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PHENOLIC COMPOUNDS PROMOTE HIGH EFFICIENCY TRANSFORMATION OF PLANT EXPLANTS in vitro BY Agrobacterium tumefaciens 被引量:1
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作者 许耀 贾敬芬 郑国锠 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1989年第22期1902-1907,共6页
The development of plant gene engineering requires a simple, rapid and efficient system for genetic transformation. It is recently demonstrated that certain compounds, secreted by host plant cells, are capable of elic... The development of plant gene engineering requires a simple, rapid and efficient system for genetic transformation. It is recently demonstrated that certain compounds, secreted by host plant cells, are capable of eliciting the activation of Agrobacterium and Ti plasmid genes which are involved in promoting T-DNA transfer from the bacterium to the plant cell, 展开更多
关键词 pbenollc compounds Vir-region activation in VITRO transformation t-dna transfer agrobacterium tumefaciens
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根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展 被引量:23
2
作者 黄亚丽 潘玮 +4 位作者 蒋细良 郭平 田云龙 李记鹏 朱昌雄 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期111-114,共4页
根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化是近年建立起来的一种新方法,该方法和以往的真菌转化体系相比具有转化方法简单、材料易得、效率高以及转化子中T-DNA单拷贝插入比例高等特点。就根癌农杆菌转化的丝状真菌种类、转化的具体过程以及影... 根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化是近年建立起来的一种新方法,该方法和以往的真菌转化体系相比具有转化方法简单、材料易得、效率高以及转化子中T-DNA单拷贝插入比例高等特点。就根癌农杆菌转化的丝状真菌种类、转化的具体过程以及影响转化效率的因素等方面进行了综述,并展望了该方法的应用前景。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 丝状真菌 遗传转化 t-dna
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根癌农杆菌介导真菌遗传转化的影响因素及应用 被引量:24
3
作者 陈东亮 李纪元 +1 位作者 范正琪 范妙华 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第7期3317-3320,共4页
综述了根癌农杆菌介导真菌遗传转化的特点、影响因素及其在真菌育种、基因功能鉴定及基因标记与克隆等方面的应用现状,并对其应用前景进行了展望。
关键词 根癌农杆菌 遗传转化 真菌
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高羊茅抗真菌病基因转化的研究 被引量:8
4
作者 马生健 徐碧玉 +1 位作者 曾富华 卢向阳湖南农业大学生物技术系 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1275-1280,共6页
通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因Chi和β-1,3-葡聚糖酶基因Glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(Kan)筛选剂的浓度以200... 通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因Chi和β-1,3-葡聚糖酶基因Glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(Kan)筛选剂的浓度以200~300mg/L为宜,联合运用羧苄青霉素(Carb)与头孢霉素(Cef)作为抗菌素能得到好的脱菌效果;农杆菌的几种共培养方式对转化频率的影响表明,共培养基上垫一层滤纸,愈伤周围滴加浸染液,恢复培养1周后用甘露醇和抗生素液洗涤,是一种好的转化方式。对转化植株进行PCR分析和分子杂交及禾谷镰刀菌挑战接种,发现转化植株有高阳性率及抗真菌能力。 展开更多
关键词 高羊茅 草坪草 农杆菌 转化 真菌
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高Vir毒力根癌农杆菌AGL-1菌株介导丝状真菌转化研究进展和应用 被引量:4
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作者 陈璨 蒋冬花 +3 位作者 齐育平 曹丽凌 黄娜 孙青 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期80-85,共6页
根癌农杆菌介导的真菌转化(ATMT),是分离真菌基因和分析基因功能的重要方法。目前有多种农杆菌菌株可运用于ATMT法,例如LB4404、C58C1、EHA104、AGL-1等。其中AGL-1菌株因其具有Vir毒力高、转化效率高、稳定性好等诸多优点,近年来有关AG... 根癌农杆菌介导的真菌转化(ATMT),是分离真菌基因和分析基因功能的重要方法。目前有多种农杆菌菌株可运用于ATMT法,例如LB4404、C58C1、EHA104、AGL-1等。其中AGL-1菌株因其具有Vir毒力高、转化效率高、稳定性好等诸多优点,近年来有关AGL-1菌株高效转化丝状真菌的应用越来越多。就其转化机制、转化过程、转化率影响因素的最新研究进展进行概述。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 AGL-1菌株 丝状真菌 t-dna 影响因素
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根癌农杆菌在丝状真菌转化中的应用 被引量:6
6
作者 杨长得 刘刚 +1 位作者 郑易之 邢苗 《生物技术通讯》 CAS 2006年第5期784-787,共4页
