大肠埃希菌Afa/Dr家族黏附素的流行病学调查

目的测定大肠埃希菌临床分离株Afa/Dr家族黏附素的携带率。方法用PCR法扩增afa/draC基因片段。用SPSS 13.0统计分析软件分析不同部位来源的大肠埃希菌Afa/Dr家族黏附素携带率情况。结果在分离的600株大肠埃希菌中,Afa/Dr家族黏附素总的携带率为67.0%;分离自泌尿道、消化道、呼吸道及其他部位的大肠埃希菌Afa/Dr家族黏附素携带率分别为71.3%、69.6%、59.1%和46.6%;统计学分析显示:泌尿道和消化道来源的大肠埃希菌Afa/Dr家族黏附素携带率高于其他部位来源的大肠埃希菌。结论本研究结果提示Afa/Dr家族黏附素可能与大肠埃希菌所致泌尿道感染、急性腹泻及呼吸道感染相关。

绵羊肺炎支原体P110/LppT黏附素家族保守区的原核表达和免疫原性分析

绵羊肺炎支原体(Mo) NM2010株的P120蛋白与猪肺炎支原体(Mhp)的黏附素P110高度同源,同属于P110/LppT黏附素N端结构域家族。为了筛选用于研制广谱绵羊支原体肺炎疫苗的保护性抗原,本试验利用生物信息学方法对Mo NM2010株P120蛋白的保守区段、结构、B细胞抗原表位进行预测分析,并对P120基因的N端和C端2个保守区基因片段进行克隆、表达、可溶性分析和抗原特性分析;2个表达产物分别对兔进行免疫试验,用ELISA方法检测免疫兔血清抗体效价和IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ细胞因子浓度。结果显示,P120蛋白N端有信号肽和1个跨膜螺旋,亚细胞定位在外膜,可能是一种外膜蛋白,P120蛋白N端和C端2个保守区段均有较多B细胞线性抗原表位,具有较好的抗原性;经序列测定证实,合成的P120-N和P120-C 2个基因片段的基因序列完全正确,长度分别为1 509 bp和741 bp,表达的重组蛋白分子质量分别为58.1 kDa和29.5 kDa;P120蛋白N端以可溶和包涵体2种形式存在,C端以包涵体形式存在,均具有良好的抗原性;新西兰大白兔经4次免疫后,重组蛋白P120-N组和重组蛋白P120-C组兔血清中均产生了特异性抗体IgG,效价分别为1∶512 000和1∶128 000;与阴性对照组相比,重组蛋白P120-N组和重组蛋白P120-C组兔血清中IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ浓度均极显著升高(P<0.01)。结果表明,重组蛋白P120-N和P120-C可以诱导试验动物机体的体液免疫反应,P110/LppT黏附素家族保守区可以作为广谱绵羊支原体肺炎疫苗的候选蛋白。

尿道致病性大肠埃希菌Afa/Dra家族黏附素afa/draC基因的扩增与分析

目的对尿道致病性大肠埃希菌Afa/Dra家族黏附素的afa/draC基因片段进行扩增和克隆子分析。方法 PCR方法扩增部分afa/draC基因片段,并对PCR产物进行T-A克隆后进行序列分析。结果 PCR和序列分析表明,重组质粒中已带有afa/draC基因片段的克隆,序列分析显示,该基因片段与GenBank中的相应序列对比有3~4个点突变,且突变位点高度一致。比对测序结果与所对应的氨基酸序列,发现突变位点所对应的氨基酸部分发生改变。结论国内大肠埃希菌存在Afa/Dra家族黏附素,但afa/draC基因片段及氨基酸序列与国外报道存在变异。

钙黏素超家族的研究进展

钙黏素是一类介导Ca^(2+)依赖的细胞间黏附的跨膜糖蛋白,主要参与同型细胞间的黏附作用,可与质膜下细胞骨架系统相结合或与信号传导系统相联系,直接或间接影响细胞的活动,参与很多生物学过程,包括细胞识别、细胞骨架排列、细胞增殖、分化、细胞黏附、细胞迁移以及信号传导等。在调节胚胎发育、机体形态发生等方面具有重要作用。钙黏素家族成员的异常表达可能与多种遗传疾病相关。

