江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒神经生长因子的分离纯化和特性

神经生长因子（ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗ ｔｈ ｆａｃｔｏｒ， Ｎ Ｇ Ｆ）是第一个被发现，也是迄今为止研究得最为清楚的一种神经营养因子 利用 Ｐ Ｃ１２ 细胞生物活力测定为跟踪检测手段，分别经过 Ｃ Ｍ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｃ Ｌ６ Ｂ、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５ 及 Ｆ Ｐ Ｌ Ｃ ｍ ｏｎｏ Ｓ层析，从３０ ｇ 江浙蝮蛇粗毒中分离纯化到２００ μｇ Ｎ Ｇ Ｆ，纯化倍数高达１０５经 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 测定，该蛋白分子量为 ２６ ｋ Ｄ，由两个亚基通过二硫键交联组成二体形式等电聚焦显示其等电点为６７，与氨基酸组成分析结果相吻合 江浙蝮蛇神经生长因子的生物活力水平与小鼠２５ Ｓ Ｎ Ｇ Ｆ相当，在１～１００ μｇ／ Ｌ 的浓度范围内维持 Ｐ Ｃ１２

江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)毒的抑菌作用及其抑菌组分L-氨基酸氧化酶的分离纯化

我们用平皿测活法研究了江浙蝮蛇毒对真菌和大肠杆菌生长的抑制作用,并对其抗细菌的组分进行柱层析分离纯化,得到组分单一的LAO:不仅有抑菌作用还有L-氨基酸氧化酶的活性。纯化后LAO的比活力为808U/mg。蛇毒经酸性聚丙烯酰胺电泳后测抑菌活性发现有3个抑菌组分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),LAO为抑菌组分Ⅱ。

浙江产蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas)蛇毒抗凝血活酶组份抗凝机理的研究

应用三次离子交换柱层析和一次凝胶过滤从浙江产蝮蛇毒中分离纯化了抗凝血活酶组份。测定出该组份由119个氨基酸残基组成,分子量为15,000道尔顿,等电点为9.4,N—末端为组氨酸。纯化的抗凝血活酶组份在体外对血浆重钙化时间有显著影响,但不延长血浆凝血酶原时间和凝血酶时间,对纤维蛋白也无溶解作用,极低浓度(0.5微克/毫升)的抗凝组份就能抑制血液凝血活酶的生成。家兔静脉注射抗凝血活酶组份后十分钟,全血凝固时间和血浆重钙化时间均明显延长,但血浆凝血酶原时间、纤维蛋白含量和全血凝块溶解时间却不受影响。蝮蛇毒抗凝血活酶组份具有磷脂酶A_(2)活性,但血浆中磷脂的水解似乎并不是血浆凝固延迟的主要原因,很可能是抗凝血活酶组份能够同血浆中凝血活酶组份(磷脂部份)可逆地结合,从而干扰了凝血酶原的活化。

浙江产蝮蛇Agkistrodon halys(Pallas)蛇毒磷酸二酯酶的酶学性质及其对大分子核酸的作用

1.以双对硝基苯磷酸钠为底物,测得蝮蛇毒磷酸二酯酶的最适pH在10左右,最适温度在60℃左右;酶在37℃和60℃的Km分别为5.65×10^(-4)M和7.97×10^(-4)M。2.酶在pH5—10.5范围和50℃以下稳定。3.钙离子和镁离子对酶活力有激活作用,但钡离子、镁离子、锌离子、二价铅离子、钴离子、二价和三价铁离子、锰离子、镍离子等都有不同程度地抑制作用。4.除乙酸根离子外,碳酸根,硫酸根,乙二胺四乙酸根、磷酸根,钼酸根,酒石酸根,柠檬酸根,亚硝酸根,巴比妥酸根和硫代硫酸根等阴离子都有不同程度地抑制作用。5.蝮蛇毒磷酸二酯酶能充分水解RNA和DNA但后者的水解速度比前者快许多。

