基于细胞衰老基因的膀胱癌预后及免疫治疗风险模型的构建和验证

目的通过构建细胞衰老相关标志(SRS)风险评分模型评估膀胱癌的预后和对免疫治疗的反应,探讨SRS在膀胱癌中的临床应用价值。方法从TCGA-BLCA筛选出细胞衰老基因,根据LASSO回归筛选出其中的细胞衰老相关标志基因。基于衰老标志基因构建膀胱癌风险评分模型分析TCGA-BLCA高、低风险组的生存差异和模型拟合度,单因素、多因素Cox回归分析膀胱癌预后危险因素。分析GEO-BLCA、IMvigor210数据库中高、低风险组的总体生存差异和免疫治疗反应。根据膀胱癌组织和正常癌旁组织中β-gal显色反应,明确膀胱癌组织中是否存在细胞衰老。结果共筛选出8个细胞衰老标志基因,根据标志基因构建的风险评分中位数将患者分为高、低风险组。高风险组患者的5年生存率低于低风险组患者(训练集及验证集P<0.05),TCGA-BLCA和GSE13507患者1、3、5年OS的ROC曲线下面积分别为0.657、0.660、0.688和0.665、0.665、0.613。SRS风险评分可作为膀胱癌患者预后的独立危险因素,膀胱癌免疫治疗中反应组较非反应组的SRS风险评分更低(P<0.05)。膀胱癌组织β-gal染色阳性,癌旁正常组织β-gal染色阴性。结论膀胱癌组织中存在细胞衰老现象,SRS风险评分可以预测膀胱癌患者的临床预后,评分较低的患者可以从免疫治疗中获益。SRS是膀胱癌预后和免疫治疗反应的一个可靠的生物标志物。

糖尿病与衰老的相关性及机制研究进展

糖尿病是全世界患病人数较多的慢性疾病之一,严重的糖尿病并发症一直是困扰临床的难题。糖尿病及其并发症的发生机制复杂,且很多机制尚未阐明。近年来,研究发现糖尿病和衰老在发生机制上存在许多交联之处。本文通过文献回顾,总结分析二者的相互作用机制,并加以综述,旨在对今后相关临床与基础研究提供指导。

衰老与颞下颌关节骨关节病

骨关节病是导致中老年人慢性残疾最常见的原因之一,其病因和病理机制目前尚不明确。颞下颌关节骨关节病是一种能够累及整个颞下颌关节组织,导致患者口颌功能障碍及严重疼痛的慢性退行性疾病。近年来,衰老在骨关节病发生发展中的作用越来越受到重视。本文主要就衰老对颞下颌关节软骨细胞及软骨基质影响的研究进展做一概述,供研究参考。

老年性疾病通过cGAS-STING通路调控衰老相关分泌表型

老龄化是癌症、心血管疾病、糖尿病和神经退行性疾病等人类疾病最主要的风险因素之一,而许多衰老性疾病都与细胞衰老相关。细胞在衰老过程中表现出明显的表型变化,这是由代谢、染色质组织和转录活性的改变所驱动的。衰老的一个明显特征是炎症介质的分泌,包括各种细胞因子、趋化因子、细胞外基质蛋白和生长因子,统称为衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)。衰老细胞通过分泌SASP,对许多生物学过程产生重要影响,包括伤口愈合、组织修复、肿瘤形成或体内重组等。此外,与SASP相关的炎症反应被认为是衰老相关疾病的基础,从而发现衰老效应反应的新靶点是至关重要的。最近的科学进展表明,先天免疫应答特别是涉及cGAS-STING途径的免疫应答,会在衰老细胞中触发SASP。该文综述了老龄化疾病衰老细胞中cGAS-STING信号通路对SASP的调控作用。

衰老相关分泌表型的研究进展

衰老被视为一种被动过程,但是随着研究的深入发现衰老细胞分泌一些因子能主动改变周围环境,这些因子被称为衰老相关分泌表型(SASP)。SASP包含多种因子,如生长因子、蛋白酶和炎性因子等,这些分泌因子依赖其所处的生物环境既可以诱导自身衰老又能促进细胞增殖,具有双向调节作用。尽管目前对于SASP的调节尚不完全清楚,但核因子κB、CCAAT增强子结合蛋白β、p38丝裂原激活蛋白激酶能够调节SASP的分泌。该文就近年来对SASP的研究进展予以综述。

西瓜噬酸菌hpaB基因的功能研究

瓜类细菌性果斑病(Bacterial fruit blotch,BFB)是西瓜、甜瓜等葫芦科植物上的重要病害,是一种世界范围内重要的检疫性、种传病害,病原菌为西瓜噬酸菌(Acidovorax citrulli)。Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)是西瓜噬酸菌致病过程中的关键毒力因子,参与调节细胞的多种生理生化反应。hpa(hrp-associated)基因是植物病原细菌Ⅲ型分泌系统hrp基因簇的重要组成部分,T3SS分泌蛋白在分泌过程中通常需要hpa基因编码的蛋白质介导,这些蛋白通常有利于植物病原细菌发挥其致病性。为了探究Ⅲ型分泌系统hpaB基因在西瓜噬酸菌致病过程中的功能,以西瓜噬酸菌Ⅱ型菌株Aac5为研究对象,构建hpaB基因缺失突变菌株及其互补菌株,并对致病力、致病相关表型以及相关基因表达量进行测定。结果表明:hpaB基因缺失后,对寄主植物西瓜和甜瓜的致病力显著减弱,并丧失了诱导非寄主烟草HR应答能力,运动能力减弱,生物膜形成能力增强。荧光定量结果表明:hpaB基因缺失后,影响T3SS相关基因及其他致病相关基因的表达。研究表明hpaB基因在西瓜噬酸菌致病过程中起到了重要的作用。

