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花生AhPLDα基因植物过表达载体构建及对拟南芥的遗传转化
1
作者
刘义杰
陈四龙
+5 位作者
程增书
王瑾
宋亚辉
郝军会
张朋娟
李玉荣
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016年第6期31-38,共8页
为了明确花生AhPLDα基因在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,以ABA处理的冀花4号花生叶片c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增AhPLDα1和AhPLDα2的全长CDS片段,采用酶切-连接的方法分别将这2个基因定向克隆到植物表达载体p Bar-F3上...
为了明确花生AhPLDα基因在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,以ABA处理的冀花4号花生叶片c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增AhPLDα1和AhPLDα2的全长CDS片段,采用酶切-连接的方法分别将这2个基因定向克隆到植物表达载体p Bar-F3上,冻融法将重组子转入根癌农杆菌GV3101,利用改良Floral-dip法将过表达质粒转入拟南芥。菌落PCR和酶切结果表明,Ca MV35S启动子驱动的过表达载体重组质粒p Bar-AhPLDα构建正确。通过RT-PCR和qRT-PCR验证,表明AhPLDα1和AhPLDα2基因整合到拟南芥基因组中并能过量表达,获得了阳性转基因纯合株系。干旱胁迫试验表明,转基因植株的耐旱性较野生型明显增强。可见,AhPLDα基因参与了干旱胁迫应答过程,是转基因途径提高作物耐旱性的潜在候选基因。
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关键词
花生
ahpldα基因
植物表达载体
转
基因
干旱胁迫信号
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职称材料
题名
花生AhPLDα基因植物过表达载体构建及对拟南芥的遗传转化
1
作者
刘义杰
陈四龙
程增书
王瑾
宋亚辉
郝军会
张朋娟
李玉荣
机构
河北省农林科学院粮油作物研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016年第6期31-38,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31201239
31301354)
+2 种基金
河北省重点基础研究项目(10960122D)
河北省博士基金项目(F14E055610)
现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-14)
文摘
为了明确花生AhPLDα基因在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,以ABA处理的冀花4号花生叶片c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增AhPLDα1和AhPLDα2的全长CDS片段,采用酶切-连接的方法分别将这2个基因定向克隆到植物表达载体p Bar-F3上,冻融法将重组子转入根癌农杆菌GV3101,利用改良Floral-dip法将过表达质粒转入拟南芥。菌落PCR和酶切结果表明,Ca MV35S启动子驱动的过表达载体重组质粒p Bar-AhPLDα构建正确。通过RT-PCR和qRT-PCR验证,表明AhPLDα1和AhPLDα2基因整合到拟南芥基因组中并能过量表达,获得了阳性转基因纯合株系。干旱胁迫试验表明,转基因植株的耐旱性较野生型明显增强。可见,AhPLDα基因参与了干旱胁迫应答过程,是转基因途径提高作物耐旱性的潜在候选基因。
关键词
花生
ahpldα基因
植物表达载体
转
基因
干旱胁迫信号
Keywords
Peanut
ahpldα
gene
Plant expression vector
Transgene
Drought stress signaling
分类号
S332.4 [农业科学—作物遗传育种]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
花生AhPLDα基因植物过表达载体构建及对拟南芥的遗传转化
刘义杰
陈四龙
程增书
王瑾
宋亚辉
郝军会
张朋娟
李玉荣
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2016
0
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