刺络拔罐联合蛇伤外敷散治疗蝮蛇咬伤的临床疗效观察

目的观察刺络拔罐联合蛇伤外敷散治疗蝮蛇咬伤的临床疗效。方法选取2022年1~12月在我院中医外科住院治疗的蝮蛇咬伤患者60例,随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用刺络拔罐联合蛇伤外敷散治疗,观察比较两组患者的症状体征、临床疗效以及安全性指标。结果两组患者的临床疗效比较,治疗组的总有效率为100%,高于对照组的93.33%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的症状与体征积分均有降低,治疗组的降低幅度优于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);治疗组在肿胀范围、疼痛症状方面的改善效果明显优于对照组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组患者治疗过程中均无明显不良反应。结论刺络拔罐联合蛇伤外敷散治疗蝮蛇咬伤的临床疗效确切,可有效缓解蝮蛇咬伤所致的局部肿痛不适,应用安全可靠,值得临床推广应用。

蝮蛇咬伤中医治疗优化方案的疗效评价

目的评价中医优化方案治疗蝮蛇咬伤的临床疗效。方法回顾研究蝮蛇咬伤住院患者资料,根据中医治疗方案的不同,将符合纳入标准的病例分为对照组87例、试验组82例,对照组采用未优化中医方案,试验组采用优化中医方案,2组均配合以西医常规治疗,比较2组治疗前后伤肢肿胀疼痛程度、症状与体征积分、炎症指标、脏器功能指标、治愈率、治愈时间。结果在伤肢肿胀疼痛程度及症状消失时间、症状与体征积分方面,试验组治疗效果较对照组更为显著(P<0.05);2组治疗后6 d,WBC、N%、CRP、ALT、AST、Cr、NGAL、CK-MB指标均降低(P<0.05),试验组CRP、ALT、AST、Cr、NGAL指标较对照组降低更明显(P<0.05),但在降低CK-MB方面,2组效果相当,无明显差异(P>0.05);治愈率方面:试验组(97.56%,80/82)显著高于对照组(88.51%,77/87)(P<0.05),治愈时间方面:试验组较对照组用时更短(P<0.05)。结论中医优化方案能快速缓解蝮蛇咬伤肢体肿痛及全身症状、减轻机体炎症反应、改善重要脏器功能,临床效果好,值得推广应用。

抗蝮蛇毒血清与抗五步蛇毒血清对竹叶青蛇咬伤患者凝血功能及炎症指标的影响

目的探讨竹叶青蛇咬伤患者应用抗蝮蛇毒血清与抗五步蛇毒血清治疗对凝血功能及炎症指标的影响。方法回顾性分析2022年1月至2023年12月我院收治的60例竹叶青蛇咬伤患者的临床资料,按照治疗方案不同分为对照组和观察组各30例。对照组给予抗蝮蛇毒血清治疗,观察组采用抗五步蛇毒血清治疗,比较两组患者的凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)]、炎症指标[白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)]水平及并发症发生情况。结果治疗后,观察组的PT、TT、APTT、DD指标水平均低于对照组,FIB水平高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后,观察组的WBC、CRP水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组发生休克、脏器出血、皮肤坏死、多器官功能障碍综合征等并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗蝮蛇毒血清与抗五步蛇毒血清治疗竹叶青蛇咬伤患者均具有一定效果,抗五步蛇毒血清在改善凝血功能指标、炎症指标方面的效果优于抗蝮蛇毒血清,且安全性高。

常规凝血指标和血小板计数与血栓弹力图判断危重型蝮蛇咬伤患者严重程度的临床价值

目的探讨危重型蝮蛇咬伤患者常规凝血指标、血小板计数(PLT)和血栓弹力图(TEG)对病情严重程度的评估价值。方法选取2010年1月—2014年1月中国人民解放军总医院第一附属医院急救部治疗的危重型蝮蛇咬伤患者68例为研究对象。按局部伤口、神经毒症状、血循毒症状的第2高分,将患者依次分为非危重组(20例)、危重组(27例)和极危重组(21例)。检测常规凝血功能指标〔活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)〕和PLT,描绘TEG,记录血凝时间(R)、血块成型时间(K)、α角和血块强度(MA)。结果 3组APTT、TT比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组PT、FIB、DD和PLT比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,极危重组PT、DD高于非危重组和危重组,极危重组FIB、PLT低于非危重组和危重组,差异有统计学意义(P<0.05)。3组R、K、α角和MA比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中,极危重组R、K较非危重组和危重组延长,极危重组α角、MA小于非危重组和危重组,差异有统计学意义(P<0.05)。APTT、TT、PT和PLT与R呈正相关(r=0.379、0.571、0.061、0.645,P<0.05);TT、PT、DD与K呈正相关(r=0.637、0.611、0.521,P<0.05),FIB、PLT与K呈负相关(r=-0.371、-0.723,P<0.05);TT、PT与α角呈负相关(r=-0.687、-0.702,P<0.05),FIB、PLT与α角呈正相关(r=0.335、0.728,P<0.05);APTT、TT、PT与MA呈负相关(r=-0.567、-0.787、-0.679,P<0.05),FIB、PLT与MA呈正相关(r=0.329、0.639,P<0.05)。结论常规凝血功能指标、PLT及TEG对判断危重型蝮蛇咬伤患者病情严重程度有重要参考价值,其可以较好地评估患者凝血功能状态,有助于提供精确治疗。