原生质体转化法是丝状真菌转化的传统方法,但其过程繁琐且转化效率低。根癌农杆菌介导的转化方法原本是进行植物遗传转化的标准方法,但近年来发现该方法还可用于丝状真菌的转化。根癌农杆菌介导的丝状真菌转化具有操作简便、转化效率高... 原生质体转化法是丝状真菌转化的传统方法,但其过程繁琐且转化效率低。根癌农杆菌介导的转化方法原本是进行植物遗传转化的标准方法,但近年来发现该方法还可用于丝状真菌的转化。根癌农杆菌介导的丝状真菌转化具有操作简便、转化效率高、重复性好等优点,从而可以解决丝状真菌转化难的问题。在本文中,就其转化机制、特点和转化条件优化等方面的最新研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 丝状真菌 转化 t-dna
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丝状真菌转化载体的改进 被引量:2
7
作者 李继刚 陈永利 +1 位作者 杨忠祥 郑建坡 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第5期110-113,共4页
为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ。将植物表达载体pDL916上的草丁膦抗性bar基... 为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ。将植物表达载体pDL916上的草丁膦抗性bar基因重组到载体pKS-trpC上,构建成含真菌启动子、终止子调控的bar基因表达盒的中间载体pTrpCBar;之后将该表达盒转移到pPZP111载体上,得到以bar基因为筛选标记的真菌转化Ti质粒pTBZ。上述质粒载体经酶切鉴定和DNA测序证实构建正确,为丝状真菌的农杆菌介导遗传转化提供了新的工具。 展开更多
关键词 农杆菌介导转化 丝状真菌 转化载体 草丁膦抗性基因bar 潮霉素B抗性基因hygB 真菌启动子
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一种适于丝状真菌基因RNA干扰方法的研究
8
作者 张振颖 侯彬彬 刘霞 《中国真菌学杂志》 CSCD 2015年第3期163-167,共5页
目的获得一种适于丝状真菌基因研究用的、由根癌农杆菌介导的RNA干扰方法。方法采用基因重组及菌株干扰体系筛选的方法。结果获得适于根癌农杆菌转染的重组载体PCB309-pfgrt,并将其成功用于对孢子丝菌双组份信号组氨酸蛋白激酶DRK1基因... 目的获得一种适于丝状真菌基因研究用的、由根癌农杆菌介导的RNA干扰方法。方法采用基因重组及菌株干扰体系筛选的方法。结果获得适于根癌农杆菌转染的重组载体PCB309-pfgrt,并将其成功用于对孢子丝菌双组份信号组氨酸蛋白激酶DRK1基因的干扰中。结论该方法优化了根癌农杆菌的转化体系,解决了丝状真菌RNA干扰载体构建困难及干扰效率低下的难题,在丝状真菌基因功能及遗传转化研究方面具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 重组载体 RNA干扰 丝状真菌 根癌农杆菌
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根癌农杆菌介导的食用菌转化研究 被引量:6
9
作者 孙运奇 张津京 +3 位作者 冯志勇 陈明杰 汪虹 陈辉 《食用菌学报》 北大核心 2014年第1期69-75,共7页
近年来,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的食用菌遗传转化研究取得了一定的进展。为此,笔者对农杆菌介导转化的原理、转化的食用菌种类以及影响转化效率的相关因素进行了系统阐述。并分析了农杆菌介导食用菌转化中存在的问题... 近年来,根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的食用菌遗传转化研究取得了一定的进展。为此,笔者对农杆菌介导转化的原理、转化的食用菌种类以及影响转化效率的相关因素进行了系统阐述。并分析了农杆菌介导食用菌转化中存在的问题,以及对该技术在食用菌中的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 食用菌 根癌农杆菌 遗传转化
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根癌农杆菌介导的食用菌遗传转化研究进展 被引量:6
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作者 查丽燕 周伟坚 +3 位作者 王越 张振伟 文华枢 莫美华 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期105-118,共14页
对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化的机制和已成功应用的食用菌种类、转化的具体过程以及影响转化效率的因素等方面进行综述,总结目前农杆菌介导转化法在食用菌基因功能和外源蛋白表达上的应用,分析农杆菌介导食用菌构... 对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化的机制和已成功应用的食用菌种类、转化的具体过程以及影响转化效率的因素等方面进行综述,总结目前农杆菌介导转化法在食用菌基因功能和外源蛋白表达上的应用,分析农杆菌介导食用菌构建随机插入突变体库等方面的问题,并对食用菌无筛选标记遗传转化的应用前景进行展望,以期为食用菌的转基因研究和工程菌株育种提供参考。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 食用菌 转化效率 基因功能
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INTRODUCTION, EXPRESSION AND REGENE-RATION OF THE TiT-DNA GENES IN CULTURED CELLS FROM Hyoscyamus muticus +Nicotiana tabacum SOMATIC HYBRIDS
11
作者 许耀 贾敬芬 郑国锠 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1989年第11期1342-1349,共8页
