鹌鹑野灰相关蛋白基因外显子Ⅰ的多态性分析

家禽的羽色遗传一直是炙手可热的研究课题,因为羽色是禽类一种重要的质量性状。本研究利用聚丙烯凝胶电泳技术对不同羽色的4个鹌鹑群体(中国黄羽鹌鹑、黑羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑、北京白羽鹌鹑)进行野灰相关蛋白基因(agouti-related protein,Agrp)外显子Ⅰ的多态性检测,探讨Agrp外显子Ⅰ与鹌鹑羽毛颜色的关系,为鹌鹑的育种及生产提供参考。结果表明,Agrp外显子Ⅰ在中国黄羽鹌鹑、黑羽鹌鹑、朝鲜鹌鹑、北京白羽鹌鹑群体中都检测到了2个等位基因,分别用A和B表示。等位基因A在北京白羽鹌鹑中的基因频率最高,达到了0.9500。B等位基因在朝鲜鹌鹑中的频率最高,达到了0.3392,在北京白羽鹌鹑中的基因频率最低,只有0.0500。基因型AA在北京白羽鹌鹑中的基因型频率最高(0.9500),在朝鲜鹌鹑和黑羽鹌鹑中最低(0.4286)。基因型AB在北京白羽鹌鹑中没有出现。测序发现,在黑羽鹌鹑和朝鲜鹌鹑中有AG的杂合位点,而在北京白羽鹌鹑中只有G位点。推测Agrp外显子Ⅰ的AB基因型(或B等位基因)与鹌鹑的黑羽色可能有一定关系。

柚皮素对高脂饮食肥胖大鼠下丘脑神经肽Y和刺鼠色蛋白相关蛋白mRNA表达的影响

目的观察柚皮素对高脂饮食肥胖大鼠下丘脑神经肽Y(NPY)和刺鼠色蛋白相关蛋白(AGRP)mRNA表达的影响。方法 SD大鼠44只随机分为正常对照组、高脂饮食组、高脂饮食+柚皮素低、中、高剂量组[柚皮素剂量分别为12.5、25.0及50.0 mg/(kg·d)]每天定时灌胃,记录进食量。8周末采血测血清瘦素,并取下丘脑,提取下丘脑总RNA,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)测定NPY和AGRP mRNA的含量。结果给予高脂饮食后大鼠血清瘦素增高,下丘脑NPY和AGRP mRNA的表达增高,高脂饮食大鼠给予柚皮素后,血清瘦素水平降低,下丘脑NPY和AGRP mRNA的表达降低。结论柚皮素可明显降低血清瘦素水平,降低下丘脑NPY和AGRP mRNA的表达。

慢性束缚应激大鼠下丘脑ARC中Ob-R、AgRP及NPY的表达及逍遥散的调节作用

目的:探讨慢性束缚应激大鼠下丘脑弓状核(ARC)瘦素受体(Ob-R)、刺鼠基因相关蛋白(AgRP)、神经肽Y(NPY)变化及中药逍遥散的影响。方法:120只SD实验大鼠随机分为正常组、7d模型组、21d模型组、中药组。采用束缚制动法复制应激大鼠模型,中药组在每日束缚制动前灌服中药逍遥散21d。观察实验大鼠摄食量及体质量变化;ELISA方法检测大鼠外周血Leptin含量;Western Blot和qRT-PCR法分别检测各组大鼠下丘脑ARC中Ob-R、AgRP和NPY蛋白及基因表达。结果:在应激第7、14、21天,21d模型组大鼠体质量、摄食量均显著性少于正常组(P<0.01);而中药组大鼠体质量增长明显优于21d模型组(尤其应激第7、21天)(P<0.05),摄食量在应激第14、21天较21d模型组增加明显(P<0.05)。与正常组比较,7d模型组和21d模型组大鼠血清Leptin含量、下丘脑ARC中Ob-R蛋白及基因表达显著性升高(P<0.05,P<0.01),而AgRP和NPY蛋白及基因表达则显著降低(P<0.05,P<0.01);中药组大鼠血清Leptin含量、下丘脑ARC中Ob-R蛋白及基因表达较21d模型组降低(P<0.05,P<0.01),而AgRP和NPY蛋白及基因表达则显著提高(P<0.01),中药组与7d模型组比较上述指标差异无统计学意义。结论:慢性束缚应激大鼠食欲下降、体质量增长缓慢等躯体不适症状可能与其下丘脑ARC中Ob-R表达增多,AgRP、NPY合成、分泌减少有关,中药逍遥散能通过调节ARC中Ob-R、AgRP和NPY蛋白及基因表达水平,有效改善慢性束缚应激大鼠上述躯体不适症状。

丹参酮抑制去卵巢肥胖大鼠体质量及其作用机制

目的研究丹参酮对去卵巢大鼠体质量影响及其分子机制。方法将32只健康雌性SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、雌激素组和丹参酮组,每组8只,实验40 d。记录每组体质量和摄食量,检测大鼠血糖、血脂、肝肾功能等生化指标,检查血清雌激素、瘦素、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,检测下丘脑刺鼠相关蛋白(AgRP)/可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)mRNA和蛋白表达。结果去卵巢组体质量(25 d开始)、每日摄食量、血清三酰甘油、瘦素、TNF-α含量和下丘脑AgRP mRNA和蛋白表达明显高于假手术组、雌激素组和丹参酮组(P<0.05);去卵巢组子宫重量、雌激素含量明显低于假手术组和雌激素组(P<0.05);去卵巢组CART mRNA和蛋白表达明显低于假手术组、雌激素组和丹参酮组(P<0.05)。结论丹参酮可以改善去卵巢后大鼠体质量和血脂代谢;丹参酮抑制去卵巢大鼠体质量可能是通过调控下丘脑摄食中枢AgRP/CART信号通路减少去卵巢大鼠摄食量实现的。

Ghrelin和SHU9119通过促进CART神经元调节小鼠采食

为研究Ghrelin和SHU9119如何作用于小鼠下丘脑可卡因和苯丙胺转录调节因子（CART）神经元参与小鼠采食调控,本试验以免疫荧光技术为主,利用代谢笼和冰冻切片的方式获取试验材料,综合小鼠采食量测定,CART神经元表达数目的统计学分析,及CART神经元、刺鼠相关蛋白（AgRP）神经元同黑皮质素4型受体（MC4R）神经元间共定位信息,对Ghrelin和SHU9119通过不同方式介导CART神经元以参与小鼠采食调控这一作用机理进行初步阐述。结果显示：健康4周龄C57BL/6雄性小鼠,腹腔注射Ghrelin（50μg/kg,n=3）后,其下丘脑背内侧核（DMH）区域CART神经元表达数目显著上升（P〈0.05）;而SHU9119（50μg/kg,n=5）则显著促进弓状核（ARC）区域的CART神经元的表达（P〈0.01）,2种药物促进CART神经元表达的部位并不相同。同时,2种药物的单独注射均可对小鼠采食活动产生一定的促进作用（Ghrelin组n=7;SHU9119组n=7）。有趣的是,CART神经元在DMH区域同AgRP神经元之间具有突触联系,而CART神经元与表达MC4R的神经元之间的共表达关系则发生在ARC区域。结合已有的研究证据,我们推测Ghrelin和SHU9119可能通过不同方式参与对CART神经元表达的调节,并最终影响小鼠采食活动。期望通过本研究为今后进一步探明外周信号分子如何参与促厌食神经元对机体能量代谢调控提供新的思路和证据。