蝮蛇伤患者外周血肿瘤坏死因子-α白细胞介素-6的变化及临床意义

目的检测蝮蛇伤患者外周血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的表达，探讨其临床意义。方法80例蝮蛇伤患者按照入院时的病情严重程度分为轻型、重型、危重型；根据多器官功能障碍综合征（MODS）诊断标准分为MODS组和非MODS组；根据抗蝮蛇毒血清干预的时间分为干预前组、干预后6h组、干预后24h组。所有患者均于人院后未做任何处理前和注射抗蝮蛇毒血清后6、24h三个时相点采血收集标本，采用ELISA法检测外周血清TNF-α和IL-6并分析。选取同期30例健康人群为对照组。结果蝮蛇伤患者血清TNF-α和IL-6水平均为危重型最高，对照组最低，且对照组、轻型组、重型组、危重型组两两比较差异均有统计学意义（P〈0．01）；MODS组与非MODS组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）；干预前组、干预后6h组、干预后24h组两两比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论蝮蛇伤患者病情越重，其血清TNF-α、IL-6水平越高；蝮蛇伤患者并发MODS与TNF-α和IL-6密切相关；抗蝮蛇毒血清可以通过中和游离毒素，避免炎症进一步加重。

浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的体外实验研究

目的 :研究浙江蝮蛇毒诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的作用及机理。方法 :采用MTT法测定IC50 值及生长曲线 ,流式细胞仪 (FCM )AnnexinⅤFITC/PI法检测细胞凋亡发生率 ,PI染色法检测细胞周期 ,同时用流式细胞汁FCM及Western blot检测Bcl 2蛋白表达。结果 :浙江蝮蛇毒能抑制Jurkat细胞生长 ,且呈剂量依赖关系 ,并能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡 ,4 8h时作用最强 ,此时Bcl 2蛋白表达下降 ,随后此作用减弱 ,低浓度作用下细胞逐渐恢复生长。结论 :浙江蝮蛇毒能诱导人白血病Jurkat细胞凋亡 ,且呈剂量依赖关系 ,此作用与Bcl

蝮蛇伤患者血清酶学及C反应蛋白变化的临床研究

目的分析蝮蛇伤患者血清酶学及C反应蛋白（CRP）的变化对疾病的病情和预后估计的意义。方法按患者入院时中毒的程度分为轻型、重型、危重型，比较各型之间血清酶及CRP水平；根据SIRS诊断标准将患者分为SIRS组和非SIRS组，比较两组之间血清酶及CRP水平；根据MODS诊断标准将患者分为MODS组和非MODS组，比较两组之间血清酶及CRP水平。结果重型、危重型患者血清酶及CRP水平与轻型比较差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．001）；SIRS组血清酶及CRP水平与非SIRS组比较差异有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）；MODS组血清酶及CRP水平与非MODS组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；SIRS组MODS的发生率明显高于非SIRS组（X^2=19．73，P〈0．001）。结论蝮蛇伤患者病情程度越重，其血清酶学及CRP水平升高越明彤；蝮蛇伤患者并发SIRS时，血清CRP水平升高越明显．MODS发生率越高，病情越严萤：蝮蛇伤患者血清酶学水平与SIRS、MODS的发生关系密切。

