preS2荧光融合蛋白的表达及其对人端粒酶逆转录酶启动子的激活作用

目的探讨乙型肝炎病毒编码的preS2蛋白对人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子的激活作用.方法PCR扩增人preS2基因,构建preS2与绿色荧光蛋白融合表达的载体pEGFP-preS2,共转染后通过荧光显微镜检测融合基因的表达.将pEGFP-preS2和hTERT全长启动子报告质粒pGL3B-TRTP共转染HepG2细胞,48 h后裂解细胞,双荧光检测分析preS2对hTERT启动子的激活作用.结果荧光显微镜检测证实pEGFP-preS2可在体外有效表达preS2融合蛋白,双荧光试验表明preS2可显著激活hTERT启动子,此激活作用具有剂量依赖性.结论成功构建preS2绿色荧光融合表达载体,并初步证实其对hTERT启动子的激活作用,为进一步探讨肝癌发生中hTERT表达调控机制奠定基础.