After the cultured cells from Hyoscyamus muticus + Nicotiana tabacum somatic hybridswere cocultivated with different virulent strains of Agrobacterium tumefaciens harboringoctopine- type Ti plasmid or nopaline- type T... After the cultured cells from Hyoscyamus muticus + Nicotiana tabacum somatic hybridswere cocultivated with different virulent strains of Agrobacterium tumefaciens harboringoctopine- type Ti plasmid or nopaline- type Ti plasmid using the transformation procedurein vitro developed in the present investigation, the TiT- DNA genes were introducedinto the host cells. The onc genes and ocs or nos genes located on TiT- DNA were expres-sed in transformed colonies derived from the cocultivated cells. Although the platingefficiencies of recipient cells were reduced by the agrobacterial treatment, the frequenciesof phytohormone autotrophy ranged from 33.9 to 76 .8% in the cells infected with viru-lent strains in hormone- free conditions, and the frequencies of opine synthase activityamounted to 9.7- 47 .5%. Teratomatous shoots were regenerated from the transformed col-onies. During the course of culture the shoots were no longer to lengthen when theygrew up to 1 -3 cm in length, and they could not be rooted. Following maintenance ?ofthe excised shoots on medium lacking hormones, further tumorous tissues were formedfrom their base sections. Some traits coded for by TiT- DNA were still retained in the leaftissues of regenerated shoots and the secondary tumorous tissues. 展开更多
关键词 cell transformation t-dna transfer opine SYNTHASE HORMONE autonomy agrobacterium tumefaciens
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根癌农杆菌介导的绿色木霉HP35-3转化及表达体系的构建 被引量:2
12
作者 潘家茂 蓝健益 +3 位作者 郑小群 秦秀林 冯家勋 刘君梁 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期822-827,共6页
本研究通过根癌农杆菌介导转化法,构建丝状真菌绿色木霉HP35-3的遗传转化表达体系,并以红色荧光蛋白基因(DsRed2)为报告基因来验证本表达体系。首先构建含有潮霉素抗性基因(HygR)、磷酸甘油醛脱氢酶启动子(Pgpd)和红色荧光蛋白基因(DsRe... 本研究通过根癌农杆菌介导转化法,构建丝状真菌绿色木霉HP35-3的遗传转化表达体系,并以红色荧光蛋白基因(DsRed2)为报告基因来验证本表达体系。首先构建含有潮霉素抗性基因(HygR)、磷酸甘油醛脱氢酶启动子(Pgpd)和红色荧光蛋白基因(DsRed2)的双元载体pCAMT-CPRFP。然后将该双元载体转化到根癌农杆菌EHA105中,并筛选阳性转化子。将该转化子和绿色木霉HP35-3分生孢子进行液体共培养,并在含有150μg/mL潮霉素抗性平板上筛选出绿色木霉HP35-3RFP阳性转化子。最后分别通过如下三种方法检测:提取HP35-3RFP的总DNA进行PCR验证;对菌丝体进行荧光显微镜观察;对菌丝体提取物进行荧光酶标仪检测。结果表明:获得的转化子能够稳定遗传,外源红色荧光蛋白基因整合到木霉HP35-3的基因组中并成功表达。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 丝状真菌 红色荧光蛋白
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根癌农杆菌介导真菌遗传转化的研究及应用 被引量:13
13
作者 胡懋 曾杨璇 +2 位作者 苗华彪 赵元昊 黄遵锡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期4344-4363,共20页
根癌农杆菌介导转化法(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)具有转化效率高、遗传稳定、适用范围广等诸多优点,已成为真菌遗传转化研究中的强有力手段,在真菌基因资源开发、真菌性疾病研究和外源蛋白表达研究中发... 根癌农杆菌介导转化法(Agrobacterium tumefaciens-Mediated Transformation,ATMT)具有转化效率高、遗传稳定、适用范围广等诸多优点,已成为真菌遗传转化研究中的强有力手段,在真菌基因资源开发、真菌性疾病研究和外源蛋白表达研究中发挥巨大作用。本文概述了根癌农杆菌转化法在真菌转化中的研究进展、技术优缺点、转化机制、实验方法和应用现状,着重介绍影响其转化效率的因素并对优化方法进行探讨,展望了该技术在真菌基因资源发掘、基因编辑等方面的应用前景,为今后真菌的遗传转化研究提供参考。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 真菌 遗传转化
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根癌农杆菌介导的菌根真菌遗传转化研究进展 被引量:6
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作者 邹嵘 马嘉楠 张凤 《菌物研究》 CAS 2021年第3期197-206,共10页
菌根真菌与寄主植物之间有着互利共生的关系,相互作用下会形成菌根结构。为了从基因水平上进行共生关系的研究,需要构建高效稳定的遗传转化体系。相比较传统的真菌遗传转化方法,根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的转化方法具有... 菌根真菌与寄主植物之间有着互利共生的关系,相互作用下会形成菌根结构。为了从基因水平上进行共生关系的研究,需要构建高效稳定的遗传转化体系。相比较传统的真菌遗传转化方法,根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的转化方法具有适用范围广、转化效率高等特点,因此成为菌根真菌最理想的转化方法之一。通过探究影响根癌农杆菌遗传转化效率的因素以及所用的RNA干扰和过表达的克隆载体构建,总结出农杆菌转化外生菌根真菌的最适方案。在基因功能研究方面,归纳了已有的一些利用根癌农杆菌对不同类型菌根真菌进行遗传改造的实验结果,对兰科菌根真菌、杜鹃花菌根真菌、丛枝菌根真菌以及外生菌根真菌的基因功能研究进展进行总结。为菌根进行分子水平和遗传学方面的深入研究提供背景资料。 展开更多
关键词 外生菌根真菌 农杆菌遗传转化 双色蜡蘑
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