江浙蝮蛇毒镇痛组分对吗啡依赖大鼠尾状核神经肽的调控作用

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分对大鼠尾状核中神经肽水平的调控作用。方法:应用微透析技术,探针定位于大鼠尾状体,以人工脑脊液透析,HPLC检测亮氨酸脑啡肽、β-内啡肽和P物质的含量,动态监测其变化。结果:在吗啡依赖大鼠给予C4组分后,尾状核亮氨酸脑啡肽含量显著增高,为可乐定组的1.5倍,并持续作用8h以上,而β-内啡肽和P物质含量变化较小。结论:C4组分主要作用于亮氨酸脑啡肽,通过提高其含量发挥镇痛作用。

舒肝宁注射液对蝮蛇伤患者肝肾功能的保护作用

目的观察应用舒肝宁注射液对蝮蛇伤患者肝肾功能的保护作用。方法将122例蝮蛇伤合并肝肾功能损害的患者随机分为观察组（61例）和对照组（61例）。既往有急慢性肝病、肾病及其他存在影响观察指标的病例未列入本试验中。对照组只进行常规治疗；观察组除常规治疗外，予舒肝宁注射液20mL以5％葡萄糖注射液250mL稀释后缓慢静脉滴注，1次／d，疗程7～14d。分别检测治疗前、治疗第7天及治疗第14天血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、24h尿量及血清总胆红素（TBil）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）。结果观察组治疗第7天血清SCr、BUN、ALT和AST明显低于对照组（P均〈0．05）；观察组治疗第14天血清TBil明显低于对照组，亦明显低于观察组治疗第7天（P均〈0．05）；观察组24h尿量较对照组明显增多（P均〈0．05）。结论蝮蛇伤患者应用舒肝宁注射液对肝肾功能的恢复有积极作用。

中西医结合治疗重症蝮蛇咬伤26例

目的 回顾重症蝮蛇咬伤患者的病历资料,总结重症蝮蛇咬伤的治疗经验.方法 对26例重症蝮蛇咬伤患者采用中西医结合疗法进行治疗.西医疗法以局部扩创排毒、注射抗蝮蛇毒血清及对症治疗为主,对危重症患者应用机械通气、血液净化、重症监护等治疗技术;中医疗法以内服院内协定方蛇伤冲剂及采用季德胜蛇药片内服外敷为主.结果 治愈22例,好转3例,无效1例,总有效率为96.1％.发生脏器功能损害26例,治疗后恢复25例.住院时间2～16 d,平均（7.72±1.35）d.结论 中西医结合治疗重症蝮蛇咬伤,治愈率高,脏器功能损害恢复好,住院时间短.

717解毒合剂通过抑制NF-κB信号通路和STAT3活性减轻蝮蛇咬伤大鼠肝脏炎症反应

目的研究717解毒合剂对蝮蛇伤大鼠肝脏NF-κB信号通路与STAT3活性相关基因表达的影响,探讨717解毒合剂抗蝮蛇毒急性肝损伤作用。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、717解毒合剂(25、60和150 mg生药/kg)组和抗蝮蛇毒血清组。除正常对照组外,其余各组制备蝮蛇伤大鼠模型,造模成功后2 h,正常对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,抗蝮蛇毒血清组尾静脉注射抗蝮蛇毒血清,中药组灌胃717解毒合剂,每天1次,第6天后收集血清、肝脏。镜下观察各组肝脏病理学变化,ELISA法检测各组血清中C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-4(Interleukine-4,IL-4)、白细胞介素-6(Interleukine-6,IL6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)及β-干扰素(Interferon-β,INF-β)等炎性因子浓度水平,Western blot法检测肝核因子κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)抑制蛋白α(Inhibitor kappa B alpha,IκBα)、信号转导和转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、磷酸化信号传导与转录活化因子3(p-STAT3)的蛋白表达水平,RT-RCR检测IκBαmRNA的表达水平,免疫组化检测肝核因子κBP50(NF-кBP50)、核因子κBP65(NF-кBP65)蛋白表达。结果与模型组比较,717解毒合剂能降低血清炎症因子水平(P<0.05或P<0.01),显著提高IκBαmRNA及其蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01),抑制NF-кBP50蛋白的高表达(P<0.01),降低STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论717解毒合剂可能通过抑制NF-κB信号通路及STAT3磷酸化,减轻蝮蛇伤大鼠肝脏炎症反应,促进肝损伤修复,从而降低因蛇伤致多脏器综合征的发生率,对蛇伤治疗具有积极意义。

