农杆菌介导的抗菌肽基因转入枳壳影响因素研究

以枳壳上胚轴为对象,进行了农杆菌介导的抗菌肽shivaA基因转化影响因素研究。研究结果表明:枳壳卡那霉素选择浓度为60μg/mL;抑菌抗菌素选用头孢噻肟钠较为合适。农杆菌再悬浮液与共培养基中100μMAs的加入可提高转化频率;延迟选择不利于转化率的提高。所得抗性植株经PCR、Southern检测,证实目的基因已整合到植物基因组中。

农杆菌介导转化水稻成熟胚影响因素研究

实验对蜀恢881、蜀恢527、中花9号等7个水稻品种的成熟胚为受体材料,研究了影响农杆菌转化水稻频率的几个重要因素,实验结果表明:CC培养基是籼稻成熟胚愈伤组织的最适诱导培养基,而NB培养基是粳稻品种成熟胚的最适诱导培养基;诱导培养基中添加ABA并不能显著提高籼稻和粳稻成熟胚愈伤组织的诱导率,但在ABA为3mg／L时可以明显改善愈伤质量;适当的低温预处理可以不同程度提高诱导率;农杆菌菌株EHA105对水稻愈伤组织的转化能力优于 LBA4404和AGL1;在分化时,采用适宜的激素配比有利于提高分化率。

农杆菌介导的红豆草转化及其特性

胭脂碱型根癌农杆菌C58和T37菌株通过离体感染红豆草下胚轴和子叶,能形成激素自主性转化瘤组织、畸胎瘤、再生苗和再生完整植株.在再生苗和植株基部可形成次生瘤组织.对转化瘤组织细胞系与正常愈伤组织细胞系的生理生化分析表明,两者可溶性蛋白质含量没有明显差异,但转化系过氧化物酶活性和L-苯丙氨酸解氨酶活性却比正常愈伤组织细胞系高得多.这可能与转化瘤组织中致瘤基因onc的表达改变内源激素水平所致.游离氨基酸含量的分析表明,转化瘤组织的总游离氨基酸含量比正常愈伤组织细胞系高2-3倍,其中除转化瘤组织中的天门冬氨酸含量比正常愈伤组织细胞系高18-37倍,C58转化瘤组织和T37转化瘤组织也显示出明显差异,其中,T37转瘤组织中的谷氨酸,精氨酸和脯氨酸含量比C58转化瘤组织和正常愈伤组织细胞系高得多的.