黏附因子在急性肺损伤中的作用

急性肺损伤是一种以肺内弥漫性炎症细胞浸润、肺血循环障碍、肺毛细血管通透性增加和严重低氧血症为特征的常见的临床综合征 ,病死率为 3 0 %～ 40 %。主要因各种致病因素引起肺微血管内中性粒细胞聚集、黏附、激活 ,并通过释放细胞因子、蛋白水解酶、脂类介质和自由基损伤肺泡毛细血管膜 ,导致急性肺损伤发生 ;其中 ,黏附分子在病程中的作用日益引起人们的重视。本文拟对选择素、整合素和免疫球蛋白超家族等黏附分子在此一过程中的具体作用 ,如其在中性粒细胞的迁移、呼吸爆发和细胞因子的产生中的功能 ,参与微循环障碍的具体环节 ,参与损伤后期肺组织修复的细节 ,以及其在细胞内的传导途径等作一简要介绍 ,以供今后研究和临床工作参考。

E-选择素及其配体与肿瘤关系的研究进展

肿瘤转移是一个多步骤、多环节、多因素参与的复杂过程.研究表明:肿瘤侵袭转移过程中均存在细胞黏附分子及其介导的黏附行为的改变.其中,肿瘤细胞与内皮细胞间的相互作用是造成肿瘤器官特异性转移的重要环节.E-selectin是黏附分子选择素家族中的一员,在激活的内皮细胞表达,其配体SleX、SleA存在于肝癌、食道癌、肠癌等多种肿瘤细胞表面,两者在肿瘤侵袭转移中起着重要的作用.现将E-selectin及其配体与肿瘤关系的研究进展作一综述.

黏附分子与深静脉血栓形成

细胞黏附与深静脉血栓形成有关。黏附分子家族中整合素家族、免疫球蛋白超家族、选择素家族等通过介导血小板、内皮细胞、白细胞等细胞与细胞之间,细胞与细胞外基质的相互作用,广泛参与了深静脉血栓形成及血栓的溶解过程。在此基础上,抗黏附治疗血栓也成为研究的热点。本文着重介绍黏附分子在深静脉血栓形成以及血栓溶解过程中的作用及其机制。

P-选择素在糖尿病中的研究进展

细胞黏附分子选择素家族的重要成员P-选择素（P-selectin）,储存于静止血小板的α颗粒和血管内皮细胞棒管状小体内。

δ原钙黏附素亚家族的生物学功能研究进展

钙黏附素（cadherins）是一类主要介导细胞间同质黏附的钙依赖性跨膜糖蛋白，其作用依赖于Ca2＋，胞外区含由约100个氨基酸组成的多个“钙黏附素重复序列（EC段）”。至今已鉴定出分布于不同组织的钙黏附素100余种，

单增李斯特菌内化素家族蛋白的研究进展

单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰阳性病原菌,是食源性李斯特菌病的病原体,在免疫力低下的人和动物中能够引起高死亡率。该菌致病的关键是其能在非吞噬细胞发生内化作用并在其中存活。内化素家族蛋白(internalins)在单增李斯特菌感染过程中起着至关重要的作用,该族蛋白是一组以N端有保守亮氨酸重复区(LRR)和信号肽为特征的蛋白。过去几十年里,内化素家族蛋白促进单增李斯特菌细胞侵袭和感染的分子基础已逐步阐明:细胞壁锚定内化素,如InlA和InlB,决定了单增李斯特菌黏附侵袭的建立;而分泌型内化素,如InlC,能够帮助单增李斯特菌在细胞间迁移,并逃避宿主的先天免疫。本综述中,总结了内化素蛋白促进单增李斯特菌感染的结构基础和生物学功能,这将有利于我们更好地理解食源性细菌胞内感染时内化素家族蛋白致病性的深层机制。