三维胶原HepaRG微球的建立及其体外功能特征

背景:近年来的一些研究显示,HepaRG细胞三维培养模型可较好地模仿体内微环境,与二维培养相比显示出更好的肝分化和功能情况。目的:选择HepaRG人源肝祖细胞制备三维胶原微球,评价胶原微球内细胞适应性培养和功能表达情况。方法:以胶原蛋白作为基质材料,选择HepaRG和HepG2细胞分别建立三维胶原细胞微球模型,形成稳定的细胞球体,以HepaRG普通微球、HepG2普通微球、HepaRG二维培养、HepG2细胞二维培养为对照。培养1,6,12 d后,死活染色法观察细胞存活情况;培养1,6,12,16d后,检测各组上清尿素合成与CYP3A4分泌量;培养12d后,采用qPCR检测CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1、CPS1mRNA相对表达,Western Blot检测肝细胞标志物白蛋白和CYP3A4蛋白表达水平。结果与结论:①连续培养12 d的活死染色显示,三维胶原微球内的活细胞数量较多,死细胞较少,具有较高的细胞活率,并且Hepa RG三维胶原微球内的细胞呈现出多个细胞簇紧密连接的交联结构;②Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的尿素含量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养1,6,12,16 d后的尿素含量高于Hep G2二维培养(P<0.05),Hepa RG三维胶原微球培养1,6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hepa RG二维培养(P<0.05),Hep G2三维胶原微球培养6,12 d后的CYP3A4分泌量高于Hep G2二维培养(P<0.05);③Hepa RG三维胶原微球内的CYP3A4、CYP1A2、UGT1A1和CPS1 mRNA相对表达高于Hepa RG二维细胞(P<0.05),Hep G2三维胶原微球内的CYP1A2相对表达高于Hep G2二维培养(P<0.05);④Hepa RG三维胶原微球内的白蛋白、CYP3A4蛋白表达水平高于Hep G2三维胶原微球、普通微球、二维培养(P<0.05);⑤结果表明,Hepa RG三维胶原微球具有高表达的肝功能水平,可为体外药物代谢评价、组织工程等应用提供研究参考。

皮肤衰老相关分泌表型的作用机制及相关功效原料研究进展

皮肤衰老是衰老研究领域的一个分支,生物标志物可用于客观评价皮肤衰老程度,包括了特定蛋白基因、信号通路的激活以及一系列细胞分泌因子。本文概述了皮肤衰老相关分泌表型(skin aging related secretion phenotype,SASP)的组成及其生理功能、SASP在皮肤衰老过程中的变化,以及针对SASP为功效靶点设计的化妆品功效测试组合方法,旨在对基于SASP靶点的相关功效化妆品研究有一个更加全面深刻的认识。

枸杞多糖对Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞增殖、表型和分泌活性的影响

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对β淀粉样蛋白1-42(amyloid beta peptide 1-42,Aβ_(1-42))诱导的小胶质细胞增殖、表型和分泌活性的影响。方法体外培养小胶质细胞株BV2,被设计为4组:对照组、Aβ组、LBP组和LBP+Aβ组。对照组:加培养液;Aβ组:加培养液和5μmol/L的Aβ_(1-42);LBP组:加培养液和100μg/mL的LBP;LBP+Aβ组:提前用培养液和100μg/mL的LBP干预24 h,再加入5μmol/L的Aβ_(1-42);4组的干预时间均为8 h。噻唑蓝法估计4组细胞数目的变化情况,血清酶联免疫吸附试验技术测量培养悬浮液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及白介素-10(interleukin-10,IL-10)的含量,免疫印迹技术分析细胞的表面分子白细胞分化抗原86(differentiation antigen 86,CD86)和精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)的含量。结果 LBP组和对照组相比,细胞数目,培养悬浮液中TNF-α、IL-1β和IL-10的含量,细胞CD86和Arg-1的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05);与对照组相比,Aβ组的细胞数目减少,TNF-α(184.98±16.30)、IL-1β(98.30±7.16)的量增加而IL-10(30.53±3.45)减少(t=18.219、12.891、10.721,均P<0.05),CD86(0.932±0.024)增加而Arg-1(0.213±0.013)减少(t=15.658、25.484,均P<0.05);和Aβ组组相比,LBP+Aβ组的细胞数目增多,TNF-α(68.09±7.53)、IL-1β(55.91±5.61)的量减少而IL-10(51.57±5.86)增加(t=15.946、11.415、7.579,均P<0.05),CD86(0.782±0.017)减少而Arg-1(0.402±0.020)增加(t=12.493、19.408,均P<0.05)。结论 Aβ_(1-42)能够诱导小胶质细胞数目减少,促进细胞分泌TNF-α、IL-1β和表达CD86,抑制细胞分泌IL-10和表达Arg-1,而枸杞多糖能够拮抗上述指标的改变。