江浙蝮蛇神经生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化

将江浙蝮蛇（ＡｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｈａｌｙｓＰａｌａｓ，Ａ．ｈ．Ｐ．）神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）基因克隆于分泌型原核表达载体ｐＥＴ２２ｂ＋，以Ｃ端融合了６个组氨酸的形式在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中进行了ＩＰＴＧ诱导表达。ＳＤＳＰＡＧＥ分析确定有一比理论值略大的诱导表达条带，其表达量占全菌蛋白质的２０％左右，且表达蛋白质主要是以包涵体的形式存在。用６ｍｏｌ／Ｌ的盐酸胍溶解包涵体后，利用固定化金属离子（Ｎｉ２＋）配体亲和层析一步纯化目的蛋白质，纯度可达８０％左右。对该重组肽进行变复性研究。利用ＰＣ１２细胞进行生物活力测定，证明表达产物具有ＮＧＦ生物活力。

140例蝮蛇咬伤时间与心肌酶谱及肢体肿胀关系分析

目的:探讨蝮蛇咬伤后患者就诊时间与心肌酶谱及伤肢肿胀的关系,以期指导临床治疗。方法:回顾性分析蝮蛇咬伤中毒患者140例的临床资料,根据就诊时间的不同分为三组,分别为:就诊时间≤12 h组(A组),12 h<就诊时间≤24 h组(B组)和就诊时间>24 h组(C组),并根据患者肢体肿胀程度分轻度、中度、重度肿胀三组。分组统计入院时间与心肌损害有关的心肌酶谱指标,并统计肢体肿胀与相关的心肌酶谱指标,进行临床关系分析。结果:入院时间与心肌酶谱升高相关,24 h以后心肌酶谱明显升高。蝮蛇咬伤肢体肿胀发展快,12 h以内已达到高峰。中、重度肿胀组与轻度肿胀组比较,心肌酶谱各项指标明显增高,比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:蝮蛇咬伤后肢体肿胀及心肌损害发展快,因此应尽快进行受伤肢体肿胀的治疗,并应尽早防治心肌损害。

717解毒合剂对蝮蛇毒所致局部组织损伤的保护作用与机制研究

目的研究717解毒合剂对蝮蛇咬伤动物模型局部组织损伤的保护作用及其可能的机制.方法将59只健康SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水(NS)对照组(n=12)、蝮蛇毒模型组(n=9)、抗蝮蛇毒血清组(n=11)和717解毒合剂25、60、150 mg/kg组(均n=9).采用皮下注射50 g/L蛇毒溶液建立蝮蛇毒模型,NS对照组予以等量NS.制模成功后2 h,抗蝮蛇毒血清组于尾静脉注射抗蝮蛇毒血清(每只0.6 mL),717解毒合剂组分别予以25、60、150 mg/kg 717解毒合剂生药灌胃(每日1次,连用6 d),NS对照组和蝮蛇毒模型组予以等量NS灌胃,6 d后取各组大鼠血清及大腿腓肠肌.另取15只健康KM小鼠随机分为NS对照组、蝮蛇毒模型组和717解毒合剂10 mg/kg组,每组5只,制模方法同SD大鼠,制模后717解毒合剂组以10 mg/kg 717解毒合剂生药灌胃(每日1次,连用3 d),3 d后处死.观察各组大鼠局部组织损伤情况以及小鼠腹部皮下出血情况,光镜下观察各组大鼠腓肠肌的病理学改变,采用放射免疫法(RIA)测定血清细胞外基质透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层黏连蛋白(LN)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测各组腓肠肌诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达情况.结果蝮蛇毒制模后大鼠创面均出现典型中毒现象,且随时间延长逐渐加重,72 h后717解毒合剂60 mg/kg组大鼠的局部肿胀程度明显轻于同期蝮蛇毒模型组.制模4 h后KM小鼠腹部皮下可见弥漫性出血,为典型局部中毒,72 h后717解毒合剂10 mg/kg组小鼠的恢复情况明显优于同期蝮蛇毒模型组.蝮蛇毒模型组大鼠血清HA、ColⅣ和LN水平均明显高于NS对照组,而抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组上述指标水平则较蝮蛇毒模型组明显改善,其中HA和ColⅣ水平以717解毒合剂150 mg/kg组改善最为明显〔HA(μg/L):112.83±19.89比162.52±16.29,ColⅣ(μg/L):120.04±21.44比158.77±36.64,均P<0.01〕,LN水平以60 mg/kg组改善最为明显(μg/L:69.09±15.22比96.66±15.72,P<0.01).蝮蛇毒模型组大鼠血清IL-2、TNF-α、NF-κB和TGF-β1水平均明显高于NS对照组,而抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组上述指标水平则较蝮蛇毒模型组明显改善,其中NF-κB水平以717解毒合剂60 mg/kg组改善最为明显(ng/L:14.46±4.42比20.81±2.59,P<0.01).苏木素-伊红(HE)染色结果显示,NS对照组大鼠腓肠肌结构正常;蝮蛇毒模型组大鼠腓肠肌严重弥漫性肌纤维损伤与炎性浸润,可见大量细胞坏死;抗蝮蛇毒血清组大鼠腓肠肌损伤减轻,但炎性浸润显著;717解毒合剂组大鼠炎性细胞浸润减轻,正常细胞数增多.蝮蛇毒模型组大鼠腓肠肌iNOS和COX-2蛋白表达均较NS对照组明显增强,717解毒合剂60 mg/kg和150 mg/kg组的iNOS表达较蝮蛇毒模型组明显减弱,抗蝮蛇毒血清组及717解毒合剂各剂量组COX-2表达均较蝮蛇毒模型组明显减弱,其中以717解毒合剂150 mg/kg组变化最明显(iNOS/β-tubulin:0.71±0.13比0.95±0.14,COX-2/β-tubulin:0.33±0.10比0.67±0.11,均P<0.01).结论717解毒合剂能显著改善小鼠腹部皮下出血症状,促进新生肉芽组织生长,加快创面愈合,减轻腓肠肌病理损害,同时能明显改善大鼠局部组织结构,降低血清中细胞外基质成分含量与炎性因子水平,抑制腓肠肌iNOS和COX-2蛋白表达.

