表达千穗谷Ah-AMP基因的转基因烟草抗病性研究

通过PCR从苋属植物千穗谷(Amarathus hypochondriacus)的总DNA中扩增出苋菜抗菌肽(Ah-AMP)的核基因片段,序列分析结果表明该基因长 261 bp,编码一个由86个氨基酸组成的Ah-AMP前体多肽。在构建Ah-AMP基因的植物表达载体pBinAH916后,通过根癌土壤杆菌介导方法转化了烟草。转化再生植株和T_1代转基因烟草的PCR和Southern blot分析表明,Ah-AMP基因已整合到烟草的染色体中,并为单拷贝整合。T_1代转基因烟草的Northern blot分析结果表明,Ah-AMP基因在转基因烟草中至少在mRNA水平上能正常表达。对T_0代转基因烟草进行烟草青枯病的抗病性试验,筛选出两株抗性较强的植株。对T_1代抗青枯病的统计分析发现,其抗病性比起始品种SR1分别提高了2.24和1.62个级别;其病情指数比起始品种降低49.6％和37.3％。对黑胫病也表现一定的抗性,主要表现在推迟发病时间,减缓发病速度上。这些结果表明Ah-AMP基因在植物抗病基因工程研究中可能是一个有潜在应用价值的基因。