基因，位于染色体基因组。结论嗜水气单胞菌临床感染散发，多数染色体基因组携带毒力因子Aer 气胞溶素基因。对青霉素类，一代头孢类耐药严重，对广谱类药物保持敏感性。嗜水气单胞菌作为地区性重要条件致病菌，防范其耐药菌株扩散具有一定意义。

致病性嗜水气单胞菌气溶素基因PCR检测方法的建立

根据我国致病性嗜水气单胞菌分离株 AH-78-2气溶素 ( Aer)基因保守区的测序结果 ,设计 2对引物 ,建立了检测嗜水气单胞菌的 PCR方法。通过对 2 0株嗜水气单胞菌、1 2株相关菌株及 1 57份送检病料的检测 ,并与 SPA-Co A检测结果对照表明 ,PCR方法具有较高的敏感性与特异性 ,可检测最低 1 0 0 cfu的细菌。该方法的建立为致病性嗜水气单胞菌的检测提供了一种简便、快速的新途径 。

罗非鱼嗜水气单胞菌气溶素毒素基因的克隆及功能分析

根据已发表的嗜水气单胞菌气溶素(Aer)毒素基因的序列,设计1对特异性引物,应用PCR技术,扩增GXL3、GXL5、GXL9共3株罗非鱼嗜水气单胞菌的气溶素成熟蛋白基因,克隆到pMD18-T载体上进行序列测定。测序结果表明,3个菌株Aer毒素成熟蛋白的核苷酸序列为1335bp,编码445个氨基酸,其与分离株No.BAA83088的成熟蛋白基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性分别为90.9%、91.4%、91.4%和96.2%、96.6%、96.6%,具有很高的同源性。应用分子生物软件分析广西分离株GXL9 Aer成熟蛋白,该蛋白无跨膜区,拥有较多的疏水区和抗原位点,等电点为5.5。

武汉人民医院找到诱发心肌肥厚早期关键分子开关

据2016年9月16日《科技日报》报道，武汉大学人民医院心血管内科李红良团队在世界上首次揭示，Chaer基因缺失能够显著抑制主动脉狭窄手术诱导的心肌细胞肥厚，减少纤维化心肌重构，从而改善心脏泵血功能；Chaer基因是诱发心肌肥厚的早期关键分子开关，而抑制Chaer基因的表达可有效缓解心肌肥厚的恶化发展。