乌司他丁对重症蝮蛇伤患者免疫功能及炎症因子的影响

目的探讨乌司他丁对重症蝮蛇伤患者免疫功能和炎症因子的影响。方法90例重症蝮蛇伤患者按照随机化的原则分为对照组和观察组。对照组45例，给予抗蛇毒血清、抗感染，必要时血液透析及对症支持治疗；观察组45例，给予乌司他丁联合常规治疗。两组患者均采用ELISA法检测血清中IL-6和TNF-α含量；检测治疗前及治疗后1、3、5、7d血清CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8‘水平。结果治疗5d后两组血清IL-6、TNF-α含量均较治疗前明显降低（P〈0．05），观察组的变化较对照组明显（P〈0．05）。治疗后两组患者CD4＋、CD8＋及CIM＋／CD8＋均呈升高趋势。治疗5d后两组CD4＋较治疗前明显升高（P〈0．05），观察组较对照组明显升高（P〈0．05）；治疗前后两组内CD4＋／CD8＋比较，差异无统计学意义（P〉0．05），治疗后5d和7d观察组CD4＋／CD8＋较对照组明显升高（P〈0．05）；治疗前后两组CD8＋在组间及组内比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论重症蝮蛇伤患者的免疫功能下降，以CD4＋、CD4＋／CD8＋下降为主。使用乌司他丁后能提高CD4＋、CD4＋／CD8＋的水平，改善患者细胞免疫功能，降低患者血清中TNF—α和IL-6含量而促进机体恢复。

蝮蛇毒联合加温对白血病细胞株的杀灭作用

应用细胞集落培养技术,定量观察浙江蝮蛇毒联合加温,对正常人骨髓细胞粒单集落形成和白血病细胞株HL60、K562、U937集落形成能力的影响。结果表明,单纯加温42℃45分钟与联合蝮蛇毒素0.001 mg/L加热42℃45分钟时,白血病细胞株集落的生存率HL60分别为18.7％与0;K562为30.7％与2.1％,两者差异比较P<0.001;U937为43.3％与37.8％P<0.05;在联合处理的条件下正常骨髓细胞集落生存率尚有50.9％。研究证实,浙江蝮蛇毒可明显地选择性增强加温对白血细胞株的杀灭作用。