乳腺癌组织及血浆中RASSF1A,CDH1甲基化的检测及临床意义

目的 研究乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤组织及相应患者血浆中Ras相关区域家族1A（RASSF1A）、上皮型钙黏附素（CDH1）基因启动子区异常甲基化状态及其临床意义.方法 应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法对乳腺癌组织、乳腺良性肿瘤组织及相应血浆中RASSF1A,CDH1基因甲基化状态进行检测.结果 34例乳腺癌组织RASSF1A基因启动子甲基化率为73.53%（25/34）,CDH1基因启动子甲基化率为50.00%（17/34）,相应血浆中RASSF1A的甲基化检出率为55.88%（19/34）;CDH1的甲基化检出率为35.29%（12/34）;联合检测血浆中RASSF1A和CDH1基因启动子区甲基化的敏感性为64.71%（22/34）;而25例良性肿瘤组织RASSF1A基因启动子甲基化率为12.00%（3/25）,CDH1基因启动子甲基化率为4.00%（1/25）,相应血浆中未检测出甲基化的RASSF1A和CDH1基因.RASSF1A,CDH1甲基化率与肿瘤病理类型、患者年龄、有无淋巴结转移的差异无显著性（P〉0.05）.结论 联合检测血浆中RASSF1A和CDH1基因启动子区甲基化,可用于乳腺癌的辅助诊断.

血清可溶性E-选择素检测对乳腺癌远处转移的预测价值

临床上,乳腺癌是女性患者最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率均较高,而远处转移是乳腺癌患者的主要原因[1]。研究表明,黏附分子有效介导肿瘤细胞和血管内皮细胞之间的相互作用,可促进恶性肿瘤的发生发展及侵袭转移,其中可溶性E-选择素作为一种重要的细胞黏附分子,不仅能反映血管内皮细胞的功能活化状态,而且与恶性肿瘤的远处转移密切相关[2]。

选择素在肺缺血-再灌注损伤中的作用

缺血-再灌注损伤是导致移植肺失功能的重要原因。选择素家族作为细胞黏附分子中的一员可以启动白细胞与靶细胞间的滚动、黏附和浸润，促进多种疾病的病理进程。现就选择素家族成员的组成、特点及其在肺缺血-再灌注损伤中的作用做一综述。

大剂量百草枯致肺泡上皮A549细胞凋亡的研究

目的通过大剂量百草枯诱导A549细胞的凋亡，观察上皮标记物E-cadherin、间质标记物q-SMA、凋亡指标caspase-8、caspase-3、caspase-9等的表达，探讨凋亡的可能机制。方法先用不同剂量的百草枯（0．1～1．0mmol／L）溶液与A549细胞共培养24h及48h，观察细胞形态，MTT法分别测细胞存活率。后分别用0．1、0．2、0．3mmol／L百草枯溶液与A549细胞共培养24h，行RT-PCR检测α-SMk、E-cadherin、caspase-8、caspase-3及caspase-9在不同浓度下的mRN＆的表达量。然后用0．1、0．2、0．3mmol／L百草枯溶液与A549细胞共培养24h，行Western-blot检测α-SMA、E-cadherin、caspase-8、caspase-3及caspase-9的蛋白表达情况。结果A549细胞与百草枯溶液共培养24h后，随着浓度的增加，细胞的存活率明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。培养48h后，细胞存活率降低更为明显（P〈0．05）。随百草枯浓度的增大和时间的延长，细胞形态学变化也更为显著。A549细胞与0．1、0．2和0．3mmol／L浓度的百草枯共培养24h。经RT-PCR及Western-blot检测，α-SMA及E-cadherin的mRNA表达量及蛋白表达量随浓度的增加而降低，差异具有统计学意义（P〈0．05），而caspase-8、caspase-9、caspase-3的mRNA及蛋白表达量随浓度的增加而升高（P〈0．05）。结论短时间大剂量的百草枯中毒后，A549细胞的存活率明显降低，细胞形态发生显著变化，E-cadherin、α-SMA的表达量减少。而caspase-8以及下游因子caspase-9和caspase-3明显升高。